PC-3M 1E8細胞_標(biao)準(zhun)的

　　細胞作為(wei)生(sheng)命組成(cheng)的zui小單元，研(yan)究其(qi)相(xiang)關的生(sheng)物行(xing)為(wei)及其(qi)規(gui)律(lv)與(yu)本質(zhi)，對於(yu)揭示(shi)生(sheng)命的奧秘(mi)，探索疾病(bing)的機理(li)與(yu)治(zhi)療(liao)手(shou)段，提高(gao)人類(lei)的生(sheng)存壽(shou)命(ming)與(yu)質(zhi)量，都(dou)有(you)著(zhe)重要(yao)的意義(yi)。對(dui)細胞的研(yan)究是壹(yi)個復(fu)雜(za)的工(gong)程(cheng)，細(xi)胞(bao)在(zai)人體內處於(yu)復(fu)雜(za)的微環境之中，包括(kuo)溫度(du)、氧氣濃度(du)、生(sheng)物因子(zi)濃度(du)、機械(xie)作用、細胞間相(xiang)互(hu)作用、細胞基質(zhi)間相(xiang)互(hu)作用等，同(tong)時，細(xi)胞體積微小(xiao)、種類(lei)多(duo)樣(yang)，在(zai)細(xi)胞(bao)水平(ping)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)識(shi)別、代謝(xie)物(wu)檢測(ce)、內部組分(fen)分(fen)析(xi)、細(xi)胞(bao)結構與(yu)功(gong)能表征(zheng)、細胞間相(xiang)互(hu)作用分(fen)析(xi)等工(gong)作也(ye)都(dou)有(you)著(zhe)很(hen)大(da)的難(nan)度(du)。PC-3M 1E8細胞，上(shang)海(hai)乾思生(sheng)物公(gong)司細胞近(jin)3000種，來(lai)源(yuan)於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細胞都(dou)是(shi)經過(guo)嚴格(ge)質(zhi)量控(kong)制(zhi)，在(zai)中國(guo)大陸努力搭(da)建(jian)正(zheng)牌(pai)細胞與(yu)國(guo)內廣(guang)大科研(yan)人員之間的溝通橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您提供(gong)PC-3M 1E8細胞外，還有(you)更(geng)多(duo)相(xiang)關(guan)實驗產(chan)品，標(biao)準(zhun)品，細(xi)胞(bao)株和(he)實驗技(ji)術(shu)服務(wu)等等前(qian)期(qi)後續服(fu)務(wu)。

　　1. PC-3M 1E8細胞液(ye)體培(pei)養基的保(bao)存是(shi)冷藏(zang)好(hao)？還是冷(leng)凍好(hao)？

　　要冷藏(zang)！！因為(wei)液體培(pei)養基經(jing)冷(leng)凍後(hou)再經溶化(hua)時，其(qi)溶(rong)液的pH值會(hui)發(fa)生(sheng)改變(bian)，溶(rong)液(ye)往往變(bian)堿(jian)，某(mou)些成(cheng)分(fen)溶(rong)解(jie)也(ye)會(hui)受到影響對細胞(bao)生(sheng)長不(bu)利。故液(ye)體培(pei)養基壹(yi)定(ding)要存(cun)放在冷藏(zang)箱中，通常(chang)液體培(pei)養基在(zai)冷(leng)藏(zang)條(tiao)件下(xia)可(ke)存放(fang)6個月 ~ 壹年。

　　2.PC-3M 1E8細胞 液(ye)體培(pei)養基中谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的作用，及使用方法(fa)。

　　幾(ji)乎(hu)所有(you)的細胞對(dui)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺有(you)較(jiao)高(gao)的要求(qiu)，細胞(bao)需要(yao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺合成(cheng)蛋白(bai)質(zhi)，在缺(que)少(shao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺時(shi)，細胞生(sheng)長不(bu)良而死(si)亡(wang)。所以，各(ge)種培(pei)養液(ye)中都含(han)有(you)較(jiao)大(da)量(liang)的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺。谷(gu)氨(an)酰(xian)胺在(zai)溶液中很(hen)不(bu)穩定(ding)，應(ying)置-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存，用前(qian)加(jia)入(ru)培(pei)養基中。加(jia)有(you)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的液體培(pei)養基4 ?C 冰(bing)箱儲存兩(liang)周(zhou)以上時(shi)，應重新(xin)加(jia)入(ru)原來量(liang)的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺。基礎(chu)醫學(xue)細(xi)胞中心在(zai)其(qi)服(fu)務(wu)項目(mu)中配(pei)制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了(le)高濃度(du)（100倍(bei)）的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺溶(rong)液（1ml/支）。每(mei)支(zhi)1ml的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺加(jia)到99ml*培(pei)養基中，其(qi)終濃度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養基。包(bao)裝(zhuang)為(wei)粉紅色(se)，-24?C保(bao)存。

　　3. PC-3M 1E8細胞 培(pei)養用液pH對細胞(bao)生(sheng)長的影響

　　由於(yu)，大(da)多(duo)數(shu)細胞適(shi)宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此範(fan)圍(wei)對細胞將產(chan)生(sheng)有(you)害的影響。各(ge)種細(xi)胞(bao)對pH的要求(qiu)也(ye)不(bu)*相(xiang)同(tong)，原代培(pei)養細(xi)胞壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐(nai)受差，無(wu)限(xian)細(xi)胞(bao)系(xi)耐(nai)受力強(qiang)。

　　但總(zong)體來說，細胞(bao)耐(nai)酸(suan)性(xing)比(bi)耐(nai)堿(jian)性(xing)強(qiang)壹(yi)些，偏(pian)酸環(huan)境中更利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生(sheng)長。因此，我們(men)在配(pei)制(zhi)培(pei)養用液時，可(ke)把液(ye)體的pH稍(shao)微(wei)調得偏(pian)酸壹(yi)些。液體在經過(guo)0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜過(guo)濾(lv)時(shi)，溶(rong)液(ye)的pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左右(you)。

　　4.PC-3M 1E8細胞 細(xi)胞傳(chuan)代消(xiao)化(hua)時所(suo)用胰酶濃度(du)越高(gao)越好(hao)嗎(ma)？

　　不見得！因為(wei)胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)溶液(ye)的消(xiao)化(hua)能力是(shi)和(he)溶液(ye)的pH、溫度(du)、胰酶濃度(du)及溶液(ye)中是否(fou)含(han)有(you)Ca++, Mg++離子和(he)血清(qing)等因素有(you)關(guan)。通(tong)常(chang)情況(kuang)下，pH 8.0 , 溫(wen)度(du) 37 oC 其(qi)作用能力zui強(qiang)。另外，鈣(gai)、鎂(mei)離子及血清(qing)均能大大(da)降低(di)其(qi)消(xiao)化(hua)能力。我(wo)們(men)每次(ci)進行傳(chuan)代消(xiao)化(hua)前(qian)，壹定(ding)要用D-Hanks液或PBS液反(fan)復(fu)沖洗細(xi)胞培(pei)養瓶，以便(bian)於(yu)將含(han)血清(qing)的培(pei)養基沖洗幹(gan)凈，這樣就(jiu)能大大(da)提高(gao)消(xiao)化(hua)液的消(xiao)化(hua)能力。本中心通(tong)常(chang)使用的消(xiao)化(hua)液濃度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋白(bai)酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋白(bai)酶(mei)

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配(pei)制(zhi)。

　　多(duo)數(shu)細胞傳(chuan)代消(xiao)化(hua)可(ke)使用０.０５％胰蛋白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消(xiao)化(hua)液。

　　購(gou)買(mai)上海乾思生(sheng)物細(xi)胞註(zhu)意事項（乾思生(sheng)物）發(fa)布(bu)

　　壹、客戶(hu)收到細(xi)胞(bao)先不(bu)開(kai)蓋，放(fang)在(zai)培(pei)養箱靜置(zhi)若幹小時(shi)後(hou)（看細胞密度(du)而定(ding)）在倒置顯微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞生(sheng)長情(qing)況，並對(dui)細胞進(jin)行(xing)不(bu)同(tong)倍(bei)數(shu)拍(pai)照（建(jian)議受收細(xi)胞(bao)時(shi)的培(pei)養基拍(pai)壹(yi)張照片(pian)，觀(guan)察(cha)培(pei)養基的顏(yan)色和(he)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)情況(kuang)，顯微鏡(jing)下拍(pai)細(xi)胞100X，200X各(ge)壹張），排除細胞(bao)本身汙染的情況；

　　收到細(xi)胞(bao)未(wei)開(kai)封，出現(xian)汙染狀況我們負(fu)責(ze)免費(fei)發(fa)送(song)壹株(zhu)細胞(bao)。

　　二、如為(wei)貼壁(bi)細(xi)胞，請在(zai)顯微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞密度(du)：

　　1. 未(wei)超(chao)過(guo)80%匯合度(du)時，用75%酒精（建議配(pei)置(zhi)75%酒(jiu)精的水也(ye)是(shi)滅菌超(chao)純水(shui)，噴(pen)灑整(zheng)個瓶消(xiao)毒(du)後(hou)放(fang)到超(chao)菌臺(tai)內(nei)，嚴格(ge)無(wu)菌操(cao)作；然後(hou)打開蓋子，先把(ba)培(pei)養基吸(xi)出10ml左右(you)，放在(zai)離心管(guan)裏(li)，然後瓶口過(guo)火（嚴禁直接傾(qing)倒），這樣可(ke)以保(bao)證(zheng)不(bu)汙染，再用10ml的移液管(guan)，將剩(sheng)余(yu)的培(pei)液(ye)全部吸出，放於(yu)離心管(guan)中，培(pei)養瓶中只(zhi)剩(sheng)余(yu)10ml左(zuo)右(you)培(pei)液(ye)就可(ke)以了(le)。培(pei)養16hr(時(shi)間根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)生(sheng)長情(qing)況調整(zheng)）之後，傳(chuan)代或者(zhe)凍存。

　　2. 超(chao)過(guo)80%匯合度(du)時，請按(an)細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件傳(chuan)代培(pei)養。具體步(bu)驟如(ru)下(xia)：

　　1) 棄(qi)去培(pei)養液(ye)，用3ml PBS（不含(han)鈣，鎂(mei)離子）洗1-2次(ci)；

　　2) 加(jia)1ml消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)T25培(pei)養瓶中，倒轉(zhuan)放(fang)於(yu)37度(du)培(pei)養箱1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re)，然(ran)後又將培(pei)養瓶倒轉(zhuan)大(da)約(yue)30秒(miao)後，在(zai)倒置顯微鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓分(fen)散(san)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶，細胞隨(sui)即(ji)脫(tuo)落下(xia)來(lai)；

　　3) 加(jia)入(ru)6-8ml*培(pei)養基，吸(xi)出，分(fen)到新(xin)的培(pei)養瓶中，按(an)要求(qiu)分(fen)瓶。

　　三、如為(wei)懸浮(fu)細(xi)胞，吸出培(pei)養液(ye)，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)離心5分(fen)鐘(zhong)，吸(xi)出上清(qing)，管(guan)底細(xi)胞用新鮮培(pei)養基懸浮(fu)細(xi)胞後移回培(pei)養瓶。

　　註(zhu)意：換液(ye)時壹(yi)半用我們的培(pei)養基，壹(yi)半(ban)用妳們的，以免細(xi)胞不(bu)適應而造(zao)成(cheng)生(sheng)長不(bu)好。

　　四、細胞出現(xian)問題，可(ke)重發(fa)的情況有(you)哪些？判(pan)定(ding)標(biao)準(zhun)是(shi)什麽(me)？

　　（1）細胞運輸途中遭(zao)遇(yu)的各(ge)種問(wen)題，細(xi)胞丟失(shi)、破損、漏(lou)液(ye)等，重發(fa)；

　　（2）凍存的細胞復(fu)蘇後，絕(jue)大多(duo)數(shu)細胞未(wei)存(cun)活，重發(fa)；

　　（3）存活的細胞靜(jing)置24小時(shi)後，絕(jue)大多(duo)數(shu)細胞未(wei)存(cun)活，重發(fa)；

　　（4）凍存的細胞復(fu)蘇後或(huo)存活的細胞靜(jing)置4小時(shi)後並且(qie)未(wei)開(kai)封，出現(xian)汙染，重發(fa)；

　　（5）視具體情況而定(ding)。

　　五(wu)、細胞(bao)出現(xian)問題，不(bu)予以重發(fa)的情況有(you)哪些？

　　（1）客戶(hu)造(zao)成(cheng)細胞(bao)汙染，不重發(fa)；

　　（2）客戶(hu)不(bu)正(zheng)確操(cao)作致細(xi)胞狀態(tai)不好(hao)，不重發(fa)；

　　（3）細胞狀(zhuang)態(tai)不好(hao)，未(wei)提供(gong)細胞培(pei)養前(qian)3天照片(pian)的，不重發(fa)；

　　（4）細胞培(pei)養時(shi)經其(qi)它(ta)處(chu)理(li)的，不重發(fa)；

　　（5）細胞收到2天(tian)內(nei)，未(wei)告知(zhi)，不(bu)重發(fa)；

　　（6）視具體情況而定(ding)。

　　六、售(shou)後(hou)服(fu)務(wu)政(zheng)策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌(pai)；部分(fen)產(chan)品現(xian)貨，超(chao)低(di)比(bi)價(jia)，另常(chang)備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備現(xian)貨 ；貨(huo)期(qi)短(duan)，價(jia)格優(you)，售(shou)後(hou)齊全。

　　細胞汙染問題，請在(zai)收到產(chan)品48小(xiao)時(shi)內，給(gei)我們提出真(zhen)實的實驗結果(guo)；細胞(bao)活性(xing)問(wen)題，請在(zai)收到產(chan)品7天(tian)內(nei)給我(wo)們提出真(zhen)實的實驗結果(guo)，我們(men)調查(zha)核實後予(yu)免(mian)費調換(huan)，不收取(qu)任(ren)何(he)費用。

　　需要客(ke)戶(hu)提供(gong)PC-3M 1E8細胞細(xi)胞(bao)培(pei)養說明(ming)、細(xi)胞(bao)操(cao)作處理(li)方(fang)法(fa)、細(xi)胞(bao)質(zhi)量問(wen)題反(fan)饋表。

　　如用戶(hu)收到細(xi)胞(bao)8-30天之內，因處(chu)理(li)不(bu)當(dang)造(zao)成(cheng)細胞(bao)死(si)亡(wang)或汙染，我公司將優(you)惠(hui)價(jia)重新(xin)提供(gong)壹株原細胞(bao)

　　PC-3M 1E8細胞質(zhi)量可(ke)靠，售(shou)後(hou)有(you)保(bao)障

　　★我庫細(xi)胞(bao)近(jin)3000種，來(lai)源(yuan)於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細胞都(dou)是(shi)經過(guo)嚴格(ge)質(zhi)量控(kong)制(zhi)。

　　凍存細(xi)胞時(shi)間為(wei)5-7個工(gong)作日，活細胞為(wei)7-15個工(gong)作日。

　　★由於(yu)細(xi)胞(bao)庫現(xian)有(you)細(xi)胞(bao)類(lei)目(mu)多(duo)，為(wei)了(le)不出現(xian)混亂(luan)錯(cuo)誤，需(xu)要了(le)解(jie)PC-3M 1E8細胞(bao)相(xiang)關(guan)細胞(bao)價(jia)格及(ji)詳(xiang)細(xi)資料(liao)請老師，對您造(zao)成(cheng)的不便(bian)還請見(jian)諒(liang)！

（編(bian)輯：tanxi）