PC-3M IE8細(xi)胞_復(fu)蘇的(de)

　　細(xi)胞作(zuo)為生(sheng)命(ming)組(zu)成(cheng)的(de)zui小單元，研(yan)究其(qi)相(xiang)關(guan)的(de)生物行為及其(qi)規(gui)律(lv)與本(ben)質(zhi)，對於(yu)揭示(shi)生(sheng)命的(de)奧秘，探索(suo)疾病(bing)的(de)機理與治(zhi)療手(shou)段，提(ti)高人類(lei)的(de)生存(cun)壽(shou)命與質(zhi)量，都有(you)著重要(yao)的(de)意義。對細(xi)胞的(de)研究是壹(yi)個(ge)復雜(za)的(de)工程，細(xi)胞在(zai)人(ren)體內(nei)處(chu)於(yu)復雜(za)的(de)微(wei)環(huan)境之中(zhong)，包括溫(wen)度、氧氣(qi)濃度、生物因子濃度、機械(xie)作(zuo)用(yong)、細(xi)胞間相互作用、細(xi)胞基(ji)質(zhi)間相互作用等，同(tong)時(shi)，細(xi)胞體積(ji)微(wei)小、種類多樣(yang)，在(zai)細(xi)胞水平進(jin)行細(xi)胞識(shi)別、代(dai)謝(xie)物檢測(ce)、內部(bu)組(zu)分(fen)分(fen)析(xi)、細(xi)胞結(jie)構(gou)與功(gong)能表(biao)征(zheng)、細(xi)胞間相互作用分(fen)析(xi)等工(gong)作也(ye)都有(you)著很大的(de)難度。PC-3M IE8細(xi)胞，上(shang)海乾(qian)思(si)生物公司(si)細(xi)胞近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細(xi)胞都(dou)是經過嚴格(ge)質(zhi)量控制(zhi)，在中(zhong)國(guo)大陸(lu)努力搭(da)建正(zheng)牌細(xi)胞與國(guo)內廣(guang)大科研人員(yuan)之間的(de)溝通(tong)橋梁(liang)。為您(nin)提(ti)供PC-3M IE8細(xi)胞外(wai)，還(hai)有(you)更(geng)多相(xiang)關(guan)實(shi)驗(yan)產品(pin)，標(biao)準(zhun)品(pin)，細(xi)胞株(zhu)和(he)實(shi)驗(yan)技術服務等等前(qian)期後(hou)續服務。

　　1. PC-3M IE8細(xi)胞液(ye)體培(pei)養基(ji)的(de)保存(cun)是冷藏好？還(hai)是冷凍好？

　　要(yao)冷藏！！因(yin)為液(ye)體培(pei)養基(ji)經冷凍後(hou)再經溶化時(shi)，其(qi)溶液(ye)的(de)pH值會(hui)發生改變(bian)，溶液(ye)往往變(bian)堿，某些(xie)成(cheng)分(fen)溶解也會受到(dao)影(ying)響(xiang)對細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)利。故(gu)液(ye)體培(pei)養基(ji)壹(yi)定(ding)要(yao)存(cun)放(fang)在(zai)冷藏箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常液(ye)體培(pei)養基(ji)在(zai)冷藏條件(jian)下可存(cun)放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

　　2.PC-3M IE8細(xi)胞 液(ye)體培(pei)養基(ji)中(zhong)谷氨酰(xian)胺(an)的(de)作用(yong)，及使(shi)用方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎(hu)所有的(de)細(xi)胞對谷氨酰(xian)胺(an)有(you)較(jiao)高(gao)的(de)要求(qiu)，細(xi)胞需(xu)要(yao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)合(he)成蛋白質(zhi)，在(zai)缺少谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)時(shi)，細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)良(liang)而死(si)亡。所以，各(ge)種(zhong)培養液(ye)中(zhong)都含有(you)較(jiao)大量的(de)谷氨(an)酰(xian)胺(an)。谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)很不穩定(ding)，應(ying)置-20 ?C冰(bing)凍保(bao)存(cun)，用(yong)前加(jia)入(ru)培(pei)養基(ji)中(zhong)。加有谷氨(an)酰(xian)胺(an)的(de)液(ye)體培(pei)養基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存(cun)兩周以上(shang)時(shi)，應(ying)重新(xin)加入(ru)原來(lai)量的(de)谷氨(an)酰(xian)胺(an)。基(ji)礎醫(yi)學(xue)細(xi)胞中(zhong)心在其服(fu)務項目(mu)中(zhong)配制分(fen)裝了高(gao)濃(nong)度（100倍(bei)）的(de)谷氨(an)酰(xian)胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每支1ml的(de)谷氨(an)酰(xian)胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養基(ji)中(zhong)，其終濃度為2mM/ml培(pei)養基(ji)。包(bao)裝為粉紅(hong)色，-24?C保存(cun)。

　　3. PC-3M IE8細(xi)胞 培(pei)養用(yong)液(ye)pH對細(xi)胞生(sheng)長(chang)的(de)影響(xiang)

　　由於(yu)，大多數細(xi)胞適(shi)宜(yi)pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範(fan)圍(wei)對細(xi)胞將(jiang)產(chan)生有害(hai)的(de)影響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞對pH的(de)要求(qiu)也不*相同，原代(dai)培(pei)養細(xi)胞壹(yi)般(ban)對pH變(bian)動耐受差(cha)，無限(xian)細(xi)胞系(xi)耐受力強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體來(lai)說(shuo)，細(xi)胞耐(nai)酸(suan)性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強(qiang)壹(yi)些(xie)，偏酸(suan)環(huan)境中(zhong)更利於(yu)細(xi)胞生(sheng)長(chang)。因(yin)此，我們在(zai)配制培養用(yong)液(ye)時(shi)，可把液(ye)體的(de)pH稍(shao)微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸(suan)壹(yi)些(xie)。液(ye)體在(zai)經過0.10um或0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液(ye)的(de)pH還(hai)會(hui)向(xiang)上(shang)浮動0.2左右。

　　4.PC-3M IE8細(xi)胞 細(xi)胞傳代(dai)消(xiao)化時(shi)所用胰酶濃度越高(gao)越好嗎？

　　不(bu)見得！因(yin)為胰蛋(dan)白(bai)酶溶液(ye)的(de)消化能力是和(he)溶(rong)液(ye)的(de)pH、溫(wen)度、胰酶濃度及溶(rong)液(ye)中(zhong)是否(fou)含有(you)Ca++, Mg++離(li)子和血(xue)清等因(yin)素有(you)關(guan)。通(tong)常情(qing)況下，pH 8.0 , 溫(wen)度 37 oC 其作(zuo)用能力zui強(qiang)。另(ling)外(wai)，鈣、鎂(mei)離(li)子及血(xue)清均能大大降低其消(xiao)化能力。我們每次(ci)進(jin)行傳代(dai)消(xiao)化前(qian)，壹(yi)定(ding)要(yao)用D-Hanks液(ye)或(huo)PBS液(ye)反(fan)復(fu)沖洗(xi)細(xi)胞培(pei)養瓶，以便(bian)於(yu)將(jiang)含血(xue)清的(de)培養基(ji)沖洗(xi)幹凈(jing)，這樣(yang)就(jiu)能大大提高消化液(ye)的(de)消化能力。本中(zhong)心通(tong)常使(shi)用的(de)消化液(ye)濃(nong)度為：

　　（1）０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋(dan)白(bai)酶

　　溶(rong)液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使(shi)用Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配(pei)制(zhi)。

　　多(duo)數(shu)細(xi)胞傳代(dai)消(xiao)化可使(shi)用０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消(xiao)化液(ye)。

　　購買上(shang)海乾(qian)思(si)生物細(xi)胞註(zhu)意(yi)事(shi)項（乾(qian)思(si)生物）發布

　　壹(yi)、客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞先(xian)不(bu)開蓋，放(fang)在(zai)培(pei)養箱(xiang)靜置(zhi)若幹小時(shi)後(hou)（看(kan)細(xi)胞密(mi)度而定(ding)）在(zai)倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)，並(bing)對細(xi)胞進(jin)行不(bu)同(tong)倍(bei)數(shu)拍照(zhao)（建(jian)議受收(shou)細(xi)胞時(shi)的(de)培養基(ji)拍壹(yi)張照(zhao)片(pian)，觀(guan)察培養基(ji)的(de)顏色和是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)情(qing)況(kuang)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下拍細(xi)胞100X，200X各(ge)壹(yi)張），排(pai)除(chu)細(xi)胞本(ben)身(shen)汙(wu)染(ran)的(de)情況(kuang)；

　　收(shou)到(dao)細(xi)胞未(wei)開封(feng)，出現汙(wu)染(ran)狀況我們負(fu)責(ze)免(mian)費發送壹(yi)株(zhu)細(xi)胞。

　　二(er)、如(ru)為貼(tie)壁(bi)細(xi)胞，請(qing)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞密(mi)度：

　　1. 未(wei)超過80%匯合(he)度時(shi)，用(yong)75%酒精(jing)（建(jian)議配置(zhi)75%酒(jiu)精的(de)水也是滅(mie)菌(jun)超純(chun)水，噴灑(sa)整個瓶消毒(du)後(hou)放(fang)到(dao)超菌(jun)臺(tai)內，嚴格(ge)無菌(jun)操作；然(ran)後(hou)打開蓋子，先(xian)把培(pei)養基(ji)吸出10ml左右，放(fang)在(zai)離(li)心管(guan)裏，然(ran)後(hou)瓶口過火（嚴禁(jin)直(zhi)接(jie)傾倒），這樣(yang)可以保(bao)證不(bu)汙(wu)染(ran)，再用10ml的(de)移(yi)液(ye)管(guan)，將(jiang)剩(sheng)余的(de)培液(ye)全(quan)部(bu)吸出，放(fang)於(yu)離(li)心管(guan)中(zhong)，培養瓶中(zhong)只剩余(yu)10ml左右培(pei)液(ye)就(jiu)可以了。培(pei)養16hr(時(shi)間根據(ju)細(xi)胞生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)調(tiao)整）之後(hou)，傳代(dai)或(huo)者凍(dong)存(cun)。

　　2. 超過80%匯合(he)度時(shi)，請(qing)按細(xi)胞培(pei)養條件(jian)傳代(dai)培(pei)養。具體步(bu)驟(zhou)如下：

　　1) 棄(qi)去培養液(ye)，用(yong)3ml PBS（不(bu)含鈣，鎂(mei)離(li)子）洗1-2次(ci)；

　　2) 加(jia)1ml消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)T25培養瓶中(zhong)，倒轉(zhuan)放(fang)於(yu)37度培養箱(xiang)1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re)，然(ran)後(hou)又將(jiang)培(pei)養瓶倒轉(zhuan)大約(yue)30秒後(hou)，在倒置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓分(fen)散，輕敲幾(ji)下培(pei)養培(pei)養瓶，細(xi)胞隨即(ji)脫落下來(lai)；

　　3) 加(jia)入(ru)6-8ml*培養基(ji)，吸出，分(fen)到(dao)新(xin)的(de)培養瓶中(zhong)，按要求分(fen)瓶。

　　三、如為懸(xuan)浮細(xi)胞，吸出培養液(ye)，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)離(li)心5分(fen)鐘(zhong)，吸出上(shang)清，管(guan)底細(xi)胞用(yong)新(xin)鮮(xian)培(pei)養基(ji)懸(xuan)浮細(xi)胞後(hou)移(yi)回(hui)培(pei)養瓶。

　　註(zhu)意(yi)：換液(ye)時(shi)壹(yi)半(ban)用我們的(de)培養基(ji)，壹(yi)半(ban)用妳們的(de)，以免(mian)細(xi)胞不(bu)適(shi)應(ying)而造(zao)成生(sheng)長(chang)不好。

　　四(si)、細(xi)胞出現問題(ti)，可重(zhong)發(fa)的(de)情況(kuang)有哪(na)些(xie)？判(pan)定(ding)標(biao)準(zhun)是什(shen)麽(me)？

　　（1）細(xi)胞運(yun)輸(shu)途中(zhong)遭(zao)遇的(de)各(ge)種(zhong)問題(ti)，細(xi)胞丟失(shi)、破損(sun)、漏(lou)液(ye)等，重(zhong)發；

　　（2）凍(dong)存(cun)的(de)細(xi)胞復(fu)蘇後(hou)，絕大多數細(xi)胞未(wei)存(cun)活(huo)，重發(fa)；

　　（3）存(cun)活(huo)的(de)細(xi)胞靜(jing)置(zhi)24小時(shi)後(hou)，絕大多數細(xi)胞未(wei)存(cun)活(huo)，重發(fa)；

　　（4）凍(dong)存(cun)的(de)細(xi)胞復(fu)蘇後(hou)或存(cun)活(huo)的(de)細(xi)胞靜(jing)置(zhi)4小時(shi)後(hou)並(bing)且(qie)未(wei)開封(feng)，出現汙(wu)染(ran)，重發；

　　（5）視具體情(qing)況(kuang)而定(ding)。

　　五(wu)、細(xi)胞出現問題(ti)，不予以重(zhong)發的(de)情況(kuang)有哪(na)些(xie)？

　　（1）客戶造(zao)成細(xi)胞汙(wu)染(ran)，不重發(fa)；

　　（2）客戶不(bu)正確操作致(zhi)細(xi)胞狀態不好，不重發；

　　（3）細(xi)胞狀態不好，未(wei)提(ti)供細(xi)胞培(pei)養前(qian)3天(tian)照(zhao)片(pian)的(de)，不重(zhong)發；

　　（4）細(xi)胞培(pei)養時(shi)經其它處理的(de)，不重(zhong)發；

　　（5）細(xi)胞收(shou)到(dao)2天(tian)內(nei)，未(wei)告(gao)知，不重發；

　　（6）視具體情(qing)況(kuang)而定(ding)。

　　六(liu)、售後(hou)服務政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品(pin)牌；部(bu)分(fen)產品(pin)現(xian)貨(huo)，超低(di)比價，另(ling)常備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備(bei)現貨 ；貨(huo)期(qi)短，價(jia)格(ge)優(you)，售後(hou)齊全(quan)。

　　細(xi)胞汙(wu)染(ran)問題(ti)，請(qing)在(zai)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)48小時(shi)內(nei)，給(gei)我們提(ti)出真實的(de)實驗(yan)結果；細(xi)胞活(huo)性(xing)問題(ti)，請(qing)在(zai)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)7天(tian)內(nei)給(gei)我們提(ti)出真實的(de)實驗(yan)結果，我們調(tiao)查核(he)實(shi)後(hou)予免費調(tiao)換，不收(shou)取任(ren)何費用。

　　需(xu)要(yao)客戶提(ti)供PC-3M IE8細(xi)胞細(xi)胞培(pei)養說(shuo)明(ming)、細(xi)胞操作處(chu)理方(fang)法(fa)、細(xi)胞質(zhi)量問題(ti)反(fan)饋(kui)表(biao)。

　　如(ru)用(yong)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞8-30天(tian)之(zhi)內(nei)，因(yin)處理不當造成(cheng)細(xi)胞死(si)亡或(huo)汙(wu)染(ran)，我公司(si)將(jiang)優(you)惠價(jia)重新(xin)提供壹(yi)株(zhu)原細(xi)胞

　　PC-3M IE8細(xi)胞質(zhi)量可靠(kao)，售後(hou)有保(bao)障(zhang)

　　★我庫細(xi)胞近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細(xi)胞都(dou)是經過嚴格(ge)質(zhi)量控制(zhi)。

　　凍(dong)存(cun)細(xi)胞時(shi)間為5-7個(ge)工(gong)作日(ri)，活細(xi)胞為7-15個(ge)工(gong)作日(ri)。

　　★由於(yu)細(xi)胞庫現有(you)細(xi)胞類(lei)目(mu)多(duo)，為了不(bu)出現混亂(luan)錯(cuo)誤，需要(yao)了解PC-3M IE8細(xi)胞相(xiang)關(guan)細(xi)胞價(jia)格(ge)及詳(xiang)細(xi)資(zi)料(liao)請(qing)老(lao)師，對您造成的(de)不便(bian)還(hai)請(qing)見諒！

（編(bian)輯：tanxi）