Kit225IL-2依(yi)賴(lai)的人淋(lin)巴T細胞系(xi)
Kit225IL-2依(yi)賴(lai)的人淋(lin)巴T細胞系(xi)，是免疫(yi)學(xue)與細胞(bao)生物(wu)學(xue)研(yan)究(jiu)領(ling)域(yu)的重要(yao)工具(ju)，它源(yuan)自(zi)人體(ti)淋巴組織(zhi)，經(jing)分離培養與(yu)篩(shai)選(xuan)後(hou)，成為研(yan)究(jiu) T 細(xi)胞(bao)生物學(xue)行為、細(xi)胞因(yin)子功能(neng)及(ji)相(xiang)關疾病機(ji)制(zhi)的關鍵(jian)模(mo)型。在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)，Kit225 細(xi)胞(bao)呈典型的淋巴(ba)細胞(bao)形(xing)態(tai)，外(wai)觀圓潤(run)，體(ti)積(ji)較(jiao)小(xiao)，懸浮(fu)生(sheng)長(chang)於培養液(ye)中，常單(dan)個存(cun)在或(huo)呈小(xiao)聚集(ji)體(ti)。細(xi)胞(bao)胞(bao)質較(jiao)少，經(jing)染色後(hou)呈弱嗜(shi)堿(jian)性(xing)，胞(bao)質內細胞(bao)器相(xiang)對簡(jian)單(dan)，主(zhu)要(yao)以(yi)線粒(li)體(ti)和核(he)糖(tang)體為主(zhu)，滿(man)足細(xi)胞基本(ben)代謝(xie)需(xu)求；細胞(bao)核(he)大且圓，占(zhan)據(ju)細胞大部(bu)分體積，染色(se)質致(zhi)密(mi)，核(he)仁(ren)明顯，這些(xie)形(xing)態(tai)特征(zheng)與正常 T 淋巴(ba)細胞(bao)高(gao)度(du)相(xiang)似(si)，為研(yan)究(jiu) T 細(xi)胞(bao)生理病理(li)過程(cheng)提(ti)供(gong)了(le)良好的參照。
Kit225 細胞最(zui)xian著的生物(wu)學特(te)性(xing)在(zai)於對白細(xi)胞(bao)介(jie)素(su) - 2（IL-2）的絕(jue)對依賴(lai)性(xing)。IL-2 作(zuo)為壹(yi)種關(guan)鍵(jian)的細胞(bao)因子，在 T 細胞的增殖、分化(hua)和存(cun)活過程(cheng)中發揮(hui)著(zhe)核(he)心作(zuo)用。Kit225 細胞自(zi)身(shen)無法(fa)合(he)成足夠(gou)的 IL-2，必須(xu)依(yi)賴(lai)外(wai)源(yuan)性(xing)添加(jia)的 IL-2 才能(neng)維持正常生長(chang)與增殖。當培養液(ye)中缺(que)乏(fa) IL-2 時(shi)，Kit225 細(xi)胞會(hui)迅速進(jin)入(ru)生長(chang)停滯狀(zhuang)態(tai)，細胞(bao)活(huo)性(xing)降(jiang)低，逐(zhu)漸出(chu)現(xian)雕(diao)亡現(xian)象(xiang)；而(er)補(bu)充(chong)適宜濃(nong)度(du)的 IL-2 後(hou)，細胞內的 IL-2 受體(ti)（IL-2R）與 IL-2 特(te)異(yi)性(xing)結(jie)合(he)，激活 JAK-STAT5 等(deng)信號(hao)通路，促使細(xi)胞(bao)進(jin)入(ru)活躍(yue)的增殖周期(qi)，推動細(xi)胞(bao)從 G1 期(qi)向(xiang) S 期(qi)轉化(hua)，實(shi)現(xian)快(kuai)速(su)分裂(lie)。此(ci)外(wai)，Kit225 細胞具(ju)有穩(wen)定的 T 淋巴(ba)細胞(bao)表(biao)型，高(gao)表(biao)達 CD3、CD4 等(deng) T 細胞(bao)特異(yi)性(xing)標(biao)誌物(wu)，可(ke)用於研(yan)究(jiu) T 細(xi)胞(bao)發育、分化(hua)過程(cheng)中的信號(hao)傳(chuan)導機(ji)制(zhi)，以(yi)及(ji)探(tan)索 T 細胞在(zai)免疫應(ying)答(da)、自(zi)身(shen)免疫性(xing)疾(ji)病和腫瘤免疫(yi)中的作(zuo)用機制(zhi)。同(tong)時(shi)，該細胞(bao)系(xi)對某些(xie)免(mian)疫調節(jie)劑(ji)和細胞(bao)毒(du)性(xing)藥(yao)物較(jiao)為敏(min)感，這使其(qi)成為篩(shai)選(xuan)免yi治(zhi)療(liao)藥(yao)物和評估藥(yao)物毒(du)性(xing)的理想模(mo)型。
培養 Kit225 細(xi)胞(bao)時，需(xu)嚴格(ge)把控(kong) IL-2 的添加(jia)及(ji)培養條件。基礎培養基通常選(xuan)用含 10% 優質胎(tai)牛(niu)血清的 RPMI 1640 培養基，為細(xi)胞提(ti)供(gong)必(bi)要(yao)的營養(yang)物質(zhi)；在(zai)此(ci)基礎上，必(bi)須(xu)添加(jia)重(zhong)組人 IL-2，其(qi)添加(jia)濃(nong)度(du)壹(yi)般(ban)為 5 - 10 ng/mL，具(ju)體濃(nong)度(du)需(xu)根據(ju)細胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)進(jin)行優(you)化(hua)調整(zheng)。將(jiang)細胞(bao)置於 37℃、5% 二氧化(hua)碳的恒(heng)溫培養箱(xiang)中，維持細胞內酸堿(jian)平(ping)衡與酶活(huo)性(xing)。由(you)於 Kit225 細(xi)胞(bao)為懸浮(fu)生(sheng)長(chang)，當細胞(bao)密度(du)達(da)到 1×10⁶ - 2×10⁶個 /mL 時，需(xu)及(ji)時(shi)進(jin)行傳(chuan)代，傳(chuan)代方式為離心後(hou)更(geng)換(huan)新鮮培養液(ye)重懸細胞，傳(chuan)代比(bi)例根(gen)據(ju)細胞狀(zhuang)態(tai)控制(zhi)在(zai) 1:2 - 1:4。凍存(cun)時，采(cai)用 90% 胎(tai)牛(niu)血清、10% 二甲基亞(ya)碸及(ji)適量 IL-2 的混合(he)凍存(cun)液(ye)，遵循程序降溫原則(ze)，先於(yu) - 80℃冰箱(xiang)過夜(ye)，再(zai)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中長(chang)期(qi)保存(cun)，以(yi)確保(bao)細(xi)胞復(fu)蘇(su)後(hou)的活性(xing)和對 IL-2 的依賴(lai)性(xing)。
在(zai)科研(yan)應(ying)用領域，Kit225 細胞(bao)系(xi)發(fa)揮(hui)著(zhe)不可替(ti)代的作(zuo)用。在免疫學(xue)研(yan)究(jiu)中，科研(yan)人員(yuan)通過調控(kong) IL-2 的添加(jia)量，研(yan)究(jiu) T 細(xi)胞(bao)在不同 IL-2 濃(nong)度(du)下(xia)的增殖、分化(hua)及(ji)功(gong)能(neng)變化(hua)，深入(ru)揭示 IL-2 信號(hao)通路的調控(kong)機(ji)制(zhi)；利(li)用該細胞(bao)系(xi)篩(shai)選(xuan)新型免(mian)疫(yi)調節(jie)藥(yao)物，評估藥(yao)物對 T 細胞(bao)活(huo)性(xing)、功(gong)能(neng)的影(ying)響(xiang)，為免(mian)yi治療(liao)提(ti)供(gong)新的藥(yao)物靶(ba)點(dian)和策略(lve)。在疾(ji)病機(ji)制(zhi)研(yan)究(jiu)方(fang)面(mian)，Kit225 細胞可(ke)用於模(mo)擬(ni) T 細胞(bao)相關(guan)疾病，如自(zi)身(shen)免疫性(xing)疾(ji)病中 T 細胞(bao)異常活化(hua)的過程(cheng)，幫(bang)助(zhu)闡(chan)明疾病發(fa)生(sheng)發(fa)展(zhan)的分子機制(zhi)，為疾(ji)病的診斷(duan)和治療(liao)提(ti)供(gong)理(li)論依(yi)據(ju)。此(ci)外(wai)，在細胞(bao)生物(wu)學(xue)基礎研(yan)究(jiu)中，Kit225 細胞(bao)作(zuo)為典(dian)型的 IL-2 依賴(lai)細胞(bao)，也(ye)為研(yan)究(jiu)細(xi)胞(bao)對細胞(bao)因(yin)子的依賴(lai)性(xing)機(ji)制(zhi)、細(xi)胞(bao)信號(hao)傳(chuan)導通路等提(ti)供(gong)了(le)重(zhong)要的研(yan)究(jiu)對象，推動著(zhe)生(sheng)命科學領(ling)域(yu)不斷向(xiang)前發(fa)展(zhan)。
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