SV40轉(zhuan)染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)_復蘇的(de)

　　細(xi)胞(bao)作(zuo)為生命(ming)組成的(de)zui小(xiao)單(dan)元，研(yan)究(jiu)其(qi)相關的(de)生(sheng)物(wu)行為及其(qi)規(gui)律(lv)與(yu)本質(zhi)，對(dui)於揭(jie)示(shi)生命(ming)的(de)奧(ao)秘，探索疾病的(de)機理與(yu)治(zhi)療(liao)手(shou)段(duan)，提高人(ren)類的(de)生(sheng)存壽(shou)命(ming)與(yu)質量(liang)，都有著(zhe)重要的(de)意義。對細(xi)胞(bao)的(de)研(yan)究(jiu)是壹(yi)個復雜的(de)工(gong)程(cheng)，細(xi)胞(bao)在(zai)人(ren)體(ti)內(nei)處於復雜的(de)微(wei)環境(jing)之(zhi)中(zhong)，包(bao)括(kuo)溫(wen)度、氧氣濃(nong)度、生物(wu)因子(zi)濃(nong)度、機械作(zuo)用、細(xi)胞(bao)間相互作用(yong)、細(xi)胞(bao)基(ji)質(zhi)間相互作用(yong)等(deng)，同(tong)時，細(xi)胞(bao)體(ti)積(ji)微小(xiao)、種(zhong)類多(duo)樣，在(zai)細(xi)胞(bao)水(shui)平(ping)進行(xing)細(xi)胞(bao)識(shi)別(bie)、代謝物(wu)檢(jian)測(ce)、內(nei)部(bu)組分分(fen)析、細(xi)胞(bao)結(jie)構(gou)與(yu)功能(neng)表(biao)征、細(xi)胞(bao)間相互作用(yong)分(fen)析等(deng)工作(zuo)也都有著(zhe)很(hen)大(da)的(de)難(nan)度(du)。SV40轉(zhuan)染人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)，上海乾思生物(wu)公(gong)司(si)細(xi)胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於美(mei)國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都是(shi)經過嚴格質量(liang)控制(zhi)，在(zai)中(zhong)國(guo)大(da)陸努(nu)力(li)搭建正牌(pai)細(xi)胞(bao)與(yu)國(guo)內(nei)廣(guang)大(da)科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)之(zhi)間的(de)溝(gou)通(tong)橋梁。為您提供SV40轉(zhuan)染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)外(wai)，還有更多(duo)相關實(shi)驗(yan)產品，標(biao)準(zhun)品，細(xi)胞(bao)株(zhu)和實(shi)驗(yan)技(ji)術服(fu)務等(deng)等前期(qi)後續(xu)服務(wu)。

　　1. SV40轉染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)的(de)保(bao)存是(shi)冷藏(zang)好？還是(shi)冷凍(dong)好？

　　要冷藏(zang)！！因為液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)經(jing)冷凍(dong)後再經溶化(hua)時，其(qi)溶液(ye)的(de)pH值會(hui)發生(sheng)改(gai)變(bian)，溶液(ye)往(wang)往(wang)變(bian)堿(jian)，某些(xie)成(cheng)分(fen)溶解也會受到影響(xiang)對細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)利。故(gu)液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)壹(yi)定要存放(fang)在(zai)冷藏(zang)箱中(zhong)，通(tong)常(chang)液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)在(zai)冷藏(zang)條件下可(ke)存放(fang)6個月(yue) ~ 壹年。

　　2.SV40轉染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao) 液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)中(zhong)谷(gu)氨酰胺的(de)作(zuo)用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎所有的(de)細(xi)胞(bao)對(dui)谷(gu)氨酰胺有較高的(de)要求(qiu)，細(xi)胞(bao)需要谷(gu)氨酰胺合成蛋(dan)白質，在(zai)缺少谷(gu)氨酰胺時，細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)良(liang)而(er)死亡。所以，各(ge)種培(pei)養液(ye)中(zhong)都含有較大(da)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰胺。谷氨酰胺在(zai)溶液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩定，應置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍保(bao)存，用(yong)前加入(ru)培(pei)養基(ji)中(zhong)。加(jia)有谷氨酰胺的(de)液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)4 ?C 冰(bing)箱儲存兩周(zhou)以(yi)上時，應重新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來(lai)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰胺。基(ji)礎(chu)醫(yi)學(xue)細(xi)胞(bao)中(zhong)心(xin)在(zai)其(qi)服務項目(mu)中(zhong)配(pei)制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了(le)高濃(nong)度（100倍）的(de)谷(gu)氨酰胺溶液(ye)（1ml/支）。每(mei)支1ml的(de)谷(gu)氨酰胺加到99ml*培(pei)養基(ji)中(zhong)，其(qi)終(zhong)濃(nong)度為2mM/ml培(pei)養基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為粉紅(hong)色(se)，-24?C保(bao)存。

　　3. SV40轉染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao) 培(pei)養用(yong)液(ye)pH對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)的(de)影(ying)響(xiang)

　　由於，大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為7.2~7.4，偏(pian)離此範圍(wei)對細(xi)胞(bao)將(jiang)產生(sheng)有害的(de)影(ying)響(xiang)。各(ge)種細(xi)胞(bao)對(dui)pH的(de)要求(qiu)也不(bu)*相同(tong)，原(yuan)代培(pei)養細(xi)胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變(bian)動(dong)耐(nai)受差，無(wu)限(xian)細(xi)胞(bao)系耐(nai)受力強(qiang)。

　　但(dan)總體(ti)來(lai)說，細(xi)胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比(bi)耐(nai)堿(jian)性強(qiang)壹些(xie)，偏(pian)酸環境(jing)中(zhong)更利於細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。因此(ci)，我(wo)們(men)在(zai)配制(zhi)培(pei)養用(yong)液(ye)時，可把(ba)液(ye)體(ti)的(de)pH稍(shao)微(wei)調(tiao)得(de)偏(pian)酸壹些。液(ye)體(ti)在(zai)經過0.10um或0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時，溶液(ye)的(de)pH還會(hui)向(xiang)上浮動(dong)0.2左(zuo)右。

　　4.SV40轉染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代消(xiao)化(hua)時所用(yong)胰(yi)酶濃(nong)度越(yue)高越(yue)好嗎？

　　不(bu)見得！因為胰(yi)蛋白酶溶(rong)液(ye)的(de)消(xiao)化(hua)能力是(shi)和溶(rong)液(ye)的(de)pH、溫(wen)度(du)、胰(yi)酶濃(nong)度及溶液(ye)中(zhong)是(shi)否含有Ca++, Mg++離子(zi)和血(xue)清(qing)等(deng)因素(su)有關。通(tong)常情(qing)況(kuang)下(xia)，pH 8.0 , 溫(wen)度(du) 37 oC 其(qi)作用能力(li)zui強(qiang)。另(ling)外(wai)，鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)及(ji)血(xue)清(qing)均(jun)能(neng)大(da)大(da)降低(di)其(qi)消(xiao)化(hua)能力。我(wo)們(men)每(mei)次進行(xing)傳(chuan)代消(xiao)化(hua)前，壹定(ding)要用(yong)D-Hanks液(ye)或(huo)PBS液(ye)反(fan)復沖(chong)洗(xi)細(xi)胞(bao)培(pei)養瓶(ping)，以便於將(jiang)含血(xue)清(qing)的(de)培(pei)養基(ji)沖(chong)洗(xi)幹(gan)凈(jing)，這樣就能(neng)大(da)大(da)提高消(xiao)化(hua)液(ye)的(de)消(xiao)化(hua)能力。本(ben)中(zhong)心(xin)通常(chang)使(shi)用(yong)的(de)消(xiao)化(hua)液(ye)濃(nong)度為：

　　（1）０.０５％胰(yi)蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰(yi)蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰(yi)蛋白酶

　　溶液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使(shi)用(yong)Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配(pei)制(zhi)。

　　多(duo)數細(xi)胞(bao)傳(chuan)代消(xiao)化(hua)可使(shi)用(yong)０.０５％胰(yi)蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這(zhe)種消(xiao)化(hua)液(ye)。

　　購買(mai)上海乾思生物(wu)細(xi)胞(bao)註意事項（乾思生物(wu)）發布(bu)

　　壹、客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)先不(bu)開蓋，放(fang)在(zai)培(pei)養箱(xiang)靜(jing)置(zhi)若(ruo)幹小(xiao)時後（看(kan)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)而定(ding)）在(zai)倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)，並對細(xi)胞(bao)進行(xing)不(bu)同(tong)倍數拍(pai)照(zhao)（建議(yi)受收(shou)細(xi)胞(bao)時的(de)培(pei)養基(ji)拍(pai)壹張(zhang)照片，觀(guan)察(cha)培(pei)養基(ji)的(de)顏(yan)色(se)和是(shi)否有漏(lou)液(ye)情(qing)況(kuang)，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)拍細(xi)胞(bao)100X，200X各(ge)壹(yi)張(zhang)），排(pai)除(chu)細(xi)胞(bao)本(ben)身(shen)汙染的(de)情(qing)況(kuang)；

　　收(shou)到細(xi)胞(bao)未(wei)開封，出(chu)現(xian)汙染狀(zhuang)況(kuang)我(wo)們(men)負(fu)責免費(fei)發送(song)壹(yi)株(zhu)細(xi)胞(bao)。

　　二、如為貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)，請(qing)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)：

　　1. 未(wei)超過80%匯(hui)合度時，用75%酒精(jing)（建議(yi)配(pei)置(zhi)75%酒精(jing)的(de)水(shui)也是滅菌超(chao)純水(shui)，噴灑(sa)整(zheng)個瓶(ping)消(xiao)毒(du)後(hou)放(fang)到超菌(jun)臺內(nei)，嚴(yan)格(ge)無(wu)菌操作；然(ran)後打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)，先把(ba)培(pei)養基(ji)吸(xi)出10ml左右，放(fang)在(zai)離心(xin)管裏(li)，然(ran)後瓶(ping)口(kou)過火（嚴禁直(zhi)接傾(qing)倒(dao)），這(zhe)樣可以保(bao)證(zheng)不(bu)汙染，再用10ml的(de)移(yi)液(ye)管，將(jiang)剩余(yu)的(de)培(pei)液(ye)全(quan)部(bu)吸(xi)出(chu)，放(fang)於離(li)心(xin)管中(zhong)，培(pei)養瓶(ping)中(zhong)只(zhi)剩余(yu)10ml左右(you)培(pei)液(ye)就可(ke)以(yi)了(le)。培(pei)養16hr(時間根據細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)調(tiao)整(zheng)）之(zhi)後(hou)，傳(chuan)代或者凍存。

　　2. 超過80%匯(hui)合度時，請(qing)按(an)細(xi)胞(bao)培(pei)養條件傳(chuan)代培(pei)養。具(ju)體步(bu)驟如下(xia)：

　　1) 棄去培(pei)養液(ye)，用(yong)3ml PBS（不(bu)含鈣(gai)，鎂離(li)子(zi)）洗(xi)1-2次；

　　2) 加1ml消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)轉(zhuan)放(fang)於37度(du)培(pei)養箱(xiang)1-3分鐘預(yu)熱(re)，然(ran)後又(you)將(jiang)培(pei)養瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大(da)約(yue)30秒(miao)後(hou)，在(zai)倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)分散，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養培(pei)養瓶(ping)，細(xi)胞(bao)隨(sui)即(ji)脫落下來(lai)；

　　3) 加入(ru)6-8ml*培(pei)養基(ji)，吸(xi)出，分到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，按(an)要求(qiu)分(fen)瓶。

　　三、如為懸浮細(xi)胞(bao)，吸(xi)出(chu)培(pei)養液(ye)，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘離心(xin)5分鐘，吸出(chu)上清(qing)，管底細(xi)胞(bao)用(yong)新(xin)鮮培(pei)養基(ji)懸浮細(xi)胞(bao)後(hou)移(yi)回培(pei)養瓶(ping)。

　　註意：換液(ye)時壹半(ban)用我(wo)們(men)的(de)培(pei)養基(ji)，壹(yi)半用妳(ni)們(men)的(de)，以(yi)免細(xi)胞(bao)不(bu)適應而造(zao)成(cheng)生(sheng)長(chang)不(bu)好。

　　四、細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，可(ke)重發的(de)情(qing)況(kuang)有哪些？判(pan)定(ding)標(biao)準(zhun)是(shi)什麽(me)？

　　（1）細(xi)胞(bao)運(yun)輸途(tu)中(zhong)遭(zao)遇(yu)的(de)各(ge)種(zhong)問(wen)題(ti)，細(xi)胞(bao)丟失、破損、漏(lou)液(ye)等(deng)，重發；

　　（2）凍存的(de)細(xi)胞(bao)復蘇後，絕大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)未(wei)存活，重發；

　　（3）存活的(de)細(xi)胞(bao)靜(jing)置(zhi)24小(xiao)時後，絕大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)未(wei)存活，重發；

　　（4）凍存的(de)細(xi)胞(bao)復蘇後或存活的(de)細(xi)胞(bao)靜(jing)置(zhi)4小(xiao)時後並且未(wei)開封，出(chu)現(xian)汙染，重發；

　　（5）視具(ju)體(ti)情況(kuang)而(er)定(ding)。

　　五、細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，不(bu)予(yu)以(yi)重發的(de)情(qing)況(kuang)有哪些？

　　（1）客(ke)戶造(zao)成(cheng)細(xi)胞(bao)汙染，不(bu)重發；

　　（2）客(ke)戶不(bu)正確操作致(zhi)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不(bu)好，不(bu)重發；

　　（3）細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不(bu)好，未(wei)提供細(xi)胞(bao)培(pei)養前3天(tian)照(zhao)片(pian)的(de)，不(bu)重發；

　　（4）細(xi)胞(bao)培(pei)養時經其(qi)它(ta)處(chu)理的(de)，不(bu)重發；

　　（5）細(xi)胞(bao)收(shou)到2天(tian)內(nei)，未(wei)告(gao)知(zhi)，不(bu)重發；

　　（6）視具(ju)體(ti)情況(kuang)而(er)定(ding)。

　　六、售(shou)後服(fu)務政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部(bu)分(fen)產品現貨(huo)，超(chao)低(di)比(bi)價(jia)，另(ling)常(chang)備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備(bei)現貨 ；貨期(qi)短，價(jia)格優(you)，售(shou)後齊全。

　　細(xi)胞(bao)汙染問(wen)題(ti)，請(qing)在(zai)收(shou)到產品48小(xiao)時內，給(gei)我(wo)們(men)提(ti)出真(zhen)實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)；細(xi)胞(bao)活性問(wen)題(ti)，請(qing)在(zai)收(shou)到產品7天(tian)內(nei)給(gei)我(wo)們(men)提(ti)出真(zhen)實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)，我(wo)們(men)調(tiao)查核實(shi)後予(yu)免費(fei)調換，不(bu)收(shou)取任(ren)何費(fei)用。

　　需要客(ke)戶提(ti)供SV40轉(zhuan)染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養說(shuo)明、細(xi)胞(bao)操作處(chu)理(li)方法(fa)、細(xi)胞(bao)質(zhi)量(liang)問題(ti)反(fan)饋表。

　　如用(yong)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)8-30天(tian)之(zhi)內(nei)，因處(chu)理(li)不(bu)當造(zao)成(cheng)細(xi)胞(bao)死亡或汙染，我(wo)公(gong)司(si)將(jiang)優(you)惠價(jia)重新(xin)提(ti)供壹(yi)株(zhu)原(yuan)細(xi)胞(bao)

　　SV40轉染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售(shou)後有保障(zhang)

　　★我(wo)庫(ku)細(xi)胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於美(mei)國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都是(shi)經過嚴格質量(liang)控制(zhi)。

　　凍存細(xi)胞(bao)時間為5-7個工(gong)作日(ri)，活細(xi)胞(bao)為7-15個工(gong)作日(ri)。

　　★由於細(xi)胞(bao)庫(ku)現(xian)有細(xi)胞(bao)類目多(duo)，為了不(bu)出現混亂錯誤，需要了(le)解(jie)SV40轉染(ran)人(ren)成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)相關細(xi)胞(bao)價(jia)格及(ji)詳細(xi)資料請(qing)老(lao)師(shi)，對您造(zao)成(cheng)的(de)不(bu)便還請(qing)見(jian)諒(liang)！

（編(bian)輯：tanxi）