CHO-HRH1中國(guo)倉(cang)鼠(shu)卵巢細(xi)胞(bao)系(xi)，上(shang)皮(pi)樣，貼(tie)壁生(sheng)長，穩(wen)定(ding)表達(da)組(zu)胺 H1 受體(ti)，可介(jie)導(dao)組(zu)胺信(xin)號(hao)通路(lu)，適(shi)用於(yu)過(guo)敏(min)機制研究(jiu)、抗(kang)組(zu)胺藥(yao)物(wu)篩選及受體(ti)功能(neng)解析，應(ying)用價值(zhi)顯著。

來(lai)源與(yu)構(gou)建(jian)：該細(xi)胞(bao)系(xi)以(yi) CHO-K1 細(xi)胞(bao)為親本(ben)，通過(guo)慢(man)病(bing)毒(du)載(zai)體(ti)介(jie)導(dao)將人(ren) HRH1 基(ji)因導(dao)入(ru)細(xi)胞(bao)基因組(zu)，經(jing)嘌(piao)呤(ling)黴素抗(kang)性篩選及單克隆(long)純(chun)化(hua)獲(huo)得(de)穩定(ding)株(zhu)，“HRH1" 明(ming)確(que)標(biao)識(shi)其(qi)表達(da)的(de)靶受體(ti)，與(yu)普(pu)通 CHO 細(xi)胞(bao)形(xing)成(cheng)功能(neng)區分(fen)。構(gou)建(jian)過(guo)程中采用 CMV 啟動(dong)子(zi)驅(qu)動(dong)表達(da)，結(jie)合信(xin)號(hao)肽優(you)化(hua)序(xu)列，使 90% 以(yi)上(shang)的(de) HRH1 定位(wei)於(yu)細(xi)胞(bao)膜，確(que)保(bao)受體(ti)與(yu)配(pei)體的(de)高(gao)效結(jie)合。

形(xing)態(tai)與(yu)增殖(zhi)：體外(wai)培(pei)養(yang)呈(cheng)典型上(shang)皮(pi)樣形(xing)態(tai)，貼(tie)壁生(sheng)長，細(xi)胞(bao)呈多(duo)邊形(xing)，排(pai)列規則，邊界(jie)清晰(xi)，核質(zhi)比(bi)正常，形(xing)態(tai)與(yu)親本(ben) CHO-K1 細(xi)胞(bao)壹致(zhi)。在 37℃、5% CO₂條件下，增殖(zhi)穩定，傳代(dai)周(zhou)期(qi)約(yue) 24-30 小時(shi)，可適(shi)應(ying)含(han) 10% 胎(tai)牛(niu)血(xue)清的(de) F12K 培養(yang)基(ji)，傳代(dai) 60 次(ci)以(yi)上(shang)仍能(neng)維(wei)持 HRH1 高(gao)表達(da)（表達(da)量(liang)為親本(ben)細(xi)胞(bao)的(de) 25-35 倍），受體(ti)活(huo)性無(wu)明顯衰減(jian)，顯著優(you)於(yu)瞬(shun)時轉(zhuan)染系(xi)統。

表達(da)特(te)征(zheng)：HRH1 為 G 蛋白(bai)偶(ou)聯(lian)受體(ti)（GPCR），膜(mo)表達(da)量(liang)達(da)（1.5-2.0）×10⁵分(fen)子(zi) / 細(xi)胞(bao)（流式(shi)細(xi)胞(bao)術檢(jian)測），對(dui)組(zu)胺的(de)親和力高(gao)（解離常數(shu) Kd≈2×10⁻⁹ M）。激活後(hou)可快速啟動(dong)下遊(you)信(xin)號(hao)通路(lu)：通過(guo) Gq 蛋白(bai)介(jie)導(dao)磷脂(zhi)酶 C（PLC）激活，使胞(bao)內 IP3 水平(ping)升高(gao)，觸發鈣(gai)離子(zi)釋放(fang)（組(zu)胺刺(ci)激後胞(bao)內鈣(gai)濃度峰(feng)值(zhi)提(ti)升 3-5 倍），同時(shi)激活 MAPK/ERK 通路(lu)，功能(neng)活性(xing)接(jie)近(jin)人(ren)源組(zu)織中的(de)天(tian)然(ran)受體(ti)。

優(you)勢(shi)：HRH1 表達(da)穩(wen)定(ding)，長(chang)期(qi)傳代(dai)後(hou)功能(neng)活性(xing)波動(dong)＜10%，實(shi)驗重(zhong)復性優(you)於(yu)原代(dai)肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)；遺傳背(bei)景清晰(xi)，與(yu) CHO-K1 細(xi)胞(bao)同源性(xing)高(gao)，便於(yu)通過(guo)親本(ben)對(dui)照(zhao)排(pai)除(chu)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)效(xiao)應(ying)；受體(ti)信(xin)號(hao)通路(lu)完(wan)整(zheng)，可模(mo)擬體(ti)內組(zu)胺反應(ying)的(de)級聯(lian)過(guo)程，功能(neng)更接(jie)近(jin)生(sheng)理(li)狀(zhuang)態；培養條(tiao)件簡(jian)單，兼容貼(tie)壁與(yu)懸浮(fu)培(pei)養(yang)，適(shi)合高(gao)通量(liang)藥(yao)物(wu)篩選。

局(ju)限性(xing)：作(zuo)為卵巢來(lai)源細(xi)胞(bao)，缺乏(fa)肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)、內皮(pi)細(xi)胞(bao)等(deng) HRH1 主要表達(da)細(xi)胞(bao)的(de)微環(huan)境(jing)，部分組(zu)織特(te)異(yi)性(xing)調控(kong)機制（如細(xi)胞(bao)因子(zi)對(dui)受體(ti)的(de)調節）無(wu)法wan全模(mo)擬；倉(cang)鼠(shu)與人(ren)類(lei)的(de) G 蛋白(bai)亞(ya)型存在(zai)細(xi)微(wei)差異(yi)，可能(neng)導(dao)致(zhi)部分信(xin)號(hao)傳導(dao)效率(lv)與人(ren)體(ti)存在(zai)偏(pian)差，需結(jie)合人(ren)源細(xi)胞(bao)驗證(zheng)；高(gao)表達(da)受體(ti)可能(neng)導(dao)致(zhi)配(pei)體敏(min)感性過高(gao)，實(shi)驗需嚴格(ge)控(kong)制(zhi)組(zu)胺濃度。

培養(yang)條(tiao)件(jian)：常規使用含(han) 10% 胎(tai)牛(niu)血(xue)清的(de) F12K 培養(yang)基(ji)，添加(jia) 2μg/mL 嘌(piao)呤(ling)黴素維(wei)持抗(kang)性篩選，37℃、5% CO₂培(pei)養箱(xiang)中生長(chang)良(liang)好(hao)。傳代(dai)時(shi)控(kong)制(zhi)融(rong)合(he)度在(zai) 70%-80%，采(cai)用溫和方(fang)法分(fen)離細(xi)胞(bao)，避免機械損(sun)傷影(ying)響受體(ti)膜(mo)定位。進行(xing)功能(neng)實(shi)驗前(qian)，建(jian)議(yi)用無(wu)血清培(pei)養(yang)基饑(ji)餓(e)處(chu)理 16-24 小時(shi)，減少(shao)血(xue)清成(cheng)分(fen)對(dui) GPCR 信號(hao)的(de)幹擾(rao)。

質(zhi)控(kong)與(yu)安(an)全：定期(qi)通過(guo)流式(shi)細(xi)胞(bao)術檢(jian)測 HRH1 膜(mo)表達(da)量(liang)，Western blot 驗(yan)證(zheng)蛋(dan)白完(wan)整(zheng)性；STR 鑒(jian)定確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)純(chun)度，支(zhi)原體(ti)檢(jian)測需為陰性(xing)。凍(dong)存使用含(han) 10% DMSO 的(de)wan全培養(yang)基(ji)，液氮保存可維(wei)持活(huo)性(xing) 5 年(nian)以(yi)上(shang)，復蘇後(hou)傳代(dai) 2 次(ci)待(dai)狀(zhuang)態穩定後(hou)再(zai)用於(yu)實(shi)驗，保(bao)證結(jie)果(guo)可靠(kao)性(xing)。