SMMC-7721細胞(bao)_選購指南

　　細(xi)胞(bao)作(zuo)為生(sheng)命組成的(de)zui小單元(yuan)，研(yan)究其相(xiang)關的生(sheng)物行為(wei)及(ji)其規(gui)律與(yu)本(ben)質，對(dui)於揭(jie)示(shi)生(sheng)命的奧(ao)秘(mi)，探(tan)索疾病(bing)的機(ji)理與治療手(shou)段，提(ti)高人(ren)類(lei)的生(sheng)存壽(shou)命與質量(liang)，都(dou)有(you)著重(zhong)要(yao)的意(yi)義。對(dui)細胞(bao)的(de)研(yan)究是(shi)壹(yi)個(ge)復(fu)雜(za)的工(gong)程(cheng)，細胞(bao)在(zai)人(ren)體內處(chu)於復(fu)雜(za)的微(wei)環境(jing)之中(zhong)，包(bao)括溫度、氧氣(qi)濃(nong)度、生(sheng)物因子(zi)濃(nong)度、機械(xie)作(zuo)用、細(xi)胞(bao)間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用、細(xi)胞(bao)基(ji)質間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用等(deng)，同(tong)時(shi)，細胞(bao)體(ti)積微(wei)小、種類(lei)多(duo)樣，在(zai)細(xi)胞(bao)水平(ping)進行(xing)細(xi)胞(bao)識(shi)別、代謝物檢測、內部(bu)組分分析(xi)、細(xi)胞(bao)結(jie)構與(yu)功(gong)能表(biao)征(zheng)、細胞(bao)間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用分析(xi)等(deng)工(gong)作(zuo)也都(dou)有(you)著很大(da)的(de)難度。SMMC-7721細胞(bao)，上海(hai)乾思生(sheng)物公司細胞(bao)近(jin)3000種，來(lai)源於美(mei)國(guo)ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格質量(liang)控(kong)制(zhi)，在(zai)中(zhong)國(guo)大(da)陸(lu)努力(li)搭建正(zheng)牌細(xi)胞(bao)與(yu)國(guo)內廣(guang)大(da)科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)之間的(de)溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為您提(ti)供(gong)SMMC-7721細(xi)胞(bao)外(wai)，還有更(geng)多(duo)相(xiang)關實驗(yan)產(chan)品，標(biao)準(zhun)品，細(xi)胞(bao)株和實(shi)驗(yan)技(ji)術服務(wu)等等(deng)前期(qi)後(hou)續(xu)服務(wu)。

　　1. SMMC-7721細(xi)胞(bao)液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存是冷(leng)藏(zang)好(hao)？還是冷(leng)凍(dong)好(hao)？

　　要(yao)冷(leng)藏(zang)！！因為(wei)液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)經(jing)冷(leng)凍(dong)後再(zai)經(jing)溶化(hua)時，其溶液(ye)的pH值(zhi)會(hui)發(fa)生(sheng)改變，溶(rong)液(ye)往往變堿(jian)，某些成分溶(rong)解(jie)也會(hui)受(shou)到(dao)影響對(dui)細胞(bao)生(sheng)長(chang)不利(li)。故液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)壹(yi)定(ding)要存放在冷(leng)藏(zang)箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)在(zai)冷(leng)藏(zang)條(tiao)件下可存放6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

　　2.SMMC-7721細(xi)胞(bao) 液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的作(zuo)用，及(ji)使(shi)用(yong)方法。

　　幾乎所有(you)的(de)細(xi)胞(bao)對(dui)谷氨酰(xian)胺(an)有較高的(de)要(yao)求，細胞(bao)需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)合成蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺(que)少谷氨酰(xian)胺(an)時，細胞(bao)生(sheng)長(chang)不良(liang)而死(si)亡。所以，各種(zhong)培(pei)養(yang)液中(zhong)都(dou)含(han)有較大(da)量(liang)的谷氨酰(xian)胺(an)。谷氨酰(xian)胺(an)在溶液中(zhong)很(hen)不穩定(ding)，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存，用前加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)。加(jia)有(you)谷氨酰(xian)胺(an)的液體培(pei)養(yang)基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲(chu)存兩(liang)周(zhou)以上時(shi)，應(ying)重(zhong)新加(jia)入(ru)原來(lai)量的(de)谷氨酰(xian)胺(an)。基(ji)礎(chu)醫(yi)學(xue)細(xi)胞(bao)中(zhong)心(xin)在(zai)其服務(wu)項目中(zhong)配(pei)制(zhi)分裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度（100倍）的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)溶液（1ml/支）。每支1ml的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)加到(dao)99ml*培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)，其終(zhong)濃(nong)度為2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為(wei)粉(fen)紅(hong)色(se)，-24?C保(bao)存。

　　3. SMMC-7721細(xi)胞(bao) 培(pei)養(yang)用液pH對(dui)細胞(bao)生(sheng)長(chang)的(de)影(ying)響

　　由於，大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此(ci)範(fan)圍對(dui)細胞(bao)將(jiang)產(chan)生(sheng)有(you)害的影(ying)響。各種(zhong)細(xi)胞(bao)對(dui)pH的要(yao)求也不*相(xiang)同，原代培(pei)養(yang)細胞(bao)壹(yi)般(ban)對(dui)pH變動(dong)耐受(shou)差(cha)，無(wu)限細(xi)胞(bao)系耐受(shou)力(li)強。

　　但(dan)總(zong)體(ti)來(lai)說(shuo)，細胞(bao)耐酸(suan)性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強壹(yi)些，偏酸(suan)環境(jing)中(zhong)更(geng)利(li)於細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。因此(ci)，我(wo)們(men)在配(pei)制(zhi)培(pei)養(yang)用液時，可把(ba)液體(ti)的pH稍(shao)微(wei)調得偏酸(suan)壹(yi)些。液體(ti)在經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜過(guo)濾(lv)時，溶(rong)液(ye)的pH還會向上浮(fu)動0.2左(zuo)右(you)。

　　4.SMMC-7721細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代消(xiao)化(hua)時所用(yong)胰(yi)酶(mei)濃(nong)度越高(gao)越好(hao)嗎(ma)？

　　不見(jian)得！因為(wei)胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)溶液(ye)的(de)消化(hua)能(neng)力(li)是和溶(rong)液的pH、溫度、胰酶(mei)濃(nong)度及溶(rong)液(ye)中(zhong)是(shi)否(fou)含(han)有Ca++, Mg++離子(zi)和血(xue)清等(deng)因素(su)有關。通(tong)常情(qing)況(kuang)下，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作(zuo)用能(neng)力(li)zui強。另(ling)外(wai)，鈣(gai)、鎂離子(zi)及血(xue)清均能(neng)大(da)大(da)降(jiang)低(di)其消化(hua)能力(li)。我(wo)們(men)每次(ci)進(jin)行(xing)傳(chuan)代消化(hua)前，壹(yi)定(ding)要用(yong)D-Hanks液或(huo)PBS液(ye)反(fan)復(fu)沖洗(xi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶，以便(bian)於將(jiang)含(han)血清的(de)培(pei)養(yang)基(ji)沖洗(xi)幹(gan)凈，這樣(yang)就能大(da)大(da)提(ti)高消化液(ye)的(de)消(xiao)化(hua)能(neng)力。本(ben)中(zhong)心(xin)通(tong)常使用(yong)的(de)消(xiao)化(hua)液(ye)濃(nong)度為：

　　（1）０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)

　　溶(rong)液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配(pei)制(zhi)。

　　多(duo)數細(xi)胞(bao)傳(chuan)代消(xiao)化(hua)可使(shi)用０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這種(zhong)消化液。

　　購買(mai)上海(hai)乾思生(sheng)物細胞(bao)註(zhu)意(yi)事項（乾思生(sheng)物）發布(bu)

　　壹(yi)、客(ke)戶收到(dao)細胞(bao)先(xian)不開蓋(gai)，放在培(pei)養(yang)箱(xiang)靜(jing)置(zhi)若(ruo)幹(gan)小時後（看細(xi)胞(bao)密(mi)度而定(ding)）在倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)，並(bing)對(dui)細胞(bao)進(jin)行不同倍數拍(pai)照(zhao)（建議(yi)受(shou)收(shou)細(xi)胞(bao)時(shi)的培(pei)養(yang)基(ji)拍(pai)壹(yi)張(zhang)照(zhao)片，觀察(cha)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)顏(yan)色(se)和是(shi)否(fou)有(you)漏液情(qing)況(kuang)，顯微(wei)鏡下拍(pai)細胞(bao)100X，200X各(ge)壹(yi)張(zhang)），排除細胞(bao)本(ben)身汙染的情(qing)況(kuang)；

　　收(shou)到(dao)細胞(bao)未(wei)開封，出現(xian)汙染狀況我(wo)們(men)負責免(mian)費(fei)發送(song)壹(yi)株細(xi)胞(bao)。

　　二(er)、如為貼壁細胞(bao)，請(qing)在顯微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)密(mi)度：

　　1. 未(wei)超過(guo)80%匯合度時，用(yong)75%酒(jiu)精（建議(yi)配(pei)置(zhi)75%酒精的(de)水也是(shi)滅(mie)菌(jun)超純水，噴(pen)灑整個(ge)瓶(ping)消(xiao)毒(du)後放到(dao)超菌(jun)臺內，嚴格無(wu)菌(jun)操作(zuo)；然後打(da)開蓋(gai)子(zi)，先把(ba)培(pei)養(yang)基(ji)吸(xi)出(chu)10ml左(zuo)右(you)，放(fang)在離心(xin)管裏(li)，然後瓶口過(guo)火(huo)（嚴禁(jin)直(zhi)接傾(qing)倒），這樣(yang)可以保(bao)證(zheng)不汙染，再用10ml的(de)移液(ye)管(guan)，將(jiang)剩(sheng)余(yu)的培(pei)液(ye)全部(bu)吸出，放(fang)於離心(xin)管中(zhong)，培(pei)養(yang)瓶中(zhong)只(zhi)剩(sheng)余(yu)10ml左(zuo)右(you)培(pei)液(ye)就可以了(le)。培(pei)養(yang)16hr(時間根據(ju)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)調整(zheng)）之後，傳(chuan)代(dai)或(huo)者(zhe)凍(dong)存。

　　2. 超過(guo)80%匯合度時，請(qing)按細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件傳(chuan)代培(pei)養(yang)。具體步驟(zhou)如下：

　　1) 棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)液，用3ml PBS（不含(han)鈣(gai)，鎂離子(zi)）洗(xi)1-2次(ci)；

　　2) 加(jia)1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒轉放於37度培(pei)養(yang)箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預(yu)熱，然後又(you)將(jiang)培(pei)養(yang)瓶倒轉大(da)約(yue)30秒後(hou)，在(zai)倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓分散(san)，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶，細胞(bao)隨即(ji)脫落(luo)下來(lai)；

　　3) 加(jia)入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji)，吸(xi)出(chu)，分到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，按要(yao)求分瓶(ping)。

　　三(san)、如為懸浮(fu)細(xi)胞(bao)，吸(xi)出培(pei)養(yang)液，1000轉/分鐘(zhong)離心(xin)5分鐘(zhong)，吸出上清，管(guan)底細胞(bao)用(yong)新鮮培(pei)養(yang)基(ji)懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)後(hou)移回培(pei)養(yang)瓶。

　　註(zhu)意(yi)：換液時壹(yi)半用我(wo)們(men)的培(pei)養(yang)基(ji)，壹(yi)半用妳(ni)們(men)的，以免細(xi)胞(bao)不適應(ying)而(er)造(zao)成生(sheng)長(chang)不好(hao)。

　　四、細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題，可重(zhong)發(fa)的情(qing)況(kuang)有哪(na)些？判定(ding)標(biao)準(zhun)是(shi)什麽？

　　（1）細(xi)胞(bao)運輸(shu)途中(zhong)遭(zao)遇(yu)的(de)各(ge)種(zhong)問題，細胞(bao)丟失、破(po)損(sun)、漏液等(deng)，重(zhong)發(fa)；

　　（2）凍(dong)存的細胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)，絕大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)未(wei)存活(huo)，重(zhong)發(fa)；

　　（3）存活(huo)的(de)細(xi)胞(bao)靜(jing)置(zhi)24小時後，絕大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)未(wei)存活(huo)，重(zhong)發(fa)；

　　（4）凍(dong)存的細胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)或(huo)存活(huo)的(de)細(xi)胞(bao)靜(jing)置(zhi)4小時後並(bing)且(qie)未(wei)開封，出現(xian)汙染，重(zhong)發(fa)；

　　（5）視(shi)具體情(qing)況(kuang)而定(ding)。

　　五(wu)、細胞(bao)出(chu)現(xian)問題，不予以重(zhong)發(fa)的情(qing)況(kuang)有哪(na)些？

　　（1）客(ke)戶造(zao)成細(xi)胞(bao)汙染，不重(zhong)發(fa)；

　　（2）客(ke)戶不正(zheng)確(que)操作(zuo)致細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態不好(hao)，不重(zhong)發(fa)；

　　（3）細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態不好(hao)，未(wei)提(ti)供(gong)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)前3天照(zhao)片的，不重(zhong)發(fa)；

　　（4）細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)時經(jing)其它(ta)處理(li)的，不重(zhong)發(fa)；

　　（5）細(xi)胞(bao)收(shou)到(dao)2天內，未(wei)告(gao)知(zhi)，不重(zhong)發(fa)；

　　（6）視(shi)具體情(qing)況(kuang)而定(ding)。

　　六(liu)、售後服務(wu)政(zheng)策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品牌；部(bu)分產(chan)品現(xian)貨(huo)，超低(di)比(bi)價，另(ling)常備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備(bei)現(xian)貨(huo) ；貨(huo)期(qi)短，價格優(you)，售後齊(qi)全。

　　細(xi)胞(bao)汙染問題，請在收(shou)到(dao)產(chan)品48小時內，給(gei)我(wo)們(men)提出真(zhen)實(shi)的實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)；細(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)問題，請在收(shou)到(dao)產(chan)品7天內給(gei)我(wo)們(men)提出真(zhen)實(shi)的實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)，我(wo)們(men)調查(zha)核(he)實後(hou)予(yu)免費(fei)調換，不收取(qu)任(ren)何費(fei)用。

　　需(xu)要(yao)客(ke)戶提供(gong)SMMC-7721細(xi)胞(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)說(shuo)明、細(xi)胞(bao)操作(zuo)處理(li)方法、細胞(bao)質量(liang)問題反(fan)饋(kui)表。

　　如用戶收(shou)到(dao)細胞(bao)8-30天之內，因處(chu)理不當(dang)造(zao)成細(xi)胞(bao)死(si)亡或(huo)汙染，我公司將(jiang)優(you)惠價重(zhong)新提(ti)供(gong)壹(yi)株原細胞(bao)

　　SMMC-7721細(xi)胞(bao)質量(liang)可靠(kao)，售後(hou)有保(bao)障

　　★我(wo)庫(ku)細胞(bao)近(jin)3000種，來(lai)源於美(mei)國(guo)ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格質量(liang)控(kong)制(zhi)。

　　凍(dong)存細胞(bao)時(shi)間為(wei)5-7個(ge)工(gong)作(zuo)日，活(huo)細(xi)胞(bao)為(wei)7-15個(ge)工(gong)作(zuo)日。

　　★由於細(xi)胞(bao)庫(ku)現(xian)有細胞(bao)類(lei)目多(duo)，為了(le)不出現(xian)混(hun)亂(luan)錯(cuo)誤，需(xu)要(yao)了(le)解(jie)SMMC-7721細胞(bao)相(xiang)關細胞(bao)價格及(ji)詳(xiang)細資料(liao)請(qing)老(lao)師，對(dui)您造(zao)成的(de)不便(bian)還請見(jian)諒！

（編輯(ji)：tanxi）