BE（2）-M17細(xi)胞(bao)_新(xin)品(pin)來了

　　細(xi)胞(bao)作(zuo)為(wei)生命組成的zui小單元，研(yan)究其相關(guan)的生物(wu)行(xing)為(wei)及其規律(lv)與(yu)本(ben)質(zhi)，對於(yu)揭示(shi)生命(ming)的奧(ao)秘，探(tan)索疾(ji)病(bing)的機理與治(zhi)療手(shou)段，提高(gao)人(ren)類(lei)的生存(cun)壽(shou)命(ming)與(yu)質(zhi)量(liang)，都(dou)有著(zhe)重要(yao)的意義。對細(xi)胞(bao)的研(yan)究是(shi)壹個復(fu)雜的工(gong)程(cheng)，細(xi)胞(bao)在(zai)人(ren)體內處於(yu)復(fu)雜的微(wei)環境之(zhi)中(zhong)，包括溫(wen)度、氧氣濃度、生(sheng)物(wu)因(yin)子(zi)濃(nong)度(du)、機械(xie)作用(yong)、細(xi)胞(bao)間(jian)相(xiang)互作(zuo)用(yong)、細(xi)胞(bao)基(ji)質(zhi)間(jian)相互(hu)作(zuo)用(yong)等(deng)，同(tong)時，細(xi)胞(bao)體(ti)積(ji)微(wei)小、種(zhong)類(lei)多(duo)樣(yang)，在細(xi)胞(bao)水(shui)平進行(xing)細(xi)胞(bao)識(shi)別、代(dai)謝(xie)物(wu)檢測、內部(bu)組分(fen)分析、細(xi)胞(bao)結構與(yu)功(gong)能表(biao)征、細(xi)胞(bao)間(jian)相(xiang)互作(zuo)用(yong)分(fen)析等(deng)工(gong)作(zuo)也都(dou)有著(zhe)很大(da)的難(nan)度。BE(2)-M17細(xi)胞(bao)，上(shang)海乾(qian)思(si)生(sheng)物(wu)公(gong)司(si)細(xi)胞(bao)近3000種(zhong)，來源於(yu)美國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經過(guo)嚴格質(zhi)量(liang)控制(zhi)，在(zai)中(zhong)國大陸努力搭建(jian)正牌細(xi)胞(bao)與(yu)國內廣大科研(yan)人員(yuan)之(zhi)間(jian)的溝通橋梁(liang)。為(wei)您(nin)提供BE(2)-M17細(xi)胞(bao)外(wai)，還(hai)有更(geng)多相關實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準品(pin)，細(xi)胞(bao)株和(he)實(shi)驗(yan)技(ji)術(shu)服務等(deng)等(deng)前(qian)期(qi)後(hou)續(xu)服務。

　　1. BE(2)-M17細(xi)胞(bao)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)的保存(cun)是(shi)冷(leng)藏好(hao)？還(hai)是(shi)冷(leng)凍好(hao)？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因(yin)為(wei)液體培(pei)養(yang)基(ji)經冷(leng)凍後(hou)再(zai)經溶化時，其溶液的pH值(zhi)會(hui)發(fa)生(sheng)改變，溶液往往變堿，某(mou)些(xie)成分(fen)溶解(jie)也會(hui)受到(dao)影響(xiang)對細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不利。故液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)壹定(ding)要(yao)存(cun)放(fang)在(zai)冷(leng)藏箱(xiang)中(zhong)，通常液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)在冷(leng)藏條件下可(ke)存(cun)放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹年。

　　2.BE(2)-M17細(xi)胞(bao) 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)谷氨酰(xian)胺(an)的作用(yong)，及使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾乎(hu)所(suo)有的細(xi)胞(bao)對谷氨酰(xian)胺(an)有較(jiao)高(gao)的要求，細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)谷氨酰(xian)胺(an)合成蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在(zai)缺少谷氨酰(xian)胺(an)時，細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不良(liang)而死(si)亡(wang)。所(suo)以，各(ge)種(zhong)培(pei)養(yang)液中(zhong)都(dou)含有較(jiao)大(da)量的谷氨酰(xian)胺(an)。谷氨酰(xian)胺(an)在溶液中(zhong)很不穩(wen)定(ding)，應(ying)置-20 ?C冰(bing)凍保(bao)存(cun)，用(yong)前(qian)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)。加(jia)有谷氨酰(xian)胺(an)的液體培(pei)養(yang)基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲(chu)存(cun)兩周以上(shang)時，應(ying)重新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來量的谷氨酰(xian)胺(an)。基(ji)礎醫學(xue)細(xi)胞(bao)中(zhong)心在(zai)其服務項(xiang)目(mu)中(zhong)配(pei)制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度(du)（100倍(bei)）的谷氨酰(xian)胺(an)溶液（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的谷氨酰(xian)胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)，其終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包裝為(wei)粉紅色(se)，-24?C保存(cun)。

　　3. BE(2)-M17細(xi)胞(bao) 培(pei)養(yang)用(yong)液(ye)pH對細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)的影響

　　由(you)於(yu)，大多(duo)數細(xi)胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏離此範圍(wei)對細(xi)胞(bao)將(jiang)產(chan)生(sheng)有害(hai)的影響。各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)對pH的要求也不*相(xiang)同(tong)，原代(dai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)壹般對pH變動耐(nai)受差，無限細(xi)胞(bao)系(xi)耐(nai)受力強。

　　但總(zong)體(ti)來說，細(xi)胞(bao)耐(nai)酸性(xing)比耐(nai)堿性(xing)強壹些(xie)，偏酸(suan)環(huan)境中(zhong)更(geng)利於(yu)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。因(yin)此(ci)，我們在(zai)配(pei)制(zhi)培(pei)養(yang)用(yong)液(ye)時，可把(ba)液(ye)體的pH稍微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸壹些(xie)。液體(ti)在(zai)經過(guo)0.10um或0.22um濾膜(mo)過(guo)濾時，溶液的pH還(hai)會(hui)向(xiang)上(shang)浮動(dong)0.2左右(you)。

　　4.BE(2)-M17細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)消(xiao)化時(shi)所(suo)用(yong)胰(yi)酶濃度(du)越高(gao)越好嗎(ma)？

　　不見(jian)得(de)！因(yin)為(wei)胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)溶液的消(xiao)化能(neng)力是(shi)和(he)溶液的pH、溫度、胰(yi)酶濃度(du)及溶液中(zhong)是(shi)否含有Ca++, Mg++離(li)子(zi)和(he)血清等(deng)因(yin)素(su)有關(guan)。通常情(qing)況下，pH 8.0 , 溫(wen)度(du) 37 oC 其作用(yong)能(neng)力zui強。另外，鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)及血清均能(neng)大大(da)降(jiang)低(di)其消(xiao)化能(neng)力。我們每(mei)次(ci)進行(xing)傳代(dai)消(xiao)化前(qian)，壹定(ding)要(yao)用(yong)D-Hanks液(ye)或PBS液反復(fu)沖洗細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶，以便於(yu)將含血清的培(pei)養(yang)基(ji)沖洗幹(gan)凈(jing)，這(zhe)樣就(jiu)能(neng)大(da)大提高(gao)消(xiao)化液(ye)的消(xiao)化能(neng)力。本(ben)中(zhong)心通常使用(yong)的消(xiao)化液(ye)濃度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用(yong)Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配(pei)制(zhi)。

　　多(duo)數細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)消(xiao)化可(ke)使用(yong)０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這(zhe)種(zhong)消(xiao)化液(ye)。

　　購(gou)買(mai)上(shang)海乾(qian)思(si)生(sheng)物(wu)細(xi)胞(bao)註(zhu)意(yi)事項(xiang)（乾(qian)思(si)生(sheng)物(wu)）發(fa)布(bu)

　　壹、客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)先(xian)不開蓋，放(fang)在(zai)培(pei)養(yang)箱靜置若(ruo)幹小(xiao)時(shi)後(hou)（看細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)而定(ding)）在(zai)倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況，並對細(xi)胞(bao)進行(xing)不同(tong)倍數拍(pai)照(zhao)（建(jian)議受收細(xi)胞(bao)時(shi)的培(pei)養(yang)基(ji)拍(pai)壹張照片(pian)，觀(guan)察培(pei)養(yang)基(ji)的顏色(se)和是(shi)否有漏(lou)液(ye)情(qing)況，顯微(wei)鏡下拍(pai)細(xi)胞(bao)100X，200X各(ge)壹張），排除(chu)細(xi)胞(bao)本(ben)身(shen)汙染(ran)的情(qing)況；

　　收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)未(wei)開封，出現汙染(ran)狀(zhuang)況(kuang)我們負(fu)責(ze)免費(fei)發送(song)壹株細(xi)胞(bao)。

　　二(er)、如為(wei)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)，請(qing)在顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)：

　　1. 未(wei)超(chao)過(guo)80%匯合度時，用(yong)75%酒精（建(jian)議配(pei)置75%酒精的水也是(shi)滅(mie)菌超純(chun)水，噴灑整(zheng)個瓶消(xiao)毒後(hou)放(fang)到(dao)超菌(jun)臺內，嚴(yan)格無菌操作(zuo)；然後(hou)打(da)開蓋子，先(xian)把培(pei)養(yang)基(ji)吸出(chu)10ml左右(you)，放(fang)在(zai)離(li)心(xin)管裏(li)，然後(hou)瓶口(kou)過(guo)火（嚴禁(jin)直接(jie)傾倒(dao)），這(zhe)樣可(ke)以保證不汙染(ran)，再(zai)用(yong)10ml的移液(ye)管(guan)，將剩(sheng)余的培(pei)液(ye)全部(bu)吸出(chu)，放(fang)於(yu)離心(xin)管中(zhong)，培(pei)養(yang)瓶中(zhong)只剩(sheng)余10ml左右(you)培(pei)液(ye)就(jiu)可(ke)以了。培(pei)養(yang)16hr(時間(jian)根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況調(tiao)整(zheng)）之(zhi)後(hou)，傳代(dai)或者凍存(cun)。

　　2. 超(chao)過(guo)80%匯合度時，請(qing)按(an)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件傳代(dai)培(pei)養(yang)。具體步驟如下：

　　1) 棄(qi)去培(pei)養(yang)液，用(yong)3ml PBS（不含鈣(gai)，鎂(mei)離子(zi)）洗1-2次(ci)；

　　2) 加(jia)1ml消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)T25培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒轉(zhuan)放(fang)於(yu)37度培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re)，然後(hou)又將培(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大(da)約(yue)30秒(miao)後(hou)，在倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓分散(san)，輕敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶，細(xi)胞(bao)隨(sui)即(ji)脫落(luo)下來；

　　3) 加(jia)入(ru)6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji)，吸出(chu)，分(fen)到(dao)新的培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，按(an)要(yao)求(qiu)分(fen)瓶。

　　三(san)、如為(wei)懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)，吸出(chu)培(pei)養(yang)液，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)離心(xin)5分鐘(zhong)，吸出(chu)上(shang)清，管底細(xi)胞(bao)用(yong)新(xin)鮮培(pei)養(yang)基(ji)懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)後(hou)移回(hui)培(pei)養(yang)瓶。

　　註(zhu)意(yi)：換(huan)液時壹半(ban)用(yong)我們的培(pei)養(yang)基(ji)，壹半(ban)用(yong)妳們的，以免細(xi)胞(bao)不適(shi)應(ying)而造(zao)成生(sheng)長(chang)不好(hao)。

　　四、細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題，可(ke)重發的情(qing)況有哪(na)些(xie)？判定(ding)標(biao)準是(shi)什(shen)麽？

　　（1）細(xi)胞(bao)運輸(shu)途中(zhong)遭遇的各(ge)種(zhong)問(wen)題，細(xi)胞(bao)丟(diu)失、破損、漏液(ye)等(deng)，重(zhong)發；

　　（2）凍存(cun)的細(xi)胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)，絕大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)未(wei)存(cun)活(huo)，重(zhong)發；

　　（3）存(cun)活(huo)的細(xi)胞(bao)靜置24小(xiao)時後(hou)，絕大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)未(wei)存(cun)活(huo)，重(zhong)發；

　　（4）凍存(cun)的細(xi)胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)或存(cun)活(huo)的細(xi)胞(bao)靜置4小(xiao)時後(hou)並且未(wei)開封，出現汙染(ran)，重(zhong)發；

　　（5）視(shi)具體情(qing)況而定(ding)。

　　五(wu)、細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題，不予(yu)以重發的情(qing)況有哪(na)些(xie)？

　　（1）客(ke)戶造(zao)成細(xi)胞(bao)汙染(ran)，不重(zhong)發(fa)；

　　（2）客(ke)戶不正(zheng)確(que)操作(zuo)致細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不好(hao)，不重(zhong)發(fa)；

　　（3）細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不好(hao)，未(wei)提供細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)前3天照片(pian)的，不重(zhong)發(fa)；

　　（4）細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)時經其它(ta)處理的，不重(zhong)發(fa)；

　　（5）細(xi)胞(bao)收(shou)到(dao)2天內，未(wei)告知，不重(zhong)發(fa)；

　　（6）視(shi)具體情(qing)況而定(ding)。

　　六(liu)、售(shou)後(hou)服務政策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品(pin)牌；部(bu)分產(chan)品(pin)現貨(huo)，超(chao)低(di)比價，另(ling)常備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現貨(huo) ；貨(huo)期(qi)短(duan)，價格優(you)，售後(hou)齊全。

　　細(xi)胞(bao)汙染(ran)問(wen)題，請(qing)在收到(dao)產(chan)品(pin)48小(xiao)時(shi)內，給(gei)我們提出真(zhen)實(shi)的實(shi)驗(yan)結果；細(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)問(wen)題，請(qing)在收到(dao)產(chan)品(pin)7天內給(gei)我們提出真(zhen)實(shi)的實(shi)驗(yan)結果，我們調(tiao)查核(he)實(shi)後(hou)予免費(fei)調(tiao)換(huan)，不收(shou)取(qu)任何費(fei)用(yong)。

　　需(xu)要(yao)客戶提供BE(2)-M17細(xi)胞(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)說明(ming)、細(xi)胞(bao)操作(zuo)處理方法(fa)、細(xi)胞(bao)質(zhi)量(liang)問(wen)題反(fan)饋(kui)表(biao)。

　　如用(yong)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)8-30天之(zhi)內，因(yin)處理不當造(zao)成細(xi)胞(bao)死(si)亡(wang)或汙染(ran)，我公司(si)將優(you)惠價重(zhong)新(xin)提供壹株原(yuan)細(xi)胞(bao)

　　BE(2)-M17細(xi)胞(bao)質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售(shou)後(hou)有保(bao)障(zhang)

　　★我庫細(xi)胞(bao)近3000種(zhong)，來源於(yu)美國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經過(guo)嚴格質(zhi)量(liang)控制(zhi)。

　　凍存(cun)細(xi)胞(bao)時(shi)間(jian)為(wei)5-7個工(gong)作(zuo)日(ri)，活(huo)細(xi)胞(bao)為(wei)7-15個工(gong)作(zuo)日(ri)。

　　★由(you)於(yu)細(xi)胞(bao)庫現有細(xi)胞(bao)類(lei)目(mu)多，為(wei)了不出(chu)現混亂錯誤，需要(yao)了(le)解(jie)BE(2)-M17細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)細(xi)胞(bao)價格及詳(xiang)細(xi)資(zi)料(liao)請(qing)老師(shi)，對您(nin)造(zao)成的不便(bian)還(hai)請(qing)見諒！

（編(bian)輯(ji)：tanxi）