CHO-K1-S2-HSA中(zhong)國倉鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細(xi)胞系(xi)，上(shang)皮(pi)樣(yang)，貼(tie)壁(bi)生(sheng)長(chang)，穩(wen)定表達 S2-HSA 融(rong)合蛋(dan)白，適(shi)用於該(gai)蛋(dan)白功能研究、相(xiang)關(guan)通(tong)路(lu)分析及(ji)生(sheng)物(wu)制藥領(ling)域(yu)的(de)應(ying)用。

來(lai)源與(yu)構(gou)建(jian)：該(gai)細(xi)胞系(xi)源自 CHO-K1 細胞（CHO 細(xi)胞(bao)的(de)經典(dian)亞(ya)株(zhu)），通(tong)過(guo)載體(ti)介(jie)導（如(ru)含(han) EF1α 啟(qi)動子的(de)表達質粒）將 S2-HSA 融(rong)合基(ji)因(yin)導(dao)入細胞(bao)，經嘌呤(ling)黴素(su)抗(kang)性篩選及(ji)單克隆(long)純化獲得(de)穩定株(zhu)。“S2-HSA" 代(dai)表其(qi)表達的融(rong)合蛋(dan)白（S2 片(pian)段(duan)與(yu)人類血清白(bai)蛋(dan)白的(de)融(rong)合產(chan)物(wu)），明確標識(shi)其(qi)功能特性，確保蛋(dan)白表達的均壹性與(yu)持(chi)續(xu)性。

形態(tai)與(yu)增殖(zhi)：體外培養呈典(dian)型(xing)上(shang)皮(pi)樣(yang)形態(tai)，貼壁(bi)生(sheng)長(chang)，細(xi)胞呈多(duo)邊(bian)形，排列緊(jin)密，形態(tai)與(yu)親(qin)本 CHO-K1 細(xi)胞(bao)壹致。在(zai) 37℃、5% CO₂條件(jian)下，增殖(zhi)穩定，傳(chuan)代(dai)周期(qi)約(yue) 24-30 小時(shi)，可適應(ying)含(han) 10% 胎(tai)牛血(xue)清(qing)的(de) F12K 培養基，兼容無血清(qing)培養體系(xi)，傳代(dai) 50 次(ci)以(yi)上(shang)仍(reng)能維(wei)持(chi)穩(wen)定形態(tai)與(yu)活性，貼壁(bi)能力(li)強(qiang)，為大規模培養提供便(bian)利。

表達特征(zheng)：S2-HSA 融(rong)合蛋(dan)白主(zhu)要(yao)分泌(mi)至細胞外培(pei)養基中，表達量(liang)可達 10-15μg/10⁶細(xi)胞 / 24 小(xiao)時(shi)（通(tong)過(guo) ELISA 檢測(ce)），長(chang)期(qi)傳代(dai)（＞40 代(dai)）後表達量(liang)波動＜10%。該(gai)融(rong)合蛋(dan)白保留 S2 片段(duan)的(de)生(sheng)物(wu)學(xue)活性與(yu) HSA 的(de)半(ban)衰(shuai)期(qi)延長(chang)特性，能與(yu)特異性抗(kang)體結(jie)合，且(qie)翻(fan)譯後修(xiu)飾（如(ru)糖基化）與(yu)天然蛋(dan)白壹(yi)致，為功能研究與(yu)應(ying)用開發奠(dian)定基(ji)礎(chu)。

優勢：S2-HSA 融(rong)合蛋(dan)白表達穩定，分(fen)泌效(xiao)率(lv)高(gao)，便(bian)於純化；遺(yi)傳背(bei)景(jing)清(qing)晰，與(yu) CHO-K1 細(xi)胞(bao)同源性高，實(shi)驗重(zhong)復性好；兼容貼(tie)壁(bi)與(yu)懸(xuan)浮(fu)培養，可規模化生(sheng)產(chan)，滿(man)足(zu)工(gong)業化需(xu)求(qiu)；蛋(dan)白翻(fan)譯後修(xiu)飾接(jie)近天然狀態(tai)，生(sheng)物(wu)活性保留完整(zheng)，適合(he)臨(lin)床(chuang)前研究。

局限(xian)性：長(chang)期(qi)培養需(xu)維(wei)持(chi)抗(kang)性篩選壓(ya)力(li)，增加培(pei)養成本；融(rong)合蛋(dan)白的(de)糖基化模式與(yu)人類細胞存(cun)在(zai)細微(wei)差異(yi)，可能影響(xiang)部(bu)分功能研究的(de)外(wai)推性；對培(pei)養基中血清(qing)成分(fen)敏(min)感，無血清(qing)適應(ying)需(xu) 6-8 周的(de)馴化周期(qi)。

培(pei)養條件：基礎(chu)培養基為含(han) 10% 胎(tai)牛血(xue)清(qing)的(de) F12K 培養基，添(tian)加嘌呤(ling)黴素(su)（2μg/mL）維(wei)持(chi)抗(kang)性篩選，同時(shi)加(jia)入(ru)谷(gu)an酰(xian)胺與(yu)非(fei)必(bi)需(xu)氨(an)基(ji)酸(suan)促進(jin)增殖(zhi)。傳代(dai)時(shi)控(kong)制融(rong)合度(du)在(zai) 60%-70%，用 EDTA - yi酶溫和(he)消化，避免過(guo)度處理影響(xiang)細(xi)胞活性。懸(xuan)浮(fu)培養可采用無血清(qing)培養基，逐步(bu)降(jiang)低血(xue)清濃度至 0.5%，最終(zhong)細(xi)胞(bao)密度(du)可達 3×10⁶個(ge) /mL。

蛋(dan)白純化與(yu)檢(jian)測(ce)：收集(ji)培(pei)養上(shang)清(qing)後，通(tong)過(guo) Protein A 親和(he)層析純化 S2-HSA 融(rong)合蛋(dan)白，純度(du)可達 95% 以(yi)上(shang)；通(tong)過(guo) Western blot 驗證(zheng)蛋(dan)白分(fen)子量(liang)，ELISA 檢測(ce)濃(nong)度，確保蛋(dan)白質量(liang)。凍(dong)存時(shi)使(shi)用含(han) 10% DMSO 的(de)wan全(quan)培養基，液(ye)氮(dan)保存，復蘇(su)後傳(chuan)代(dai) 2 次(ci)待狀態(tai)穩定後(hou)再用於實驗(yan)，保證結果(guo)可靠性。