豚鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8（CCR8）ELISA

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產品(pin)名(ming)稱(cheng):豚(tun)鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA。

類別(bie) :ELISA
貨(huo)期 :7-10天(tian)
豚(tun)鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA。註意事(shi)項(xiang)：
收(shou)集標本(ben)前必(bi)須(xu)清(qing)楚要(yao)檢測的(de)成份是(shi)否(fou)足(zu)夠穩定(ding)。對(dui)收(shou)集後(hou)當(dang)天(tian)進(jin)行(xing)檢測的(de)標本(ben)，儲(chu)存(cun)在(zai)4℃備(bei)用，如有(you)特(te)殊原因需(xu)要(yao)周(zhou)期收(shou)集標本(ben)，將標本(ben)及時(shi)分裝後(hou)放在(zai)-20℃或(huo)-70℃條(tiao)件下保存(cun)。避(bi)免反復凍融(rong)。標本(ben)2-8℃可保存(cun)48小時(shi)，-20℃可保存(cun)1個(ge)月(yue)。-70度可保存(cun)6個(ge)月(yue)。部(bu)分標本(ben)需添加抑肽(tai)酶。
1.  試(shi)劑準(zhun)備(bei)：所(suo)有(you)試(shi)劑都必(bi)須(xu)在(zai)使(shi)用前達到室溫(wen)，使(shi)用後請立即按照說明(ming)書(shu)要(yao)求保存(cun)試(shi)劑。  實驗操(cao)作(zuo)中請使用壹次(ci)性的(de)吸頭(tou)，避(bi)免交叉(cha)汙染(ran)。
2.   加樣：加樣或(huo)加試(shi)劑時(shi)，請註意在(zai)吸(xi)取(qu)標本(ben) / 標準(zhun)品(pin)，酶結(jie)合物或(huo)底(di)物時(shi)，前壹個(ge)孔與(yu)後壹個(ge)孔加樣之(zhi)間的(de)時(shi)間間隔如果(guo)太(tai)大(da)，將(jiang)會(hui)導致不(bu)同的(de) “預(yu)孵育"時(shi)間，從而明(ming)顯地(di)影(ying)響到測量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確(que)性及(ji)重(zhong)復性。壹次(ci)加樣時(shi)間(包(bao)括(kuo)標準(zhun)品(pin)及所(suo)有樣品(pin))好控制在(zai)10分鐘內(nei)，如標本(ben)數(shu)量(liang)多(duo)，推(tui)薦(jian)使用多道移液器加樣。
3.   孵(fu)育：為防止樣品(pin)蒸(zheng)發(fa)，試(shi)驗時(shi)將反應(ying)板(ban)放於鋪(pu)有濕(shi)布(bu)的(de)密(mi)閉(bi)盒內(nei)，酶標板(ban)加上蓋或覆膜(mo)，以避(bi)免液體蒸(zheng)發(fa)；洗(xi)板(ban)後(hou)應(ying)盡(jin)快進(jin)行(xing)下步操(cao)作(zuo)，任何(he)時(shi)侯(hou)都應(ying)避(bi)免酶標板(ban)處(chu)於幹(gan)燥狀(zhuang)態(tai);同(tong)時(shi)應(ying)嚴(yan)格遵守給(gei)定的(de)孵育時(shi)間和溫(wen)度。
4.   洗(xi)滌：洗(xi)滌過程中反應(ying)孔中(zhong)殘留(liu)的(de)洗(xi)滌液應(ying)在(zai)濾(lv)紙上(shang)充分拍(pai)幹(gan)，勿(wu)將濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放入反應(ying)孔中(zhong)吸水，同時(shi)要(yao)消除(chu)板(ban)底(di)殘留(liu)的(de)液體和手指印(yin)，避(bi)免影響(xiang)後的(de)讀(du)數(shu)。
5.  試(shi)劑配制：Detection A及(ji)Detection B在(zai)使用前請手甩幾下或少(shao)時(shi)離心(xin)處(chu)理，以使管(guan)壁(bi)或(huo)瓶蓋的(de)液體沈積(ji)到管(guan)底(di)。標準(zhun)品(pin)、檢測溶(rong)液A工(gong)作(zuo)液、檢測溶(rong)液B工(gong)作(zuo)液請依(yi)據(ju)所(suo)需(xu)的(de)量配置使用，並使用相應(ying)的(de)稀(xi)釋液配制，不(bu)能混(hun)淆。請確配(pei)置標準(zhun)品(pin)及工(gong)作(zuo)液，盡(jin)量(liang)不(bu)要(yao)微量配(pei)置(如吸(xi)取(qu)檢測溶(rong)液A時(shi)，壹次(ci)不(bu)要(yao)小於10μl)，以(yi)避(bi)免由於不(bu)準(zhun)確(que)稀(xi)釋而造成(cheng)的(de)濃(nong)度誤(wu)差(cha)；請勿(wu)重(zhong)復使用已(yi)稀(xi)釋過的(de)標準(zhun)品(pin)、檢測溶(rong)液A工(gong)作(zuo)液或(huo)檢測溶(rong)液B工(gong)作(zuo)液。
6.  反應(ying)時(shi)間的(de)控制：加入底(di)物後(hou)請定時(shi)觀察反應(ying)孔的(de)顏(yan)色變(bian)化(hua)(比(bi)如，每(mei)隔(ge)10分鐘)，如顏(yan)色較(jiao)深，請提前(qian)加入終(zhong)止液(ye)終(zhong)止反應(ying)，避(bi)免反應(ying)過強從而影響(xiang)光(guang)密(mi)度讀(du)數(shu)。
7.  底(di)物：底(di)物請避(bi)光(guang)保存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免強光(guang)直接照射。
    建議(yi)檢測樣品(pin)時(shi)均設(she)雙孔測(ce)定，以保證(zheng)檢測結(jie)果的(de)準(zhun)確(que)性。
    如標本(ben)中待(dai)測(ce)物質(zhi)含量過高(gao)，請先稀(xi)釋後再(zai)測(ce)定(ding)，計(ji)算時(shi)請後乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數(shu)。
洗(xi)板(ban)方(fang)法(fa)
1.  手工(gong)洗(xi)板(ban)方(fang)法(fa)：吸去(不(bu)可觸及板(ban)壁(bi))或(huo)甩掉(diao)酶(mei)標板(ban)內(nei)的(de)液體；在實(shi)驗臺(tai)上(shang)鋪(pu)墊(dian)幾層(ceng)吸(xi)水紙，酶(mei)標板(ban)朝(chao)下用力拍(pai)幾次；將推(tui)薦(jian)的(de)洗(xi)滌緩沖(chong)液(ye)至(zhi)少(shao)0.3ml註入孔內(nei)，浸泡1-2分鐘，根據需(xu)要(yao)，重(zhong)復此過程數(shu)次(ci)。
2.  自(zi)動洗(xi)板(ban)：如果(guo)有(you)自(zi)動，應(ying)在(zai)熟(shu)練使(shi)用後再(zai)用到正式(shi)實(shi)驗(yan)過程中。
液體類標本(ben)：
標本(ben)必(bi)須(xu)為液(ye)體，不(bu)含沈澱。包(bao)括(kuo)、、尿液(ye)、胸(xiong)腹(fu)水、腦脊液、細胞培(pei)養上(shang)清(qing)、組織勻(yun)漿等(deng)。1ml的(de)全血可得(de)到0.5ml的(de)或。每個標本(ben)量收(shou)集體積(ji)＝100ul×檢測種類。
◇      ：
室溫(wen)血(xue)液(ye)自然凝(ning)固(gu)10-20分鐘後，離心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。收(shou)集上(shang)清(qing)。如有(you)沈澱形成，應(ying)再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
◇      ：
應(ying)根(gen)據的(de)要(yao)求選擇EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鈉或(huo)肝素作(zuo)為抗(kang)凝(ning)劑(ji)，加入10％(v/v)抗(kang)凝(ning)劑(ji)(0.1M檸(ning)檬(meng)酸鈉或(huo)1% heparin 或(huo)2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘後，離心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收(shou)集上(shang)清(qing)。如有(you)沈澱形成，應(ying)再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
◇      尿(niao)液、胸腹(fu)水、腦脊液：
用無菌(jun)管(guan)收(shou)集。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收(shou)集上(shang)清(qing)。如有(you)沈澱形成，應(ying)再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
◇      細胞培(pei)養上(shang)清(qing)：
檢測分泌(mi)性的(de)成份時(shi)，用無菌(jun)管(guan)收(shou)集。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收(shou)集上(shang)清(qing)。檢測細胞內(nei)的(de)成份時(shi)，用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細胞懸液(ye)，細胞濃(nong)度達到100萬/ml左右(you)。通(tong)過反復凍融(rong)，以使細胞破(po)壞並放出(chu)細胞內(nei)成份。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收(shou)集上(shang)清(qing)。保存(cun)過程中如有(you)沈澱形成，應(ying)再(zai)次(ci)離(li)心(xin)。
◇      組織標本(ben)：
切(qie)割標本(ben)後，稱取(qu)重(zhong)量(liang)。加入壹定(ding)量的(de)PBS，緩沖(chong)液(ye)中(zhong)可加入1μg/L蛋白(bai)酶(mei)抑制劑(ji)或(huo)50U/ml的(de)Aprotinin(抑肽(tai)酶)。用手工(gong)或(huo)勻漿器將標本(ben)勻漿充分。離(li)心(xin)20分鐘左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收(shou)集上(shang)清(qing)置於-20度或(huo)- 70度保存(cun)，如有(you)必(bi)要(yao)，可以(yi)將樣品(pin)濃(nong)縮幹燥。分裝後(hou)壹份待(dai)檢測，其(qi)余冷(leng)凍備(bei)用。
寄(ji)標本(ben)時(shi)需註明(ming)以下情況(kuang)：
1、標本(ben)編(bian)號；2、所(suo)測(ce)項(xiang)目；3、是(shi)否(fou)做(zuo)復孔；4、實(shi)驗後標本(ben)是否(fou)寄(ji)回

豚(tun)鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 安全(quan)性
1）避(bi)免直接(jie)接觸終(zhong)止液(ye)和底(di)物A、B。壹旦(dan)接觸到這些(xie)液體，請盡快用水沖(chong)洗(xi)。
2）實驗(yan)中不(bu)要(yao)吃喝(he)、抽(chou)煙(yan)或(huo)使(shi)用化妝品(pin)。
3）不(bu)要(yao)用嘴吸取(qu)裏(li)的(de)任何(he)成份。

豚(tun)鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 操(cao)作(zuo)註意事(shi)項(xiang)
1）試(shi)劑應(ying)按(an)標簽(qian)說明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun)，使(shi)用前恢(hui)復到室溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過後的(de)標準(zhun)品(pin)應(ying)丟棄，不(bu)可保存(cun)。
2）實(shi)驗中(zhong)不(bu)用的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立即放回(hui)包(bao)裝袋(dai)中(zhong)，密(mi)封保存(cun)，以(yi)免變質(zhi)。
3）不(bu)用的(de)其它試(shi)劑應(ying)包(bao)裝好或(huo)蓋好。不(bu)同批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑不(bu)要(yao)混用。保質(zhi)前(qian)使(shi)用。
4）使用壹次(ci)性的(de)吸頭(tou)以(yi)免交叉(cha)汙染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止液(ye)和底(di)物A、B液(ye)時(shi)，避(bi)免使用帶(dai)金(jin)屬部(bu)分的(de)加樣器(qi)。
5）使用幹凈的(de)塑料(liao)容器(qi)配置(zhi)洗(xi)滌液。使(shi)用前充分混(hun)勻(yun)裏(li)的(de)各種成份及(ji)樣品(pin)。
6）洗(xi)滌酶標板(ban)時(shi)應(ying)充分拍(pai)幹(gan)，不(bu)要(yao)將吸(xi)水紙直(zhi)接放入酶標反應(ying)孔中(zhong)吸水。
7）底(di)物A應(ying)揮發(fa)，避(bi)免長時(shi)間打(da)開(kai)蓋子。底(di)物B對(dui)光(guang)敏感，避(bi)免長時(shi)間暴露於光(guang)下。避(bi)免用手接(jie)觸，有毒(du)。實驗(yan)完成後應(ying)立即讀(du)取(qu)OD值。
8）加入試(shi)劑的(de)順(shun)序(xu)應(ying)壹致，以保證(zheng)所有(you)反應(ying)板(ban)孔溫(wen)育的(de)時(shi)間壹樣。
9）按(an)照說明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的(de)時(shi)間、加液的(de)量及順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫育(yu)操(cao)作(zuo)。

豚鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 樣品(pin)收(shou)集、處(chu)理(li)及保存(cun)方(fang)法
1）-----操(cao)作(zuo)過程中避(bi)免任何(he)細胞刺(ci)激。使用不(bu)含熱(re)原和內(nei)的(de)試(shi)管(guan)。收(shou)集血(xue)液(ye)後，1000×g離(li)心(xin)10分鐘將和紅(hong)細胞迅(xun)速小心(xin)地(di)分離(li)。
2）-----EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽、肝素可用於檢測。1000×g離(li)心(xin)30分鐘去除(chu)顆粒。
3）細胞上(shang)清(qing)液---1000×g離心(xin)10分鐘去除(chu)顆粒和聚合物。
4）組織勻(yun)漿-----將組織加入適(shi)量生理鹽水搗碎。1000×g離(li)心(xin)10分鐘，取(qu)上清(qing)液
5）保存(cun)------如果(guo)樣品(pin)不(bu)立即使用，應(ying)將(jiang)其分成(cheng)小部(bu)分-70 ℃保存(cun)，避(bi)免反復冷凍。盡(jin)可能的(de)不(bu)要(yao)使用溶(rong)血或(huo)高(gao)血(xue)脂血(xue)。如果(guo)中(zhong)大(da)量(liang)顆粒，檢測前(qian)先離(li)心(xin)或(huo)過濾(lv)。不(bu)要(yao)在37℃或(huo)更高(gao)的(de)溫度加熱(re)解(jie)凍。應(ying)在(zai)室溫下解(jie)凍並(bing)確(que)保樣品(pin)均勻(yun)地(di)充分解(jie)凍。

豚(tun)鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 試(shi)劑的(de)準(zhun)備(bei)
1）標準(zhun)品(pin)：標準(zhun)品(pin)的(de)系列稀(xi)釋應(ying)在(zai)實驗時(shi)準(zhun)備(bei)，不(bu)能儲(chu)存(cun)。稀(xi)釋前將標準(zhun)品(pin)振蕩(dang)混(hun)勻。
2）洗(xi)滌緩沖(chong)液(ye)（50×）的(de)稀(xi)釋：蒸(zheng)餾(liu)水50倍(bei)稀(xi)釋。

豚鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 操(cao)作(zuo)步驟
1）使(shi)用前，將所有(you)試(shi)劑充分混(hun)勻(yun)。不(bu)要(yao)使液(ye)體產生大量的(de)泡沫(mo)，以(yi)免加樣時(shi)加入大量(liang)的(de)氣泡，產生加樣上(shang)的(de)誤(wu)差(cha)。
2）根據(ju)待(dai)測(ce)樣品(pin)數(shu)量(liang)加上標準(zhun)品(pin)的(de)數(shu)量(liang)決(jue)定(ding)所(suo)需(xu)的(de)板(ban)條(tiao)數(shu)。每(mei)個(ge)標準(zhun)品(pin)和空白(bai)孔建議(yi)做(zuo)復孔。每(mei)個樣品(pin)根據(ju)自己的(de)數(shu)量(liang)來定，能使(shi)用復孔的(de)盡量做(zuo)復孔。標本(ben)用標本(ben)稀(xi)釋液1：1稀(xi)釋後加入50ul於反應(ying)孔內(nei)。
3）加入稀(xi)釋好後(hou)的(de)標準(zhun)品(pin)50ul於反應(ying)孔、加入待(dai)測(ce)樣品(pin)50ul於反應(ying)孔內(nei)。立即加入50ul的(de)生物素(su)標記(ji)的(de)。蓋上膜板(ban)，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫(wen)育(yu)1小時(shi)。
4）甩去(qu)孔內(nei)液體，每孔加滿(man)洗(xi)滌液，振蕩(dang)30秒(miao)，甩去(qu)洗(xi)滌液，用吸水紙拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復此操(cao)作(zuo)3次。如果(guo)用洗(xi)滌，洗(xi)滌次數(shu)增加壹次(ci)。
5）每孔加入80ul的(de)親(qin)和鏈酶素(su)-HRP，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。
6）甩去(qu)孔內(nei)液體，每孔加滿(man)洗(xi)滌液，振蕩(dang)30秒(miao)，甩去(qu)洗(xi)滌液，用吸水紙拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復此操(cao)作(zuo)3次。如果(guo)用洗(xi)滌，洗(xi)滌次數(shu)增加壹次(ci)。
7）每孔加入底(di)物A、B各(ge)50ul，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫(wen)育(yu)10分鐘。避(bi)免光(guang)照。
8）取(qu)出酶標板(ban)，迅(xun)速加入50ul終(zhong)止液(ye)，加入終(zhong)止液(ye)後應(ying)立即測定結(jie)果(guo)。
9）在(zai)450nm波(bo)長處測定各(ge)孔的(de)OD值。
壹些(xie)好評(ping)
辦(ban)事效(xiao)率蠻高(gao)，幾天(tian)，就(jiu)幫我搞(gao)定(ding)了(le)這個(ge)，謝謝！盒子蠻(man)不(bu)錯，包(bao)含(han)所需(xu)試(shi)劑，並提供了(le)中英文雙(shuang)版(ban)說明(ming)書(shu)及(ji)增值稅(shui)，很(hen)，銷售(shou)人員的(de)態度也(ye)謙和。靈(ling)敏(min)度不(bu)錯，重(zhong)復性也(ye)行(xing)，在我做(zuo)的(de)這些(xie)實驗(yan)中(zhong)，與(yu)國內(nei)同行(xing)的(de)盒子相比(bi)來說，性價(jia)比(bi)挺高(gao)的(de)，尤其是價(jia)格占有不(bu)錯的(de)優勢(shi)，贊壹個(ge)！操(cao)作(zuo)挺方(fang)便(bian)的(de)，也(ye)簡單，當然，這(zhe)也(ye)多(duo)虧了(le)公司(si)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員詳細的(de)實驗指導，很好，謝(xie)謝(xie)，實驗(yan)也(ye)相當(dang)成(cheng)功(gong)。實(shi)驗(yan)出(chu)來的(de)標準(zhun)曲線很(hen)不(bu)錯（很(hen)優美(mei)），而且價(jia)格相對(dui)合理(li)，技(ji)術(shu)指導很到位......我購(gou)買(mai)了(le)兩盒，批(pi)次(ci)新(xin)，保質(zhi)期內(nei)，實驗(yan)結(jie)果做(zuo)出來了(le)，貨到的(de)挺快，那(na)麽(me)遠(yuan)，幾天(tian)就(jiu)到了(le)，加上我做(zuo)實驗，壹共(gong)五(wu)天(tian)就(jiu)搞定了(le)。經朋友(you)介(jie)紹(shao)，購買了(le)此公(gong)司(si)的(de)ELISA，用過，還(hai)不(bu)錯，實(shi)驗效(xiao)果(guo)很(hen)好，基本(ben)達到實驗(yan)參(can)數(shu)要(yao)求，如果(guo)，下次還(hai)做(zuo)實驗的(de)話，我還(hai)買(mai)這家的(de)，朋友(you)這(zhe)幾年都在(zai)用這家的(de)（長期訂(ding)貨）。
豚鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 局限(xian)
6號(hao)標準(zhun)品(pin)以上(shang)的(de)結果為非(fei)線性(xing)的(de)，根據此標準(zhun)曲線無法得(de)到的(de)結果。
豚鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA 性能
1. 靈(ling)敏(min)度：小的(de)檢測濃(nong)度小於1號(hao)標準(zhun)品(pin)。稀(xi)釋度的(de)線性(xing)。樣品(pin)線性(xing)回歸(gui)與預(yu)期濃(nong)度相關(guan)系數(shu)R值(zhi)為0.990。
2. 特(te)異性(xing)：不(bu)與其(qi)它細胞因子反應(ying)。
3. 重(zhong)復性：板(ban)內(nei)、板(ban)間(jian)變(bian)異系數(shu)均(jun)小於10%。

豚(tun)鼠(shu)趨化(hua)因子CC受(shou)體8(CCR8)ELISA  結果(guo)判斷(duan)與(yu)分析(xi)
1、儀(yi)器(qi)值(zhi)：於波(bo)長450nm的(de)上讀(du)取(qu)各孔的(de)OD值
2、以吸光(guang)度OD值(zhi)為縱(zong)坐(zuo)標（Y），相應(ying)的(de)待(dai)測(ce)物質(zhi)標準(zhun)品(pin)濃(nong)度為橫(heng)坐(zuo)標（X），做(zuo)得(de)相應(ying)的(de)曲線，樣品(pin)的(de)待(dai)測(ce)物質(zhi)含量可根(gen)據其OD值由標準(zhun)曲線換(huan)算出(chu)相應(ying)的(de)濃(nong)度。

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