RAW 264.7細胞(bao)_標(biao)準的(de)

　　細胞(bao)作(zuo)為(wei)生(sheng)命組成(cheng)的(de)zui小(xiao)單(dan)元，研究其相關的(de)生(sheng)物(wu)行(xing)為(wei)及其規(gui)律與本質(zhi)，對於揭示生(sheng)命的(de)奧秘，探(tan)索(suo)疾病的(de)機(ji)理與(yu)治(zhi)療手(shou)段，提(ti)高人類的(de)生(sheng)存(cun)壽(shou)命與質(zhi)量，都(dou)有著(zhe)重(zhong)要的(de)意義。對細胞(bao)的(de)研究是(shi)壹(yi)個(ge)復(fu)雜(za)的(de)工(gong)程，細胞(bao)在(zai)人(ren)體(ti)內處(chu)於復(fu)雜(za)的(de)微(wei)環(huan)境(jing)之中(zhong)，包括(kuo)溫(wen)度(du)、氧(yang)氣濃(nong)度(du)、生(sheng)物(wu)因(yin)子(zi)濃(nong)度(du)、機(ji)械(xie)作(zuo)用(yong)、細胞(bao)間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)、細胞(bao)基(ji)質(zhi)間相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)等，同時，細胞(bao)體(ti)積(ji)微(wei)小、種(zhong)類(lei)多(duo)樣(yang)，在(zai)細胞(bao)水(shui)平進(jin)行細胞(bao)識別(bie)、代(dai)謝物檢測(ce)、內部(bu)組分(fen)分析、細胞(bao)結構與功能表(biao)征(zheng)、細胞(bao)間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)分析等工(gong)作(zuo)也都(dou)有著(zhe)很(hen)大(da)的(de)難(nan)度(du)。RAW 264.7細胞(bao)，上(shang)海乾思生(sheng)物(wu)公(gong)司(si)細胞(bao)近3000種(zhong)，來(lai)源於美國ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格質(zhi)量控(kong)制，在中(zhong)國大(da)陸努力(li)搭建(jian)正(zheng)牌(pai)細胞(bao)與(yu)國(guo)內廣(guang)大(da)科(ke)研人員(yuan)之間的(de)溝通(tong)橋梁。為(wei)您(nin)提供(gong)RAW 264.7細胞(bao)外，還有更多相(xiang)關(guan)實(shi)驗(yan)產品，標(biao)準品，細胞(bao)株(zhu)和(he)實(shi)驗(yan)技術(shu)服務(wu)等等前期後(hou)續服務(wu)。

　　1. RAW 264.7細胞(bao)液(ye)體培(pei)養基(ji)的(de)保(bao)存(cun)是(shi)冷(leng)藏(zang)好(hao)？還是(shi)冷(leng)凍(dong)好(hao)？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因(yin)為液(ye)體培(pei)養基(ji)經(jing)冷(leng)凍(dong)後(hou)再(zai)經(jing)溶化時，其溶液(ye)的(de)pH值(zhi)會發(fa)生(sheng)改(gai)變(bian)，溶(rong)液(ye)往(wang)往(wang)變(bian)堿(jian)，某(mou)些(xie)成(cheng)分溶(rong)解也會受(shou)到(dao)影響對細胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)利。故(gu)液(ye)體培(pei)養基(ji)壹(yi)定(ding)要(yao)存(cun)放(fang)在(zai)冷(leng)藏(zang)箱(xiang)中(zhong)，通常(chang)液(ye)體培(pei)養基(ji)在(zai)冷(leng)藏(zang)條(tiao)件(jian)下可存放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹年。

　　2.RAW 264.7細胞(bao) 液(ye)體培(pei)養基(ji)中(zhong)谷(gu)氨酰胺(an)的(de)作(zuo)用(yong)，及使(shi)用(yong)方法。

　　幾乎(hu)所有的(de)細胞(bao)對谷(gu)氨酰胺(an)有較(jiao)高的(de)要(yao)求(qiu)，細胞(bao)需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋白(bai)質(zhi)，在缺(que)少谷(gu)氨酰胺(an)時，細胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)良(liang)而死亡(wang)。所以(yi)，各種(zhong)培(pei)養液(ye)中(zhong)都含(han)有較(jiao)大量(liang)的(de)谷(gu)氨酰胺(an)。谷(gu)氨酰胺(an)在(zai)溶液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩定，應置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存，用前加入(ru)培(pei)養基(ji)中(zhong)。加有谷(gu)氨酰胺(an)的(de)液(ye)體培(pei)養基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存(cun)兩周(zhou)以(yi)上(shang)時，應重(zhong)新(xin)加(jia)入(ru)原來(lai)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰胺(an)。基(ji)礎(chu)醫(yi)學(xue)細胞(bao)中(zhong)心(xin)在(zai)其服務(wu)項目(mu)中(zhong)配制分裝(zhuang)了高濃(nong)度(du)（100倍）的(de)谷(gu)氨酰胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷(gu)氨酰胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養基(ji)中(zhong)，其終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為(wei)粉紅色，-24?C保存。

　　3. RAW 264.7細胞(bao) 培(pei)養用(yong)液(ye)pH對細胞(bao)生(sheng)長(chang)的(de)影(ying)響

　　由(you)於，大多數細胞(bao)適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此範圍對細胞(bao)將產生(sheng)有害(hai)的(de)影(ying)響。各種(zhong)細胞(bao)對pH的(de)要(yao)求(qiu)也不(bu)*相同，原代(dai)培(pei)養細胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變動(dong)耐(nai)受(shou)差(cha)，無(wu)限(xian)細胞(bao)系(xi)耐(nai)受(shou)力強(qiang)。

　　但總體來(lai)說(shuo)，細胞(bao)耐(nai)酸性(xing)比耐(nai)堿(jian)性(xing)強(qiang)壹些，偏(pian)酸(suan)環(huan)境中(zhong)更利於細胞(bao)生(sheng)長(chang)。因(yin)此(ci)，我們在配制培(pei)養用(yong)液(ye)時，可把液(ye)體的(de)pH稍(shao)微調得偏酸壹(yi)些(xie)。液(ye)體在經過(guo)0.10um或0.22um濾膜過濾時，溶液(ye)的(de)pH還會向上(shang)浮動(dong)0.2左右(you)。

　　4.RAW 264.7細胞(bao) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)消(xiao)化時所用(yong)胰酶(mei)濃(nong)度(du)越高越好(hao)嗎？

　　不(bu)見(jian)得！因(yin)為(wei)胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)溶液(ye)的(de)消(xiao)化能力(li)是(shi)和(he)溶(rong)液(ye)的(de)pH、溫(wen)度(du)、胰酶(mei)濃(nong)度(du)及(ji)溶(rong)液(ye)中(zhong)是(shi)否(fou)含有Ca++, Mg++離(li)子(zi)和(he)血(xue)清(qing)等因(yin)素有關(guan)。通(tong)常(chang)情(qing)況(kuang)下，pH 8.0 , 溫度(du) 37 oC 其作(zuo)用(yong)能力(li)zui強。另(ling)外，鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)及血(xue)清(qing)均能大(da)大降(jiang)低其消(xiao)化能力(li)。我們每(mei)次(ci)進(jin)行(xing)傳代消(xiao)化前，壹定(ding)要(yao)用D-Hanks液(ye)或PBS液(ye)反(fan)復(fu)沖(chong)洗細胞(bao)培(pei)養瓶(ping)，以(yi)便(bian)於將含血(xue)清(qing)的(de)培(pei)養基(ji)沖(chong)洗(xi)幹凈(jing)，這樣(yang)就能大(da)大提高消(xiao)化液(ye)的(de)消(xiao)化能力(li)。本中(zhong)心(xin)通(tong)常(chang)使(shi)用(yong)的(de)消(xiao)化液(ye)濃(nong)度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)

　　溶液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使(shi)用(yong)Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配制。

　　多數細胞(bao)傳(chuan)代(dai)消(xiao)化可使(shi)用(yong)０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這種(zhong)消(xiao)化液(ye)。

　　購買(mai)上(shang)海乾思生(sheng)物(wu)細胞(bao)註(zhu)意事項(xiang)（乾思生(sheng)物(wu)）發(fa)布

　　壹、客戶(hu)收到(dao)細胞(bao)先不開(kai)蓋(gai)，放(fang)在(zai)培(pei)養箱(xiang)靜置(zhi)若(ruo)幹小時後(hou)（看(kan)細胞(bao)密(mi)度(du)而定）在(zai)倒置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)，並對細胞(bao)進(jin)行(xing)不(bu)同倍數拍(pai)照(zhao)（建議受(shou)收細胞(bao)時的(de)培(pei)養基(ji)拍(pai)壹(yi)張照片，觀(guan)察(cha)培(pei)養基(ji)的(de)顏(yan)色和(he)是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)情況(kuang)，顯(xian)微鏡下拍(pai)細胞(bao)100X，200X各壹張），排除細胞(bao)本身汙染(ran)的(de)情(qing)況(kuang)；

　　收到(dao)細胞(bao)未(wei)開(kai)封(feng)，出(chu)現汙染(ran)狀(zhuang)況(kuang)我們負責(ze)免(mian)費(fei)發(fa)送壹(yi)株(zhu)細胞(bao)。

　　二(er)、如為(wei)貼壁(bi)細胞(bao)，請(qing)在(zai)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)密(mi)度(du)：

　　1. 未超(chao)過(guo)80%匯(hui)合(he)度(du)時，用75%酒(jiu)精（建(jian)議配置(zhi)75%酒(jiu)精的(de)水(shui)也是(shi)滅(mie)菌超(chao)純水(shui)，噴(pen)灑整個(ge)瓶(ping)消(xiao)毒後(hou)放(fang)到(dao)超(chao)菌臺內，嚴(yan)格(ge)無菌操(cao)作(zuo)；然後(hou)打開蓋(gai)子(zi)，先把培(pei)養基(ji)吸(xi)出(chu)10ml左右(you)，放(fang)在(zai)離(li)心(xin)管(guan)裏，然後(hou)瓶(ping)口(kou)過(guo)火(huo)（嚴禁(jin)直(zhi)接(jie)傾(qing)倒），這(zhe)樣(yang)可以(yi)保證(zheng)不(bu)汙染(ran)，再(zai)用(yong)10ml的(de)移液(ye)管(guan)，將剩余(yu)的(de)培(pei)液(ye)全部吸(xi)出(chu)，放(fang)於離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，培(pei)養瓶(ping)中(zhong)只剩余(yu)10ml左右(you)培(pei)液(ye)就可以(yi)了。培(pei)養16hr(時間根據細胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)調整）之後(hou)，傳(chuan)代或者凍存(cun)。

　　2. 超(chao)過(guo)80%匯(hui)合(he)度(du)時，請(qing)按(an)細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)傳代(dai)培(pei)養。具(ju)體步驟如下(xia)：

　　1) 棄(qi)去培(pei)養液(ye)，用3ml PBS（不含鈣(gai)，鎂(mei)離(li)子(zi)）洗1-2次；

　　2) 加1ml消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒轉(zhuan)放(fang)於37度(du)培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預(yu)熱(re)，然後(hou)又將培(pei)養瓶(ping)倒轉(zhuan)大約(yue)30秒後(hou)，在(zai)倒置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓分(fen)散，輕敲幾下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping)，細胞(bao)隨(sui)即(ji)脫落下來(lai)；

　　3) 加入(ru)6-8ml*培(pei)養基(ji)，吸(xi)出(chu)，分到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，按要(yao)求分(fen)瓶(ping)。

　　三、如為(wei)懸(xuan)浮細胞(bao)，吸(xi)出(chu)培(pei)養液(ye)，1000轉(zhuan)/分鐘(zhong)離(li)心(xin)5分(fen)鐘(zhong)，吸(xi)出(chu)上(shang)清(qing)，管(guan)底細胞(bao)用(yong)新(xin)鮮(xian)培(pei)養基(ji)懸(xuan)浮細胞(bao)後(hou)移回(hui)培(pei)養瓶(ping)。

　　註(zhu)意：換(huan)液(ye)時壹半(ban)用我(wo)們(men)的(de)培(pei)養基(ji)，壹(yi)半(ban)用妳(ni)們的(de)，以(yi)免細胞(bao)不(bu)適(shi)應而造成(cheng)生(sheng)長(chang)不(bu)好(hao)。

　　四、細胞(bao)出(chu)現(xian)問題，可重發(fa)的(de)情(qing)況(kuang)有哪些？判定標(biao)準是(shi)什(shen)麽？

　　（1）細胞(bao)運(yun)輸途中(zhong)遭(zao)遇(yu)的(de)各種(zhong)問題，細胞(bao)丟(diu)失(shi)、破(po)損(sun)、漏(lou)液(ye)等，重(zhong)發(fa)；

　　（2）凍存(cun)的(de)細胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)，絕(jue)大多數細胞(bao)未(wei)存(cun)活(huo)，重(zhong)發(fa)；

　　（3）存活(huo)的(de)細胞(bao)靜(jing)置(zhi)24小(xiao)時後(hou)，絕(jue)大多數細胞(bao)未(wei)存(cun)活(huo)，重(zhong)發(fa)；

　　（4）凍存(cun)的(de)細胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)或(huo)存活(huo)的(de)細胞(bao)靜(jing)置(zhi)4小(xiao)時後(hou)並(bing)且未開(kai)封(feng)，出現(xian)汙染(ran)，重(zhong)發(fa)；

　　（5）視具(ju)體情況(kuang)而定。

　　五、細胞(bao)出(chu)現(xian)問題，不予(yu)以(yi)重發(fa)的(de)情(qing)況(kuang)有哪些？

　　（1）客戶(hu)造成(cheng)細胞(bao)汙染(ran)，不(bu)重發(fa)；

　　（2）客戶(hu)不正(zheng)確(que)操(cao)作(zuo)致細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不(bu)好(hao)，不重(zhong)發(fa)；

　　（3）細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不(bu)好(hao)，未提(ti)供細胞(bao)培(pei)養前3天照(zhao)片(pian)的(de)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（4）細胞(bao)培(pei)養時經其它(ta)處理的(de)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（5）細胞(bao)收到(dao)2天內，未(wei)告(gao)知，不重發(fa)；

　　（6）視具(ju)體情況(kuang)而定。

　　六(liu)、售(shou)後(hou)服務(wu)政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌(pai)；部(bu)分(fen)產(chan)品現(xian)貨(huo)，超(chao)低比(bi)價，另(ling)常(chang)備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備(bei)現(xian)貨(huo) ；貨(huo)期短，價格優(you)，售(shou)後(hou)齊(qi)全。

　　細胞(bao)汙染(ran)問題，請(qing)在(zai)收到(dao)產品48小(xiao)時內，給我們(men)提出(chu)真實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結果；細胞(bao)活(huo)性(xing)問題，請(qing)在(zai)收到(dao)產品7天內給我們(men)提出(chu)真實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結果，我們調查核實(shi)後(hou)予(yu)免(mian)費(fei)調換(huan)，不收取任何費(fei)用。

　　需要客戶(hu)提供(gong)RAW 264.7細胞(bao)細胞(bao)培(pei)養說(shuo)明、細胞(bao)操(cao)作(zuo)處(chu)理方(fang)法、細胞(bao)質(zhi)量問題反(fan)饋表(biao)。

　　如用(yong)戶(hu)收到(dao)細胞(bao)8-30天之內，因(yin)處(chu)理不(bu)當(dang)造(zao)成(cheng)細胞(bao)死(si)亡(wang)或汙染(ran)，我(wo)公司(si)將優(you)惠價重新(xin)提(ti)供(gong)壹(yi)株(zhu)原細胞(bao)

　　RAW 264.7細胞(bao)質(zhi)量可靠，售(shou)後(hou)有保(bao)障(zhang)

　　★我庫細胞(bao)近3000種(zhong)，來(lai)源於美國ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格質(zhi)量控(kong)制。

　　凍存細胞(bao)時間為5-7個(ge)工(gong)作(zuo)日(ri)，活(huo)細胞(bao)為(wei)7-15個(ge)工(gong)作(zuo)日(ri)。

　　★由(you)於細胞(bao)庫(ku)現(xian)有細胞(bao)類(lei)目(mu)多(duo)，為(wei)了不出現(xian)混亂(luan)錯(cuo)誤，需要(yao)了解RAW 264.7細胞(bao)相(xiang)關(guan)細胞(bao)價格及詳細資(zi)料(liao)請(qing)老(lao)師(shi)，對您造(zao)成(cheng)的(de)不(bu)便(bian)還請(qing)見(jian)諒！

（編(bian)輯(ji)：tanxi）