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膠(jiao)原(yuan)蛋白種(zhong)類(lei)繁(fan)多(duo)、結(jie)構(gou)相似(si),其(qi)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒的(de)特(te)異(yi)性是(shi)決(jue)定(ding)數(shu)據(ju)準(zhun)確(que)性的核心(xin)。提升(sheng)特異性需從抗(kang)體(ti)設(she)計、樣(yang)本(ben)處理、檢(jian)測(ce)策略三(san)個層面(mian)進(jin)行(xing)系統(tong)性技術(shu)優(you)化(hua)。壹(yi)、核心(xin):抗體(ti)與(yu)探針的高精(jing)度(du)設(she)計這是(shi)提(ti)升(sheng)特(te)異(yi)性的根本(ben)。關鍵(jian)在(zai)於(yu)針對不同(tong)膠(jiao)原(yuan)類(lei)型(xing)的(de)氨基(ji)酸序(xu)列(如(ru)α鏈(lian)的端肽(tai)區(qu))設(she)計高親和(he)力(li)、低(di)交叉(cha)反(fan)應(ying)的(de)抗體。表(biao)位(wei)精(jing)準(zhun)選(xuan)擇:避(bi)免(mian)針對高度(du)保(bao)守(shou)的(de)Gly-X-Y三(san)螺旋(xuan)區,而(er)選擇在(zai)端肽(tai)(Telopeptide)或(huo)三(san)螺旋(xuan)末端的種(zhong)屬(shu)或(huo)型(xing)別特(te)異(yi)性序(xu)列。例(li)如,檢(jian)測(ce)I型(xing)膠(jiao)原(yuan)C端肽(tai)(CTX-I)的(de)抗體,幾乎(hu)不與(yu)II或(huo)III型(xing)...
查看(kan)詳(xiang)情(qing)肺(fei)癌(ai)是(shi)全(quan)球發病率和(he)死亡率最高的(de)癌(ai)癥(zheng)之壹(yi),主(zhu)要分為(wei)非小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌(ai)(NSCLC)和(he)小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌(ai)(SCLC)兩(liang)大類(lei)。盡管肺(fei)癌(ai)的治(zhi)療已(yi)有(you)壹(yi)定(ding)進(jin)展(zhan),但(dan)由(you)於(yu)其(qi)復(fu)雜的分子機制(zhi)、早期無(wu)明顯癥(zheng)狀(zhuang)及易發生轉(zhuan)移(yi)的特性,使得(de)肺(fei)癌(ai)的早期診(zhen)斷(duan)和(he)有(you)效治療依(yi)然(ran)面(mian)臨(lin)巨大挑戰(zhan)。深入理解人(ren)肺(fei)癌(ai)細胞(bao)的分子機制(zhi),對提(ti)高肺(fei)癌(ai)治療效果具有(you)重(zhong)要(yao)意(yi)義。壹、人(ren)肺(fei)癌(ai)細胞(bao)的分子機制(zhi)1、基(ji)因(yin)突(tu)變(bian)與(yu)驅動基(ji)因(yin)的(de)變(bian)化肺(fei)癌(ai)的發(fa)生與(yu)多(duo)種(zhong)基(ji)因(yin)突(tu)變(bian)密切相關,尤其是(shi)EGFR(表(biao)皮生(sheng)長(chang)因子受(shou)體(ti))、ALK(間變性淋巴瘤激(ji)酶)、ROS1等(deng)驅動基(ji)因(yin)的(de)突(tu)變是(shi)非(fei)小(xiao)...
查看(kan)詳(xiang)情(qing)大鼠(shu)成(cheng)肌細胞(bao)是(shi)研(yan)究(jiu)肌肉(rou)發(fa)育(yu)、再生及疾病的(de)重要(yao)工具,其(qi)選(xuan)擇與(yu)應(ying)用需結(jie)合實(shi)驗(yan)目標與(yu)細(xi)胞(bao)特(te)性綜合考(kao)量。以(yi)下(xia)從細(xi)胞(bao)系選擇、培(pei)養(yang)技術(shu)及研究應用三(san)方面(mian)展(zhan)開(kai)說明。壹、細(xi)胞系選擇:L6細(xi)胞(bao)系的優(you)勢L6細(xi)胞系源自大鼠(shu)骨骼肌,因其(qi)易(yi)於培(pei)養(yang)、遺(yi)傳(chuan)操作簡便,成(cheng)為(wei)肌肉(rou)研(yan)究(jiu)領域(yu)的(de)經(jing)典模(mo)型(xing)。該(gai)細胞系具有(you)以(yi)下(xia)特點:分化能力(li):在(zai)低血(xue)清條件(jian)下(xia)可自發分化為(wei)多(duo)核肌管,模(mo)擬(ni)肌肉(rou)發(fa)育(yu)過(guo)程,適(shi)用於研(yan)究肌纖維(wei)形成(cheng)機(ji)制(zhi)。代謝(xie)特(te)性:高表(biao)達(da)GLUT4葡(pu)萄(tao)糖轉(zhuan)運(yun)蛋白,常用於胰島(dao)素(su)敏(min)感(gan)性及糖尿病相關研究。遺(yi)傳(chuan)穩(wen)定性:低代次(ci)冷凍保存並(bing)...
查看(kan)詳(xiang)情(qing)肝癌(ai)是(shi)全(quan)球範(fan)圍(wei)內(nei)最常見的惡(e)性腫瘤之壹(yi),尤其在(zai)亞洲地區(qu),肝癌(ai)的發(fa)生率較高。盡(jin)管近(jin)年來(lai)肝癌(ai)治療手(shou)段取(qu)得(de)了(le)壹(yi)定進展(zhan),但(dan)由(you)於(yu)其(qi)高度(du)的(de)抗藥(yao)性和(he)腫瘤的異質(zhi)性,肝癌(ai)的治(zhi)療效果仍(reng)然(ran)不理想(xiang)。人(ren)肝癌(ai)細胞(bao)的抗藥性機制(zhi)復雜(za)且多(duo)樣(yang),直(zhi)接(jie)影響(xiang)了(le)臨(lin)床(chuang)治療效果和(he)預後(hou)。因此,深入了(le)解(jie)其抗藥性機制(zhi),並(bing)探討其對(dui)治療的影(ying)響(xiang),已(yi)成(cheng)為(wei)肝癌(ai)研究(jiu)的壹個重要方向(xiang)。壹、人(ren)肝癌(ai)細胞(bao)的抗藥性機制(zhi)1、藥物外排泵(beng)的(de)過(guo)度表(biao)達(da)藥(yao)物外排泵(beng)是(shi)細(xi)胞(bao)膜(mo)上(shang)的(de)壹種(zhong)重(zhong)要(yao)跨膜(mo)運(yun)輸(shu)蛋白,能夠將藥(yao)物從細(xi)胞(bao)內排出(chu),導致藥物在細胞內的(de)濃度下(xia)降,進而(er)降低藥物的療效...
查看(kan)詳(xiang)情(qing)壹(yi)、關(guan)鍵步驟組織取(qu)材與(yu)處理取(qu)材(cai)於胃(wei)組織肌層,需(xu)剝(bo)離黏膜、外(wai)膜(mo)及結(jie)締(di)組織,保(bao)留中層環形肌。用含(han)雙抗(kang)的PBS清(qing)洗(xi)3次(ci),去(qu)除血(xue)汙及雜質。若(ruo)懷疑汙染,可(ke)置(zhi)於(yu)含(han)青鏈(lian)黴(mei)素的(de)混合液(ye)中(zhong)浸泡30~60分鐘。組織塊剪切(qie)與(yu)消(xiao)化(hua)將組織剪(jian)成(cheng)1mm³小(xiao)塊,采用兩(liang)步消化法(fa):先加0.2%膠(jiao)原(yuan)酶-Ⅱ於(yu)37℃消(xiao)化(hua)1小(xiao)時(shi),待(dai)組織呈絮(xu)狀(zhuang)後(hou),再加0.25%胰蛋(dan)白酶消化(hua)15~30分鐘,期間每隔10分鐘搖動壹次(ci)。消(xiao)化(hua)後(hou)通過(guo)200目濾網過(guo)濾,收集(ji)濾液(ye)。細(xi)胞接(jie)種(zhong)與(yu)培(pei)養(yang)濾液(ye)1000rpm離心(xin)5分鐘,棄上清(qing),用含(han)15%FBS的D...
查看(kan)詳(xiang)情(qing)C6/36蚊(wen)子細胞(bao)是(shi)病(bing)毒(du)學研(yan)究(jiu)中常用的昆(kun)蟲細胞(bao)系之壹(yi),特(te)別是(shi)在(zai)研(yan)究(jiu)蚊(wen)媒病(bing)毒方面(mian)有(you)著(zhe)廣泛(fan)應用。由(you)於(yu)其(qi)對(dui)多(duo)種(zhong)蚊(wen)媒病(bing)毒的高效感(gan)受(shou)性、易於(yu)培(pei)養(yang)和(he)穩(wen)定的特(te)性,成(cheng)為(wei)了(le)病(bing)毒學實(shi)驗(yan)室中的重要工具。以(yi)下(xia)是(shi)C6/36蚊(wen)子細胞(bao)在病(bing)毒(du)學研(yan)究(jiu)中的主要應用。壹、病(bing)毒培(pei)養(yang)與(yu)病(bing)毒(du)學研(yan)究(jiu)被(bei)廣泛(fan)用於蚊(wen)媒病(bing)毒的培(pei)養(yang)與(yu)擴(kuo)增(zeng),尤其是(shi)那(na)些(xie)需(xu)要蚊(wen)子細胞(bao)作為(wei)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)病(bing)毒(du)。與(yu)哺(bu)乳動(dong)物細胞系不同(tong),它對蚊(wen)媒病(bing)毒有(you)更(geng)高的(de)敏(min)感(gan)性,因此(ci),它們(men)常(chang)用於研(yan)究病毒在(zai)蚊(wen)子體內(nei)的復(fu)制(zhi)機(ji)制、感(gan)染途(tu)徑和(he)病毒(du)的傳(chuan)播方式。例如(ru),廣泛(fan)用於登革熱(re)病毒(DEN...
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