JEG-3-VP16-TNFa耐VP16絨(rong)癌細(xi)胞(bao)系
JEG-3-VP16-TNFa耐(nai)VP16絨(rong)癌細(xi)胞(bao)系以(yi) JEG-3/VP16 耐(nai)藥(yao)株為(wei)基(ji)礎，通(tong)過(guo)基(ji)因(yin)工(gong)程(cheng)技(ji)術導入腫瘤壞死因(yin)子(zi) α（TNFα）基(ji)因(yin)改造(zao)而(er)成。這壹改造(zao)旨(zhi)在(zai)探索 TNFα 在(zai)耐藥(yao)絨(rong)癌細(xi)胞(bao)中的(de)雙重(zhong)作(zuo)用(yong)，為(wei)攻克絨(rong)癌耐(nai)藥(yao)難(nan)題、解(jie)析(xi)腫瘤微(wei)環(huan)境(jing)調(tiao)控機制(zhi)提供du特(te)研(yan)究(jiu)模(mo)型(xing)。
在(zai)生(sheng)物學特(te)性上，JEG-3-VP16-TNFα 細胞(bao)保留(liu)了(le)原始耐(nai)藥(yao)株上(shang)皮(pi)樣貼(tie)壁生(sheng)長的(de)形態特(te)征(zheng)，但 TNFα 基(ji)因(yin)的(de)穩定(ding)表(biao)達(da)顯(xian)著改變(bian)了細(xi)胞(bao)行為(wei)。顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)，細胞(bao)形態出現(xian)明(ming)顯(xian)變(bian)化，部(bu)分(fen)細胞(bao)體積(ji)增(zeng)大(da)、形(xing)態不規則，偽足(zu)增(zeng)多且伸(shen)展(zhan)活躍，細胞(bao)間連(lian)接(jie)更加(jia)松(song)散，呈現(xian)出更強的遷移(yi)傾(qing)向(xiang)。細胞(bao)增(zeng)殖速(su)率雖未(wei)wan全突(tu)破(po)耐藥(yao)導致(zhi)的限(xian)制(zhi)，但 TNFα 的(de)持(chi)續(xu)分(fen)泌(mi)激活(huo)了細(xi)胞(bao)內(nei) NF-κB、MAPK 等(deng)信(xin)號通(tong)路，增(zeng)強了細胞(bao)代謝(xie)活(huo)性(xing)和抗雕亡能(neng)力(li)。同時，細胞(bao)表(biao)面黏(nian)附分(fen)子表(biao)達(da)上(shang)調(tiao)，促(cu)使(shi)其與(yu)細(xi)胞(bao)外(wai)基(ji)質及(ji)免(mian)疫細(xi)胞(bao)的相(xiang)互作(zuo)用(yong)發(fa)生(sheng)改變(bian)，進壹步重(zhong)塑腫瘤微(wei)環(huan)境(jing)。
該(gai)細胞(bao)系的(de)耐(nai)藥(yao)與(yu) TNFα 表(biao)達(da)機制(zhi)緊(jin)密(mi)關聯。耐(nai)藥(yao)方面，JEG-3-VP16-TNFα 細(xi)胞(bao)依舊(jiu)維(wei)持(chi)著(zhe) P - 糖蛋(dan)白、多藥(yao)耐藥(yao)相(xiang)關蛋白的高表(biao)達(da)水(shui)平，能(neng)夠快(kuai)速外(wai)排進(jin)入(ru)細(xi)胞(bao)的 VP16 等(deng)hua療(liao)藥(yao)物；DNA 損(sun)傷(shang)修(xiu)復(fu)系統持(chi)續(xu)高(gao)效(xiao)運作(zuo)，及時修復hua療藥(yao)物造(zao)成(cheng)的 DNA 損(sun)傷(shang)。而(er) TNFα 的(de)表(biao)達(da)則呈現(xian)復(fu)雜的生(sheng)物學效(xiao)應：壹方面，低(di)濃(nong)度 TNFα 可(ke)通(tong)過(guo)激活 NF-κB 信(xin)號通(tong)路，上調(tiao)抗雕亡蛋(dan)白 Bcl-2 表(biao)達(da)，增(zeng)強細胞(bao)耐藥(yao)性；另壹方面，高(gao)濃(nong)度 TNFα 能(neng)夠誘導腫瘤細(xi)胞(bao)雕亡(wang)，同時招(zhao)募(mu)並(bing)激(ji)活巨噬(shi)細(xi)胞(bao)、NK 細胞(bao)等免(mian)疫細(xi)胞(bao)，增(zeng)強機體抗腫瘤免(mian)疫反(fan)應。此(ci)外(wai)，TNFα 還可(ke)促(cu)進(jin)腫瘤血(xue)管生(sheng)成，調(tiao)節細(xi)胞(bao)外(wai)基(ji)質成(cheng)分(fen)，為腫瘤細(xi)胞(bao)的生(sheng)存和(he)轉(zhuan)移(yi)創(chuang)造(zao)有利(li)條(tiao)件(jian)。
在(zai)細胞(bao)培(pei)養(yang)過(guo)程中，JEG-3-VP16-TNFα 細胞(bao)需使(shi)用(yong)含(han) 10% 胎牛(niu)血(xue)清(qing)的 DMEM/F12 培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)環境(jing)控(kong)制(zhi)在(zai) 37℃、5% 二氧化(hua)碳的恒溫恒(heng)濕培(pei)養(yang)箱中。為確保(bao) TNFα 基(ji)因(yin)穩定(ding)表(biao)達(da)，需(xu)定(ding)期(qi)利用(yong)抗生(sheng)素篩(shai)選和(he) Western blot、ELISA 等技術對細胞(bao)進行(xing)鑒定(ding)。當(dang)細胞(bao)融合(he)度(du)達(da)到(dao) 80% - 90% 時，按(an) 1:3 - 1:5 的比(bi)例(li)進行傳(chuan)代(dai)。
在(zai)科研(yan)與(yu)醫(yi)藥(yao)領域(yu)，JEG-3-VP16-TNFα 細(xi)胞(bao)系發(fa)揮(hui)著(zhe)重(zhong)要作(zuo)用(yong)。科研(yan)人員(yuan)借(jie)助該(gai)細胞(bao)系深(shen)入(ru)研(yan)究(jiu)耐(nai)藥(yao)與(yu)腫瘤微(wei)環(huan)境(jing)之間的相(xiang)互作(zuo)用(yong)機制(zhi)，探索逆轉(zhuan)耐(nai)藥(yao)的新靶點(dian)；在(zai)藥(yao)物研(yan)發(fa)方(fang)面，其用(yong)於(yu)評(ping)估(gu)新型(xing)hua療藥(yao)物、靶向 TNFα 療(liao)法或聯(lian)合(he)治(zhi)療方案對(dui)耐(nai)藥(yao)絨(rong)癌細(xi)胞(bao)的作(zuo)用(yong)效(xiao)果，為(wei)絨(rong)癌耐(nai)藥(yao)患(huan)者的(de)臨(lin)床治(zhi)療提供理(li)論(lun)依(yi)據和(he)實(shi)踐指導，推動(dong)絨(rong)癌治(zhi)療技術的創新與(yu)發(fa)展。
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