786-O [786-0]人(ren)腎(shen)透(tou)明細(xi)胞腺癌細(xi)胞系
786-O [786-0]人腎透(tou)明細(xi)胞腺癌細(xi)胞系是研(yan)究(jiu)腎透明細(xi)胞癌的(de)經(jing)典模型，以(yi) VHL 基(ji)因(yin)缺(que)失(shi)、缺(que)氧(yang)適應能(neng)力強(qiang)及典(dian)型(xing)的(de)透明細(xi)胞表(biao)型為(wei)核(he)心特(te)征(zheng)，在腎癌發(fa)生機(ji)制(zhi)、血管生成及(ji)靶(ba)向治療研究中(zhong)應用(yong)廣泛(fan)，為(wei)解(jie)析腎(shen)透(tou)明細(xi)胞癌的(de)du特(te)生物學特(te)性提供(gong)了(le)可(ke)靠(kao)實(shi)驗工具(ju)。
來源與背景(jing)：該細(xi)胞系於 1985 年(nian)從(cong) 58 歲(sui)男性患者(zhe)的腎(shen)透明細(xi)胞腺癌組(zu)織(zhi)中(zhong)分離(li)建(jian)立，屬(shu)於 VHL 基因(yin)缺(que)失(shi)型(xing)腎(shen)癌細(xi)胞系。與其(qi)他(ta)腎(shen)癌亞(ya)型(xing)細(xi)胞系相比，其(qi)源自(zi)典(dian)型(xing)的(de)腎(shen)透(tou)明細(xi)胞癌，更能(neng)反(fan)映該亞(ya)型(xing)（占(zhan)腎(shen)癌的(de) 70%-80%）的(de)生物學特(te)性，尤其(qi)適合研(yan)究 VHL 基(ji)因(yin)功能(neng)缺(que)失(shi)相(xiang)關(guan)的(de)癌變(bian)機制(zhi)。作為首(shou)ge被(bei)證(zheng)實存在 VHL 基因(yin)純(chun)合(he)缺(que)失(shi)的(de)腎(shen)癌細(xi)胞系，長期(qi)傳代(dai)後仍穩定(ding)保(bao)持該特(te)征(zheng)及(ji)透明細(xi)胞表(biao)型，填(tian)bu了(le) VHL 驅(qu)動(dong)型(xing)腎(shen)癌研(yan)究(jiu)模型的(de)空(kong)白(bai)，至今(jin)仍是腎(shen)癌靶(ba)向藥(yao)物研發(fa)的重(zhong)要參照。
細(xi)胞特(te)性：形態(tai)上(shang)呈(cheng)現典型的(de)透明細(xi)胞特(te)征(zheng)，貼(tie)壁(bi)生長(chang)且(qie)排(pai)列緊密，細(xi)胞呈多邊(bian)形，細(xi)胞質(zhi)豐(feng)富(fu)且(qie)透明，富(fu)含脂質(zhi)和糖原(yuan)顆(ke)粒(li)，細(xi)胞核(he)小(xiao)而(er)圓(yuan)，核(he)仁(ren)不明顯，核(he)質(zhi)比約(yue) 1:2，具(ju)有腎(shen)透明細(xi)胞癌的(de)典(dian)型形(xing)態。核(he)心特(te)性體現為VHL 基因(yin)缺(que)失(shi)，攜帶(dai) VHL 基因(yin)純(chun)合(he)缺(que)失(shi)，導(dao)致 HIF-1α、HIF-2α 等缺(que)氧(yang)誘(you)導(dao)因(yin)子持續(xu)穩定(ding)表(biao)達，該特(te)征(zheng)與約(yue) 60% 的(de)腎(shen)透(tou)明細(xi)胞癌患(huan)者(zhe)壹致，是研(yan)究(jiu)缺(que)氧(yang)信(xin)號(hao)通(tong)路異常(chang)激(ji)活(huo)的(de)理(li)想模型；強(qiang)血管生成能(neng)力，分泌(mi)的 VEGF 水(shui)平(ping)是正(zheng)常(chang)腎(shen)上(shang)皮(pi)細(xi)胞的 10-15 倍，裸鼠(shu)皮(pi)下(xia)接種(zhong)後腫(zhong)瘤組(zu)織(zhi)內(nei)血管密度顯著(zhu)高於其(qi)他(ta)腎(shen)癌模型，體(ti)現了(le)腎(shen)透明細(xi)胞癌富(fu)血管的典型(xing)特(te)征(zheng)；增(zeng)殖(zhi)與侵(qin)襲(xi)能(neng)力，體外培養(yang)倍(bei)增(zeng)時間約(yue) 36-48 小(xiao)時(shi)，克(ke)隆(long)形(xing)成率約(yue) 50%，裸(luo)鼠(shu)皮(pi)下(xia)接種(zhong)成瘤率 100%，Transwell 實(shi)驗中(zhong)穿(chuan)透基(ji)質(zhi)膜(mo)的(de)細(xi)胞數(shu)雖低於高侵(qin)襲(xi)性腫瘤細(xi)胞系，但(dan)仍顯著(zhu)高於正(zheng)常(chang)腎(shen)細(xi)胞。傳代時采(cai)用(yong)常(chang)規(gui)消化液處理，因(yin)貼(tie)壁(bi)中(zhong)等，需(xu)消化 2-4 分鐘(zhong)，傳代(dai)比例(li) 1:3-1:5，連(lian)續(xu)傳(chuan)代(dai) 50 次(ci)後仍保(bao)持 VHL 缺(que)失(shi)及(ji)透(tou)明細(xi)胞表(biao)型。
培養(yang)條件：適宜采(cai)用含 10% 胎牛血清(qing)的(de) RPMI-1640 培養(yang)基(ji)，添(tian)加(jia) 1% 抗(kang)菌混合(he)液以(yi)維持(chi)細(xi)胞活性。培養(yang)環(huan)境需(xu)控制(zhi)在 37℃、5% CO₂飽(bao)和(he)濕(shi)度，每(mei) 2-3 天(tian)更換(huan)壹次(ci)培養(yang)基(ji)，細(xi)胞密度維持(chi)在 20%-70% 之間，過度匯合會(hui)導(dao)致細(xi)胞透明性下降(jiang)及 HIF-1α 表(biao)達上(shang)調 15%-20%。與其(qi)他(ta)腎(shen)癌細(xi)胞系相比，其(qi)對缺(que)氧(yang)環(huan)境耐受(shou)性更強(qiang)，在 1% 氧濃(nong)度下仍能(neng)保(bao)持 80% 以(yi)上(shang)的活性，傳代(dai)時(shi)消化後需(xu)用含血清(qing)培養(yang)基(ji)終止反(fan)應，凍存液推(tui)薦(jian)含 10% DMSO 的胎牛血清(qing)，復(fu)蘇(su)後存(cun)活(huo)率可(ke)達(da) 85% 以(yi)上(shang)，24 小時貼(tie)壁(bi)率超(chao)過 90%，細(xi)胞功能(neng)恢(hui)復正(zheng)常(chang)。
檢測鑒(jian)定(ding)：經(jing)微生物篩查(zha)，無支(zhi)原(yuan)體、細(xi)菌、真菌及常(chang)見(jian)病(bing)毒(du)汙(wu)染，符合實驗細(xi)胞質(zhi)量標準。免疫(yi)細(xi)胞化學檢測顯示(shi)碳(tan)酸酐(gan)酶 IX（CAIX）、CD10 呈(cheng)陽(yang)性表(biao)達，這(zhe)兩(liang)種(zhong)標(biao)誌(zhi)物在腎透(tou)明細(xi)胞癌中(zhong)特(te)異(yi)性高，符合該亞(ya)型(xing)的(de)分子(zi)表(biao)型。基(ji)因(yin)測序證實(shi) VHL 基(ji)因(yin)純(chun)合(he)缺(que)失(shi)，Western blot 顯示(shi) HIF-1α、HIF-2α 蛋白(bai)持(chi)續(xu)高表(biao)達。染(ran)色體(ti)核(he)型(xing)分析呈(cheng)現亞(ya)三(san)倍(bei)體(ti)核(he)型(xing)，存在 3 號(hao)染(ran)色(se)體(ti)短臂缺(que)失(shi)（涉(she)及(ji) VHL 基(ji)因(yin)所在區(qu)域(yu)）等(deng)異常(chang)，與 70% 的腎(shen)透明細(xi)胞癌患(huan)者(zhe)遺傳(chuan)學改(gai)變(bian)吻(wen)合(he)。
應用領(ling)域(yu)：在機制(zhi)研究中(zhong)，該細(xi)胞系被(bei)廣泛(fan)用(yong)於(yu)揭(jie)示(shi) VHL-HIF 通路異常(chang)在腎癌發(fa)生中(zhong)的作(zuo)用(yong)，研(yan)究(jiu)發(fa)現 HIF-2α 通過激活下(xia)遊(you) Cyclin D1、VEGF 等(deng)靶(ba)基因(yin)促(cu)進細(xi)胞增(zeng)殖(zhi)和血管生成，為(wei)理(li)解(jie) “缺(que)氧(yang)信(xin)號(hao) - 增(zeng)殖(zhi) - 血管生成" 的(de)協(xie)同作(zuo)用提供(gong)了(le)依據。在靶(ba)向治療研究中(zhong)，是 VHL-HIF 通(tong)路抑制(zhi)劑及抗(kang)血管生成藥(yao)物（如舒(shu)尼(ni)替尼）療效(xiao)評估(gu)的常(chang)用(yong)模型，其(qi)對舒(shu)尼(ni)替尼的敏(min)感(gan)性較(jiao)高，IC50 值約(yue)為(wei) 1μM，通(tong)過該細(xi)胞系發(fa)現聯合 HIF-2α 抑制(zhi)劑可顯著(zhu)提高治療效(xiao)果，協(xie)同指(zhi)數(shu)達(da) 0.5。在藥(yao)物篩選領(ling)域(yu)，因(yin)其(qi)典型(xing)的(de) VHL 缺(que)失(shi)特(te)征(zheng)，被(bei)用(yong)於篩選針對該通路的新(xin)型(xing)藥(yao)物，近期(qi)研究(jiu)發(fa)現新型 E3 泛(fan)素連(lian)接酶激(ji)動(dong)劑可恢(hui)復 VHL 功能(neng)，降(jiang)低 HIF 表(biao)達，抑制(zhi)細(xi)胞增(zeng)殖(zhi)。此(ci)外，該細(xi)胞系可用於(yu)研(yan)究(jiu)腫瘤微環(huan)境的(de)影(ying)響，與腫瘤相關(guan)成纖(xian)維細(xi)胞共(gong)培養(yang)後，其(qi)侵(qin)襲(xi)能(neng)力提升(sheng) 30%，證(zheng)實(shi)微環(huan)境在腎癌進展中(zhong)的促(cu)進作用(yong)，為(wei)聯合靶(ba)向腫(zhong)瘤微環(huan)境提(ti)供(gong)實驗基礎。
與其(qi)他(ta)腎(shen)癌細(xi)胞系相比，786-O 細(xi)胞系的優勢在於其(qi)典型(xing)的(de) VHL 缺(que)失(shi)、透(tou)明細(xi)胞表(biao)型及(ji)富(fu)血管特(te)征(zheng)，能(neng)更真實(shi)地(di)模擬(ni)大多數(shu)腎(shen)透明細(xi)胞癌的(de)生物學特(te)性，為該亞(ya)型(xing)腎(shen)癌的(de)發(fa)病(bing)機(ji)制(zhi)研究及(ji)靶(ba)向藥(yao)物研發(fa)提供(gong)了(le)不可替代的(de)實驗工具(ju)，持續(xu)推(tui)動(dong)腎透明細(xi)胞癌精(jing)準診(zhen)療的發(fa)展。
以(yi)上(shang)信(xin)息(xi)僅供參考，詳(xiang)細(xi)信(xin)息(xi)請(qing)聯(lian)系(xi)我們。
首(shou)頁-產(chan)品系(xi)統-細(xi)胞-細(xi)胞系-BY-0196786-O 786-0人腎透(tou)明細(xi)胞腺癌細(xi)胞系
詳(xiang)細(xi)介紹(shao)
產(chan)品(pin)咨(zi)詢(xun)
聯(lian)系我們