人(ren)輸尿管(guan)上皮(pi)細胞(bao)

迷人的(de)實驗，放(fang)心(xin)的選(xuan)擇

我(wo)司(si)細胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於美國(guo)ATCC,細胞(bao)都是經(jing)過嚴格(ge)質量控(kong)制(zhi)，在(zai)中(zhong)國(guo)大(da)陸努力搭建(jian)正牌(pai)細胞(bao)與國(guo)內(nei)廣(guang)大(da)科研人(ren)員之(zhi)間的(de)溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提(ti)供人輸尿管上皮(pi)細胞(bao)外，還(hai)有(you)更多相關實驗產品，標準品，細胞(bao)株和(he)實驗技術服務等(deng)等(deng)前(qian)期後續服務。

人輸(shu)尿(niao)管上皮(pi)細胞(bao)的產品介(jie)紹(shao)

由(you)我(wo)司(si)*銷(xiao)售(shou)。

細胞(bao)株

　　Q1. 培(pei)養用液(ye)pH對細胞(bao)生(sheng)長的(de)影(ying)響(xiang)

　　由(you)於，大多數(shu)細胞(bao)適宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離此範(fan)圍(wei)對(dui)細胞(bao)將產生(sheng)有害(hai)的影(ying)響(xiang)。各(ge)種(zhong)細胞(bao)對pH的(de)要(yao)求(qiu)也不*相同(tong)，原(yuan)代培養細胞(bao)壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐受(shou)差，無限細胞(bao)系耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但總(zong)體來說(shuo)，細胞(bao)耐酸性比(bi)耐堿(jian)性強壹些，偏酸環境中更利(li)於細胞(bao)生(sheng)長。因(yin)此，我(wo)們在(zai)配制(zhi)培養用液(ye)時，可(ke)把液(ye)體的(de)pH稍微(wei)調(tiao)得(de)偏(pian)酸壹些。液體在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時，溶(rong)液的(de)pH還(hai)會(hui)向上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左右(you)。

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　　Q2. 液(ye)體培養基中谷(gu)氨(an)酰胺(an)的(de)作(zuo)用，及使(shi)用方(fang)法。

　　幾(ji)乎所有的(de)細胞(bao)對谷(gu)氨(an)酰胺(an)有(you)較高(gao)的要(yao)求(qiu)，細胞(bao)需要(yao)谷(gu)氨(an)酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺(que)少谷(gu)氨(an)酰胺(an)時，細胞(bao)生(sheng)長不(bu)良(liang)而死(si)亡。所以(yi)，各(ge)種(zhong)培(pei)養液中(zhong)都(dou)含有較大(da)量的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)。谷(gu)氨(an)酰胺(an)在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定(ding)，應(ying)置-20 ?C冰凍保(bao)存(cun)，用前(qian)加(jia)入(ru)培養基中。加(jia)有(you)谷氨(an)酰胺(an)的(de)液(ye)體(ti)培(pei)養基4 ?C 冰箱儲(chu)存(cun)兩周以(yi)上時，應(ying)重新加(jia)入(ru)原(yuan)來量的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)。基礎醫(yi)學(xue)細胞(bao)中心(xin)在(zai)其(qi)服(fu)務項目(mu)中(zhong)配制(zhi)分裝(zhuang)了(le)高濃度(du)（100倍(bei)）的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷氨(an)酰胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培養基中，其(qi)終(zhong)濃度(du)為(wei)2mM/ml培養基。包裝為(wei)粉紅色，-24?C保(bao)存(cun)。

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　　Q3.細胞(bao)計數(shu)及存(cun)活(huo)測(ce)試
1、原(yuan)理(li)：
(1)計算(suan)細胞(bao)數(shu)目(mu)可(ke)用血(xue)球計(ji)數(shu)盤(pan)或是Coultercounter粒子(zi)計(ji)數(shu)器自動(dong)計數(shu)。
(2)血(xue)球計數(shu)盤(pan)壹般(ban)有二(er)個chambers，每(mei)個(ge)chamber中(zhong)細刻9個(ge)1mm2大(da)正方形(xing)，其中(zhong)4個(ge)角(jiao)落之正方形(xing)再細刻16個(ge)小格(ge)，深度(du)均(jun)為(wei)0.1mm。當chamber上(shang)方蓋上(shang)蓋玻(bo)片(pian)後，每(mei)個(ge)大(da)正方形(xing)之體(ti)積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時，計(ji)數(shu)每(mei)個(ge)大(da)正方形(xing)內之(zhi)細胞(bao)數(shu)目(mu)，乘以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)，再乘以(yi)104，即為(wei)每(mei)ml中(zhong)之(zhi)細胞(bao)數(shu)目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測(ce)試之步驟為(wei)dyeexclusion，利(li)用染(ran)料(liao)會滲(shen)入(ru)死(si)細胞(bao)中而(er)呈(cheng)色(se)，而活(huo)細胞(bao)因細胞(bao)膜完(wan)整(zheng)，染(ran)料(liao)無法滲(shen)入(ru)而不(bu)會呈色。壹般使(shi)用藍(lan)色之(zhi)trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果細胞(bao)不易吸收trypan blue，則用紅(hong)色之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細胞(bao)活(huo)率：活(huo)細胞(bao)數(shu)/(活(huo)細胞(bao)數(shu)+死(si)細胞(bao)數(shu))×100%。計(ji)數(shu)應(ying)在(zai)臺盼蘭(lan)染(ran)色(se)後數(shu)分(fen)鐘內完(wan)成(cheng)，隨(sui)時間(jian)延(yan)長，部(bu)分(fen)活(huo)細胞(bao)也開(kai)始攝(she)取(qu)染(ran)料(liao);因為(wei)臺盼蘭(lan)對蛋(dan)白質有很(hen)強的親(qin)和(he)力(li)，用不(bu)含血(xue)清(qing)的(de)稀釋(shi)液(ye)，可(ke)以(yi)使染(ran)色(se)計數(shu)更(geng)為(wei)準確。

人腎(shen)系膜(mo)細胞(bao)

　　Q4.細胞(bao)特性
在(zai)細胞(bao)培養之前(qian)，我(wo)們要了(le)解(jie)壹(yi)下(xia)妳(ni)所要(yao)養細胞(bao)的基本特(te)性，這點(dian)可(ke)以(yi)從(cong)細胞(bao)的產品說(shuo)明(ming)書(shu)或(huo)者從(cong)ATCC細胞(bao)庫查(zha)詢(xun)。除此之外(wai)我(wo)們還(hai)要(yao)知道每(mei)管(guan)細胞(bao)的數(shu)量(liang)，建議(yi)分(fen)裂或傳(chuan)代(dai)的(de)比(bi)例，和(he)已知(zhi)細胞(bao)的傳(chuan)代(dai)代(dai)次等(deng)信息。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培養基
復蘇(su)細胞(bao)時需要(yao)準(zhun)備(bei)合適的培養基，血清(qing)和(he)細胞(bao)生(sheng)長所(suo)需的(de)添(tian)加(jia)劑(ji)。大部(bu)分培(pei)養細胞(bao)所用的(de)培養體系(xi)，可(ke)以(yi)在(zai)訂購細胞(bao)系時獲(huo)得。
雖(sui)然大多(duo)數(shu)細胞(bao)系可(ke)以(yi)在(zai)不(bu)止(zhi)壹(yi)種(zhong)培(pei)養基中生(sheng)長，但(dan)是當培(pei)養基改變(bian)時，細胞(bao)的性質也會(hui)變(bian)化。因此，使用細胞(bao)庫推(tui)薦的培(pei)養基來培(pei)養細胞(bao)會獲(huo)得(de)的(de)效(xiao)果(guo)。

　　Q6.開(kai)啟凍存(cun)管
1.準備壹個培(pei)養瓶，加(jia)入(ru)適宜細胞(bao)培養的培(pei)養基，液體(ti)體(ti)積按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)的(de)推(tui)薦配置，並平衡(heng)培養基的溫度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)或細胞(bao)的正常(chang)生(sheng)長溫度(du)下(xia)將(jiang)凍存(cun)管輕輕搖(yao)動(dong)。解(jie)凍要快，約(yue)2分鐘或直到冰晶融化即可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴中(zhong)取(qu)出(chu)凍存(cun)管並用浸(jin)泡(pao)或噴灑70%乙(yi)醇的(de)方(fang)式(shi)來(lai)消(xiao)毒(du)。進壹(yi)步的操作均(jun)需在(zai)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)臺中嚴格(ge)無(wu)菌(jun)條件下進行(xing)。
4.擰開(kai)凍存(cun)管的管帽並將內(nei)容物(wu)轉移到(dao)壹(yi)個含有(you)9 ml推(tui)薦培養基的無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)。通(tong)過溫和離(li)心（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍保(bao)護劑（DMSO）。棄去(qu)上清(qing)，並用1或(huo)2 ml*培養基重懸細胞(bao)。將這(zhe)些(xie)細胞(bao)懸液轉移到(dao)含(han)有*培養基的培(pei)養瓶中(zhong)並輕輕(qing)搖(yao)動(dong)以(yi)*混勻。
5.培(pei)養24小時後(hou)檢查(zha)細胞(bao)狀態(tai)並在(zai)需要(yao)時進行(xing)傳(chuan)代(dai)。

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　　Q7. 培(pei)養用液(ye)pH對細胞(bao)生(sheng)長的(de)影(ying)響(xiang)

　　由(you)於，大多數(shu)細胞(bao)適宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離此範(fan)圍(wei)對(dui)細胞(bao)將產生(sheng)有害(hai)的影(ying)響(xiang)。各(ge)種(zhong)細胞(bao)對pH的(de)要(yao)求(qiu)也不*相同(tong)，原(yuan)代培養細胞(bao)壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐受(shou)差，無限細胞(bao)系耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但總(zong)體來說(shuo)，細胞(bao)耐酸性比(bi)耐堿(jian)性強壹些，偏酸環境中更利(li)於細胞(bao)生(sheng)長。因(yin)此，我(wo)們在(zai)配制(zhi)培養用液(ye)時，可(ke)把液(ye)體的(de)pH稍微(wei)調(tiao)得(de)偏(pian)酸壹些。液體在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時，溶(rong)液的(de)pH還(hai)會(hui)向上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左右(you)。

　　質量可(ke)靠，售(shou)後有(you)保(bao)障(zhang)（編(bian)輯：tanxi）