人鳥(niao)氨(an)/酸脫羧(suo)酶試(shi)劑盒(he)
人鳥(niao)氨(an)/酸脫羧(suo)酶試(shi)劑盒(he),是用(yong)於精(jing)準測定人(ren)體樣本中鳥氨(an)/酸脫羧(suo)酶(ODC)含(han)量的(de)專業工(gong)具,在基(ji)礎醫學(xue)研(yan)究、疾(ji)病(bing)診(zhen)斷以及(ji)藥物研(yan)發(fa)等(deng)方(fang)面(mian)發(fa)揮著(zhe)重要作(zuo)用。
鳥(niao)氨(an)/酸脫羧(suo)酶是(shi)多胺(an)生物合(he)成途(tu)徑中的(de)關鍵限速酶,催(cui)化(hua)鳥(niao)氨(an)/酸脫羧(suo)生成腐胺(an),進而(er)參(can)與(yu)後續壹(yi)系列(lie)多胺(an)的(de)合(he)成。多(duo)胺(an)在細(xi)胞生長、增殖、分化(hua)以(yi)及(ji)雕亡等(deng)過程中扮演(yan)著(zhe)不可(ke)huo缺的(de)角色(se),對維持細(xi)胞的(de)正(zheng)常生(sheng)理(li)功能(neng)至關重要。在(zai)正(zheng)常人(ren)體細(xi)胞中,ODC 的(de)表(biao)達(da)和活(huo)性(xing)受到(dao)嚴(yan)格調(tiao)控(kong),維持在相對穩定(ding)的(de)水平(ping)。然而(er),當人體(ti)發(fa)生某(mou)些(xie)疾(ji)病(bing),如(ru)腫(zhong)瘤(liu)、炎(yan)癥(zheng)性(xing)疾病(bing)時,細(xi)胞的(de)代謝和增殖狀(zhuang)態(tai)發(fa)生改變(bian),ODC 的(de)活(huo)性(xing)和表(biao)達(da)水平(ping)往(wang)往(wang)會(hui)顯著(zhu)升(sheng)高(gao)。例(li)如(ru),在(zai)腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞中,由於其(qi)快(kuai)速增殖的(de)特(te)性(xing),對多胺(an)的(de)需(xu)求大(da)幅(fu)增加(jia),進(jin)而(er)刺(ci)激 ODC 大量表(biao)達(da),使得 ODC 活(huo)性(xing)明顯(xian)高(gao)於正(zheng)常組織(zhi)細(xi)胞。因此(ci),檢測(ce)人(ren)體(ti)樣本中 ODC 的(de)含量,能(neng)夠(gou)為疾病(bing)的(de)早期(qi)診(zhen)斷(duan)、病(bing)情(qing)監(jian)測以(yi)及(ji)治(zhi)療效果評(ping)估(gu)提供(gong)重要依(yi)據(ju)。
該試(shi)劑盒(he)通(tong)常(chang)采(cai)用酶(mei)聯免(mian)疫吸附(fu)試(shi)驗(ELISA)技(ji)術,基(ji)於雙(shuang)抗體夾(jia)心(xin)法原理(li)設(she)計(ji)。試(shi)劑盒(he)主(zhu)要包(bao)含(han)已包(bao)被抗人(ren) ODC 抗體的(de)微孔板(ban),當加(jia)入(ru)經過適當處理(li)的(de)待測樣本(如(ru)人(ren)體(ti)組織(zhi)勻(yun)漿、細(xi)胞裂解(jie)液、血清(qing)、血漿等(deng))時(shi),樣本中的(de) ODC 會(hui)與固(gu)相(xiang)化(hua)在(zai)微孔板(ban)表(biao)面的(de)抗體特(te)異(yi)性(xing)結合(he)。試(shi)劑盒(he)內配備了(le)壹(yi)系列(lie)不同(tong)濃(nong)度(du)梯度(du)的(de) ODC 標準品(pin),用於(yu)構(gou)建標準曲線,通(tong)過與樣本檢(jian)測(ce)結(jie)果對比,實現對樣本中 ODC 的(de)準確(que)定量(liang)。此(ci)外,含(han)有(you)酶(mei)標抗人 ODC 抗(kang)體,其(qi)能(neng)與已結(jie)合(he)在(zai)固相抗(kang)體(ti)上的(de) ODC 進壹(yi)步結(jie)合(he),形(xing)成 “固(gu)相抗體(ti) - ODC - 酶(mei)標(biao)抗體" 的(de)夾(jia)心(xin)結構(gou)。顯(xian)色(se)劑壹(yi)般選用四甲基(ji)聯苯胺(an)(TMB),在酶(mei)標(biao)抗(kang)體中酶的(de)催(cui)化(hua)作(zuo)用下(xia),TMB 發(fa)生顯(xian)色(se)反應(ying),顏色(se)的(de)深(shen)淺與樣本中 ODC 的(de)含量呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。終(zhong)止(zhi)液用於(yu)停(ting)止顯(xian)色(se)反應(ying),各(ge)類緩(huan)沖(chong)液則保(bao)證整個檢(jian)測(ce)過程在適宜的(de)環(huan)境(jing)下(xia)進(jin)行(xing)。
在實(shi)際(ji)檢(jian)測操(cao)作(zuo)過程中,首(shou)先將標(biao)準品(pin)和經過預處理(li)的(de)待測樣本加(jia)入(ru)到包(bao)被有(you)抗體的(de)微孔板(ban)中,在合(he)適(shi)的(de)溫(wen)度(du)(如(ru) 37℃)下(xia)孵(fu)育(yu)壹(yi)定時間(壹(yi)般為 30 分鐘至 1 小時),使(shi)抗(kang)原抗體充(chong)分結(jie)合(he)。孵(fu)育結束(shu)後,用(yong)洗(xi)滌(di)緩(huan)沖(chong)液對微孔(kong)板(ban)進(jin)行(xing)多次(ci)洗滌,去除(chu)未結合(he)的(de)物質,減(jian)少(shao)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)反應(ying)。接(jie)著(zhe)加(jia)入(ru)酶標(biao)抗體(ti),再次(ci)孵育,讓(rang)其(qi)與已結(jie)合(he)的(de) ODC 結合(he)。隨後(hou)進(jin)行(xing)新壹(yi)輪洗滌(di),確(que)保(bao)未結合(he)的(de)酶標抗體被徹(che)di清(qing)除(chu)。之後(hou)加(jia)入(ru)顯色(se)劑 TMB,在適宜條(tiao)件下(xia)反應(ying),當顏色(se)變(bian)化(hua)達(da)到合(he)適(shi)程度(du)時,加(jia)入(ru)終(zhong)止(zhi)液。最(zui)後,使(shi)用酶(mei)標儀(yi)在特(te)定波長(壹(yi)般為 450nm)下(xia)測(ce)定(ding)各(ge)孔(kong)的(de)吸光度(du)(OD 值(zhi))。將(jiang)樣本的(de) OD 值(zhi)與(yu)預(yu)先繪制(zhi)好(hao)的(de)標準曲線進(jin)行(xing)對比,即可精確(que)計(ji)算出(chu)樣本中 ODC 的(de)濃(nong)度(du)。
人 ODC 試(shi)劑盒(he)具有靈敏(min)度(du)高(gao)的(de)特(te)點(dian),能(neng)夠(gou)檢(jian)測出樣本中極微量的(de) ODC;特(te)異(yi)性(xing)強,可(ke)有效識(shi)別和(he)區(qu)分 ODC 與(yu)其(qi)他類似物質,降(jiang)低誤檢概率;重復性(xing)好(hao),不同(tong)批(pi)次(ci)檢測結果具有較(jiao)高(gao)的(de)壹(yi)致(zhi)性(xing)。在醫(yi)學(xue)研(yan)究領(ling)域(yu),科(ke)研(yan)人員(yuan)利(li)用(yong)該試(shi)劑盒(he)深(shen)入(ru)探(tan)究(jiu) ODC 在(zai)疾病發(fa)生發(fa)展(zhan)過程中的(de)作(zuo)用機制,為開發(fa)新的(de)治療靶點(dian)和藥物提供(gong)理(li)論依據(ju)。在臨床(chuang)診斷中,醫生可通(tong)過檢測患者(zhe)相關(guan)樣本中的(de) ODC 含量,輔助診斷腫瘤(liu)、炎(yan)癥(zheng)性(xing)疾病(bing)等(deng),結(jie)合(he)其(qi)他臨床(chuang)癥狀(zhuang)和檢查(zha)結(jie)果,為患者(zhe)制定(ding)更精準的(de)治療方案(an)。同(tong)時,在(zai)藥物研(yan)發(fa)過程中,該試(shi)劑盒(he)可用(yong)於評(ping)估藥物對 ODC 活(huo)性(xing)和表(biao)達(da)的(de)影響(xiang),監(jian)測藥物的(de)療效和(he)安(an)全性(xing)。