人胃(wei)動(dong)素試劑(ji)盒(he)
人胃(wei)動(dong)素試劑(ji)盒(he),是(shi)專(zhuan)門用於精確測(ce)定人體(ti)樣(yang)本中(zhong)胃(wei)動(dong)素含量(liang)的(de)專(zhuan)業(ye)工具,在(zai)胃(wei)腸功能(neng)研究(jiu)、消(xiao)化(hua)系統(tong)疾(ji)病診斷(duan)及治療監測等(deng)方面意(yi)義重大。
胃(wei)動(dong)素是(shi)由(you)胃(wei)腸道黏(nian)膜(mo)中(zhong)的(de) Mo 細(xi)胞(bao)分(fen)泌的(de)壹種肽類激(ji)素,主要(yao)在十(shi)二(er)指(zhi)腸和近(jin)端空腸產(chan)生。它(ta)在調節(jie)胃(wei)腸運(yun)動(dong)方面發(fa)揮著(zhe)核心(xin)作(zuo)用。在消(xiao)化(hua)間(jian)期,胃(wei)動(dong)素呈周期性釋放,其(qi)濃(nong)度(du)的(de)規律性波動(dong)可觸(chu)發(fa)消(xiao)化(hua)間(jian)期移(yi)行(xing)性(xing)復(fu)合(he)運(yun)動(dong)(MMC)。MMC 能清掃胃(wei)腸道內的(de)食物(wu)殘(can)渣(zha)、細(xi)菌(jun)及(ji)其(qi)他(ta)異(yi)物(wu),維(wei)持(chi)胃(wei)腸道的(de)清潔(jie)狀態,防(fang)止細(xi)菌(jun)過(guo)度(du)生(sheng)長(chang)和胃(wei)腸道淤滯。當人體(ti)進食(shi)後(hou),胃(wei)動(dong)素的(de)分泌模(mo)式(shi)會發生改變(bian),參(can)與(yu)調節(jie)進食(shi)後(hou)的(de)胃(wei)腸蠕動(dong)、胃(wei)排(pai)空以及(ji)小(xiao)腸的(de)分節(jie)運(yun)動(dong)等(deng)過(guo)程(cheng),促進食(shi)物(wu)在(zai)胃(wei)腸道內的(de)推進和(he)消(xiao)化(hua)吸(xi)收(shou)。此(ci)外,胃(wei)動(dong)素還與(yu)壹些胃(wei)腸疾(ji)病的(de)發生發(fa)展(zhan)密切(qie)相關(guan)。例(li)如,在(zai)功能性消(xiao)化(hua)不良(liang)、胃(wei)輕(qing)癱(tan)、腸易(yi)激(ji)綜(zong)合征等(deng)疾(ji)病中(zhong),患者(zhe)體(ti)內胃(wei)動(dong)素的(de)分泌水平和釋放節(jie)律常常出(chu)現(xian)異(yi)常,檢(jian)測(ce)胃(wei)動(dong)素含量(liang)有助(zhu)於了(le)解(jie)疾(ji)病的(de)病理生理機制(zhi),為臨床(chuang)診斷(duan)和治療提供(gong)依據(ju)。
該試劑(ji)盒(he)壹般采(cai)用酶(mei)聯(lian)免疫吸(xi)附(fu)試驗(ELISA)技(ji)術,基(ji)於雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心(xin)法(fa)原理。試劑(ji)盒(he)主(zhu)要(yao)組件包(bao)括已包(bao)被(bei)抗(kang)人胃(wei)動(dong)素抗體(ti)的(de)微孔板(ban),當(dang)加入(ru)經過(guo)處(chu)理的(de)待測樣(yang)本(如人體(ti)血清、血漿(jiang)等(deng))時(shi),樣(yang)本中(zhong)的(de)胃(wei)動(dong)素會與(yu)固相化(hua)在(zai)微孔(kong)板表面的(de)抗體(ti)特(te)異(yi)性結(jie)合。試劑(ji)盒(he)內配備(bei)了壹系列不同(tong)濃(nong)度(du)梯(ti)度(du)的(de)胃(wei)動(dong)素標準品(pin),用於構(gou)建(jian)標準曲線,通(tong)過與樣(yang)本檢(jian)測(ce)結(jie)果對比(bi),實現(xian)對樣(yang)本中(zhong)胃(wei)動(dong)素的(de)準確定(ding)量(liang)。還有酶(mei)標抗人胃(wei)動(dong)素抗體(ti),其(qi)能與已(yi)結合(he)在(zai)固相抗(kang)體(ti)上(shang)的(de)胃(wei)動(dong)素進壹步(bu)結合(he),形(xing)成 “固相抗(kang)體(ti) - 胃(wei)動(dong)素 - 酶(mei)標抗體(ti)" 的(de)夾心(xin)結(jie)構。顯(xian)色劑(ji)通(tong)常選(xuan)用四甲基(ji)聯(lian)苯胺(TMB),在酶(mei)標抗體(ti)中(zhong)酶(mei)的(de)催化作(zuo)用下,TMB 發生顯(xian)色反(fan)應,顏(yan)色的(de)深淺(qian)與樣(yang)本中(zhong)胃(wei)動(dong)素的(de)含量(liang)呈正相關(guan)。終(zhong)止液用於停(ting)止顯(xian)色反(fan)應,各(ge)類緩沖(chong)液(ye)則保(bao)證整個檢(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)在適宜的(de)環境下進行(xing)。
在(zai)實際檢(jian)測(ce)操作(zuo)時(shi),首先(xian)將標準品(pin)和(he)經(jing)過預(yu)處(chu)理的(de)待測樣(yang)本加入(ru)到(dao)包(bao)被(bei)有抗體(ti)的(de)微孔板(ban)中(zhong),在(zai)合(he)適的(de)溫度(du)(如 37℃)下(xia)孵育(yu)壹定(ding)時(shi)間(jian)(壹般為 30 分鐘至(zhi) 1 小(xiao)時(shi)),使抗(kang)原抗體(ti)充分(fen)結(jie)合。孵育(yu)結(jie)束後,用洗滌緩沖(chong)液(ye)對微(wei)孔(kong)板進行(xing)多(duo)次(ci)洗滌,去除未(wei)結合(he)的(de)物(wu)質,減(jian)少(shao)非特(te)異(yi)性反(fan)應。接著加入(ru)酶(mei)標抗體(ti),再次(ci)孵育(yu),讓(rang)其(qi)與已結(jie)合的(de)胃(wei)動(dong)素結合(he)。隨(sui)後(hou)進行(xing)新(xin)壹輪(lun)洗滌,確保(bao)未(wei)結合(he)的(de)酶(mei)標抗體(ti)被(bei)徹(che)di清除。之(zhi)後(hou)加入(ru)顯(xian)色劑(ji) TMB,在(zai)適宜條(tiao)件下(xia)反應(ying),當顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)達(da)到(dao)合(he)適程度(du)時(shi),加入(ru)終止液。最後(hou),使用酶(mei)標儀在(zai)特(te)定(ding)波(bo)長(chang)(壹般為 450nm)下測定各(ge)孔的(de)吸(xi)光(guang)度(du)(OD 值(zhi))。將樣(yang)本的(de) OD 值與預(yu)先(xian)繪制(zhi)好(hao)的(de)標準曲線進行(xing)對比(bi),即(ji)可精確計(ji)算出(chu)樣(yang)本中(zhong)胃(wei)動(dong)素的(de)濃(nong)度(du)。