人樹突狀細胞(bao)

迷(mi)人(ren)的實驗(yan)，放心的選擇(ze)

我司(si)細(xi)胞(bao)近(jin)3000種，來源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細胞(bao)都是(shi)經(jing)過(guo)嚴格質量(liang)控制(zhi)，在(zai)中國大(da)陸(lu)努力搭(da)建正牌細(xi)胞(bao)與國(guo)內廣大(da)科研人員之間(jian)的溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為您提(ti)供人(ren)樹突狀細胞(bao)外(wai)，還有更多(duo)相(xiang)關實(shi)驗(yan)產(chan)品，標(biao)準品，細胞(bao)株和實驗(yan)技(ji)術(shu)服(fu)務等等前(qian)期(qi)後(hou)續服(fu)務。

人樹突狀細胞(bao)的產品介紹(shao)

由我司*銷售(shou)。

細胞(bao)株

　　Q1. 培養(yang)用(yong)液pH對(dui)細胞(bao)生長(chang)的影響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大(da)多數細胞(bao)適宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離此(ci)範(fan)圍(wei)對(dui)細胞(bao)將產(chan)生有害的影響(xiang)。各(ge)種細胞(bao)對(dui)pH的要求(qiu)也不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞(bao)壹(yi)般對(dui)pH變(bian)動(dong)耐(nai)受差(cha)，無(wu)限細(xi)胞(bao)系耐(nai)受力(li)強(qiang)。

　　但總體來說(shuo)，細胞(bao)耐(nai)酸性(xing)比(bi)耐(nai)堿性強(qiang)壹(yi)些，偏(pian)酸環(huan)境中更利於(yu)細胞(bao)生長(chang)。因(yin)此(ci)，我們在配制(zhi)培養(yang)用(yong)液時，可(ke)把(ba)液體的pH稍(shao)微(wei)調得偏(pian)酸(suan)壹(yi)些。液體在(zai)經過0.10um或(huo)0.22um濾膜過濾時(shi)，溶(rong)液的pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮(fu)動0.2左右(you)。

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　　Q2. 液體培養(yang)基(ji)中谷氨酰胺(an)的作用(yong)，及(ji)使用(yong)方法(fa)。

　　幾乎所有的細胞(bao)對(dui)谷氨酰胺(an)有較高的要求(qiu)，細胞(bao)需(xu)要谷氨酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋白(bai)質(zhi)，在缺(que)少(shao)谷(gu)氨酰胺(an)時(shi)，細胞(bao)生長(chang)不(bu)良而(er)死(si)亡。所以，各(ge)種培養(yang)液中都含(han)有較大(da)量的谷氨酰胺(an)。谷(gu)氨酰胺(an)在(zai)溶液中很不(bu)穩(wen)定，應(ying)置-20 ?C冰凍保(bao)存(cun)，用前(qian)加(jia)入培養(yang)基(ji)中。加(jia)有谷氨酰胺(an)的液體培養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱儲(chu)存(cun)兩周以上(shang)時(shi)，應(ying)重新加(jia)入原(yuan)來量的谷氨酰胺(an)。基(ji)礎醫(yi)學(xue)細(xi)胞(bao)中心在其服(fu)務項目中配制分裝了高濃(nong)度(du)（100倍）的谷氨酰胺(an)溶(rong)液（1ml/支）。每(mei)支(zhi)1ml的谷氨酰胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培養(yang)基(ji)中，其終濃(nong)度(du)為2mM/ml培養(yang)基(ji)。包裝為粉紅(hong)色，-24?C保存(cun)。

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　　Q3.細胞(bao)計數及(ji)存(cun)活(huo)測試
1、原(yuan)理：
(1)計算細胞(bao)數目可用血(xue)球(qiu)計(ji)數盤或(huo)是Coultercounter粒子計(ji)數器自動計(ji)數。
(2)血(xue)球(qiu)計(ji)數盤壹(yi)般有二個chambers，每(mei)個(ge)chamber中細刻9個1mm2大(da)正方形(xing)，其中4個角(jiao)落之正方形(xing)再細(xi)刻16個(ge)小格，深度(du)均為0.1mm。當chamber上(shang)方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻(bo)片後，每(mei)個(ge)大(da)正方形(xing)之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用時(shi)，計(ji)數每(mei)個(ge)大(da)正方形(xing)內之細胞(bao)數目，乘以稀(xi)釋倍(bei)數，再乘(cheng)以104，即為每(mei)ml中之細胞(bao)數目。
(3)存(cun)活(huo)測試之步(bu)驟為dyeexclusion，利用染(ran)料會(hui)滲(shen)入死(si)細胞(bao)中而(er)呈(cheng)色，而(er)活(huo)細(xi)胞(bao)因細(xi)胞(bao)膜完(wan)整，染(ran)料無(wu)法(fa)滲入而(er)不(bu)會(hui)呈(cheng)色。壹(yi)般使用(yong)藍(lan)色之trypan blue染(ran)料，如果(guo)細胞(bao)不(bu)易吸(xi)收trypan blue，則(ze)用(yong)紅色之Erythrosin bluish。計算細胞(bao)活(huo)率：活(huo)細(xi)胞(bao)數/(活(huo)細(xi)胞(bao)數+死細胞(bao)數)×100%。計數應(ying)在臺盼(pan)蘭染(ran)色後數分鐘內完(wan)成(cheng)，隨時間(jian)延(yan)長，部分(fen)活(huo)細(xi)胞(bao)也開始攝取(qu)染(ran)料;因為臺盼(pan)蘭對(dui)蛋白(bai)質(zhi)有很強(qiang)的親和(he)力，用(yong)不(bu)含(han)血(xue)清的稀(xi)釋液，可以使(shi)染(ran)色計數更為準確(que)。

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　　Q4.細胞(bao)特性(xing)
在(zai)細胞(bao)培養(yang)之前(qian)，我們要了解壹(yi)下(xia)妳所要養細胞(bao)的基(ji)本(ben)特性(xing)，這(zhe)點可以從(cong)細胞(bao)的產品說(shuo)明書或(huo)者從(cong)ATCC細胞(bao)庫查(zha)詢。除此之外(wai)我(wo)們還要知(zhi)道每(mei)管(guan)細胞(bao)的數量，建議(yi)分裂(lie)或(huo)傳代(dai)的比例(li)，和已(yi)知(zhi)細胞(bao)的傳代(dai)代(dai)次(ci)等信息(xi)。

　　Q5.準備培養(yang)基(ji)
復蘇(su)細(xi)胞(bao)時需(xu)要準備合(he)適的培養(yang)基(ji)，血(xue)清和細(xi)胞(bao)生長(chang)所需(xu)的添加(jia)劑(ji)。大(da)部分(fen)培養(yang)細(xi)胞(bao)所用(yong)的培養(yang)體系(xi)，可以在(zai)訂購(gou)細(xi)胞(bao)系時(shi)獲得。
雖然大(da)多數細胞(bao)系可(ke)以在(zai)不(bu)止(zhi)壹(yi)種培養(yang)基(ji)中生長，但是當培養(yang)基(ji)改變(bian)時(shi)，細(xi)胞(bao)的性質(zhi)也會(hui)變(bian)化(hua)。因(yin)此(ci)，使用細胞(bao)庫推(tui)薦的培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)會(hui)獲得的效果(guo)。

　　Q6.開啟凍(dong)存(cun)管
1.準備壹(yi)個培養(yang)瓶，加(jia)入適(shi)宜細胞(bao)培養(yang)的培養(yang)基(ji)，液體體積按(an)照(zhao)說(shuo)明書的推薦配置，並平衡培養(yang)基(ji)的溫度(du)和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴(yu)中或(huo)細胞(bao)的正常生(sheng)長溫度(du)下(xia)將凍(dong)存(cun)管輕(qing)輕(qing)搖(yao)動。解(jie)凍(dong)要快，約2分鐘或(huo)直(zhi)到冰晶(jing)融化(hua)即可。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中取出凍存(cun)管並用浸泡(pao)或(huo)噴灑70%乙(yi)醇的方式(shi)來消毒。進(jin)壹(yi)步(bu)的操作(zuo)均需(xu)在無(wu)菌操(cao)作臺中嚴格無(wu)菌條(tiao)件下(xia)進(jin)行。
4.擰開(kai)凍(dong)存(cun)管的管帽並將內容(rong)物轉(zhuan)移到壹(yi)個含(han)有9 ml推薦培養(yang)基(ji)的無(wu)菌離(li)心管(guan)中。通(tong)過溫和(he)離心(xin)（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍(dong)保護劑(ji)（DMSO）。棄去(qu)上(shang)清，並用1或(huo)2 ml*培養(yang)基(ji)重懸細(xi)胞(bao)。將這(zhe)些細(xi)胞(bao)懸液轉(zhuan)移到含(han)有*培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中並輕(qing)輕(qing)搖(yao)動以*混(hun)勻(yun)。
5.培養(yang)24小時(shi)後檢查(zha)細(xi)胞(bao)狀態並在需(xu)要時進(jin)行傳代(dai)。

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　　Q7. 培養(yang)用(yong)液pH對(dui)細胞(bao)生長(chang)的影響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大(da)多數細胞(bao)適宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離此(ci)範(fan)圍(wei)對(dui)細胞(bao)將產(chan)生有害的影響(xiang)。各(ge)種細胞(bao)對(dui)pH的要求(qiu)也不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞(bao)壹(yi)般對(dui)pH變(bian)動(dong)耐(nai)受差(cha)，無(wu)限細(xi)胞(bao)系耐(nai)受力(li)強(qiang)。

　　但總體來說(shuo)，細胞(bao)耐(nai)酸性(xing)比(bi)耐(nai)堿性強(qiang)壹(yi)些，偏(pian)酸環(huan)境中更利於(yu)細胞(bao)生長(chang)。因(yin)此(ci)，我們在配制(zhi)培養(yang)用(yong)液時，可(ke)把(ba)液體的pH稍(shao)微(wei)調得偏(pian)酸(suan)壹(yi)些。液體在(zai)經過0.10um或(huo)0.22um濾膜過濾時(shi)，溶(rong)液的pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮(fu)動0.2左右(you)。

　　質量可(ke)靠(kao)，售(shou)後有保障(zhang)（編輯：tanxi）