人髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)

迷人的實驗，放心的(de)選擇(ze)

我司細(xi)胞(bao)近3000種，來(lai)源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格(ge)質(zhi)量控制，在中(zhong)國大陸(lu)努力(li)搭建正(zheng)牌細(xi)胞(bao)與國內廣(guang)大科研人員之(zhi)間的(de)溝通(tong)橋(qiao)梁。為您提供(gong)人髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)外，還有(you)更多(duo)相關(guan)實驗產(chan)品(pin)，標準(zhun)品(pin)，細(xi)胞(bao)株(zhu)和(he)實驗技(ji)術服務等等(deng)前(qian)期(qi)後(hou)續(xu)服(fu)務。

人髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)介紹(shao)

由我(wo)司*銷(xiao)售(shou)。

細(xi)胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 培養用液pH對細(xi)胞(bao)生長的(de)影響(xiang)

　　由於(yu)，大多數細(xi)胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為7.2~7.4，偏離此(ci)範(fan)圍(wei)對(dui)細(xi)胞(bao)將產(chan)生(sheng)有(you)害的影響(xiang)。各種細(xi)胞(bao)對pH的(de)要求(qiu)也(ye)不(bu)*相同(tong)，原代培養細(xi)胞(bao)壹(yi)般對pH變動(dong)耐受(shou)差(cha)，無限細(xi)胞(bao)系耐受(shou)力(li)強。

　　但(dan)總體來(lai)說(shuo)，細(xi)胞(bao)耐酸性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強壹(yi)些，偏酸環境中更利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生長。因(yin)此，我(wo)們在配(pei)制培養用液時(shi)，可(ke)把(ba)液體的(de)pH稍微調得(de)偏酸壹(yi)些。液體在(zai)經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜(mo)過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液的pH還會向(xiang)上浮動(dong)0.2左(zuo)右。

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　　Q2. 液體培(pei)養基(ji)中谷氨酰胺的作用，及(ji)使用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎所(suo)有(you)的(de)細(xi)胞(bao)對谷(gu)氨酰胺有(you)較高的要求(qiu)，細(xi)胞(bao)需要谷(gu)氨酰胺合成(cheng)蛋(dan)白質(zhi)，在(zai)缺少(shao)谷氨酰胺時(shi)，細(xi)胞(bao)生長不(bu)良而死亡(wang)。所(suo)以(yi)，各種培(pei)養液中都(dou)含有(you)較大量的(de)谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不(bu)穩(wen)定，應(ying)置-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存(cun)，用(yong)前(qian)加(jia)入(ru)培(pei)養基(ji)中。加(jia)有(you)谷(gu)氨酰胺的液體培(pei)養基(ji)4 ?C 冰箱儲(chu)存(cun)兩(liang)周(zhou)以(yi)上時(shi)，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入(ru)原來量的(de)谷氨酰胺。基(ji)礎醫(yi)學細(xi)胞(bao)中心在(zai)其服務項(xiang)目(mu)中配(pei)制分(fen)裝(zhuang)了(le)高濃(nong)度(du)（100倍）的谷(gu)氨酰胺溶液（1ml/支）。每支(zhi)1ml的谷氨酰胺加(jia)到99ml*培(pei)養基(ji)中，其終(zhong)濃(nong)度(du)為2mM/ml培養基(ji)。包裝為粉紅色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

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　　Q3.細(xi)胞(bao)計(ji)數及存(cun)活(huo)測試
1、原理：
(1)計(ji)算細(xi)胞(bao)數目(mu)可用(yong)血(xue)球(qiu)計(ji)數盤或是(shi)Coultercounter粒(li)子計(ji)數器(qi)自(zi)動(dong)計(ji)數。
(2)血球(qiu)計(ji)數盤壹(yi)般有(you)二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中(zhong)細(xi)刻(ke)9個(ge)1mm2大正方(fang)形(xing)，其(qi)中(zhong)4個(ge)角落(luo)之(zhi)正方(fang)形(xing)再細(xi)刻(ke)16個(ge)小(xiao)格(ge)，深度(du)均為0.1mm。當chamber上方(fang)蓋上蓋玻片(pian)後，每(mei)個(ge)大正方(fang)形(xing)之(zhi)體積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時(shi)，計(ji)數每個(ge)大正方(fang)形(xing)內(nei)之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)，乘(cheng)以稀釋倍數，再乘(cheng)以104，即為每ml中之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測試之(zhi)步驟為dyeexclusion，利用染料(liao)會(hui)滲入(ru)死細(xi)胞(bao)中而呈(cheng)色(se)，而活(huo)細(xi)胞(bao)因細(xi)胞(bao)膜(mo)完(wan)整(zheng)，染料(liao)無法(fa)滲入(ru)而不(bu)會呈色(se)。壹(yi)般使用(yong)藍(lan)色(se)之(zhi)trypan blue染料(liao)，如(ru)果細(xi)胞(bao)不(bu)易吸收trypan blue，則用紅(hong)色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算細(xi)胞(bao)活率(lv)：活細(xi)胞(bao)數/(活細(xi)胞(bao)數+死細(xi)胞(bao)數)×100%。計(ji)數應在(zai)臺盼蘭染色(se)後(hou)數分(fen)鐘(zhong)內(nei)完(wan)成(cheng)，隨(sui)時(shi)間(jian)延(yan)長，部(bu)分(fen)活(huo)細(xi)胞(bao)也(ye)開(kai)始(shi)攝(she)取染(ran)料(liao);因(yin)為臺盼蘭對蛋(dan)白質(zhi)有(you)很(hen)強的(de)親(qin)和(he)力(li)，用不(bu)含血清的稀釋液，可以使(shi)染色(se)計(ji)數更為準確。

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　　Q4.細(xi)胞(bao)特(te)性
在(zai)細(xi)胞(bao)培養之(zhi)前(qian)，我(wo)們(men)要了(le)解壹(yi)下(xia)妳(ni)所(suo)要養細(xi)胞(bao)的基(ji)本(ben)特(te)性，這(zhe)點可以從(cong)細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)說明(ming)書或(huo)者從(cong)ATCC細(xi)胞(bao)庫(ku)查(zha)詢(xun)。除此之(zhi)外我們(men)還要知(zhi)道(dao)每(mei)管(guan)細(xi)胞(bao)的數量，建議(yi)分(fen)裂(lie)或(huo)傳(chuan)代的比(bi)例，和(he)已知細(xi)胞(bao)的傳(chuan)代代次(ci)等信(xin)息(xi)。

　　Q5.準備(bei)培(pei)養基(ji)
復蘇細(xi)胞(bao)時(shi)需(xu)要準(zhun)備(bei)合適(shi)的培(pei)養基(ji)，血清和(he)細(xi)胞(bao)生長所(suo)需(xu)的(de)添(tian)加(jia)劑(ji)。大部分(fen)培(pei)養細(xi)胞(bao)所(suo)用(yong)的(de)培養體系(xi)，可(ke)以(yi)在訂(ding)購(gou)細(xi)胞(bao)系時(shi)獲(huo)得(de)。
雖(sui)然大多數細(xi)胞(bao)系可(ke)以在(zai)不(bu)止壹(yi)種培(pei)養基(ji)中生長，但(dan)是(shi)當(dang)培養基(ji)改(gai)變時(shi)，細(xi)胞(bao)的性(xing)質(zhi)也(ye)會(hui)變化(hua)。因(yin)此，使用細(xi)胞(bao)庫(ku)推薦(jian)的(de)培(pei)養基(ji)來培養細(xi)胞(bao)會獲(huo)得(de)的(de)效(xiao)果。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍(dong)存(cun)管(guan)
1.準(zhun)備(bei)壹(yi)個(ge)培(pei)養瓶(ping)，加(jia)入(ru)適(shi)宜(yi)細(xi)胞(bao)培養的培(pei)養基(ji)，液體體積(ji)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書的(de)推(tui)薦(jian)配(pei)置，並平衡培(pei)養基(ji)的溫度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴中(zhong)或細(xi)胞(bao)的正(zheng)常生(sheng)長溫(wen)度(du)下(xia)將凍(dong)存(cun)管(guan)輕(qing)輕(qing)搖動(dong)。解(jie)凍(dong)要快，約(yue)2分(fen)鐘(zhong)或(huo)直(zhi)到冰晶(jing)融(rong)化即(ji)可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴中取出(chu)凍(dong)存(cun)管(guan)並用浸泡或(huo)噴(pen)灑(sa)70%乙(yi)醇(chun)的(de)方(fang)式(shi)來(lai)消(xiao)毒(du)。進壹(yi)步的操作均需(xu)在無菌(jun)操作臺中嚴格(ge)無菌(jun)條(tiao)件(jian)下(xia)進行(xing)。
4.擰開(kai)凍(dong)存(cun)管(guan)的(de)管(guan)帽(mao)並將內(nei)容(rong)物轉(zhuan)移(yi)到壹(yi)個(ge)含(han)有(you)9 ml推(tui)薦(jian)培(pei)養基(ji)的無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)。通(tong)過溫(wen)和(he)離心（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑(ji)（DMSO）。棄(qi)去(qu)上清，並用1或2 ml*培養基(ji)重(zhong)懸細(xi)胞(bao)。將這(zhe)些細(xi)胞(bao)懸液轉移(yi)到含(han)有(you)*培(pei)養基(ji)的培養瓶(ping)中並輕輕搖動(dong)以(yi)*混勻。
5.培(pei)養24小時(shi)後(hou)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態並在需要時(shi)進行(xing)傳(chuan)代。

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　　Q7. 培(pei)養用液pH對細(xi)胞(bao)生長的(de)影響(xiang)

　　由於(yu)，大多數細(xi)胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為7.2~7.4，偏離此(ci)範(fan)圍(wei)對(dui)細(xi)胞(bao)將產(chan)生(sheng)有(you)害的影響(xiang)。各種細(xi)胞(bao)對pH的(de)要求(qiu)也(ye)不(bu)*相同(tong)，原代培養細(xi)胞(bao)壹(yi)般對pH變動(dong)耐受(shou)差(cha)，無限細(xi)胞(bao)系耐受(shou)力(li)強。

　　但(dan)總體來(lai)說(shuo)，細(xi)胞(bao)耐酸性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強壹(yi)些，偏酸環境中更利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生長。因(yin)此，我(wo)們在配(pei)制培養用液時(shi)，可(ke)把(ba)液體的(de)pH稍微調得(de)偏酸壹(yi)些。液體在(zai)經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜(mo)過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液的pH還會向(xiang)上浮動(dong)0.2左(zuo)右。

　　質(zhi)量可(ke)靠，售後(hou)有(you)保(bao)障(zhang)（編輯(ji)：tanxi）