GBJd高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞系
GBJd高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞系作為(wei)針對高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭組織的特(te)異(yi)性細(xi)胞模型(xing)，在(zai)淡水(shui)魚類尾鰭發育機制、再(zai)生能(neng)力及(ji)相關病害(hai)研(yan)究領域具(ju)有重要(yao)價(jia)值(zhi)。它的建立(li)為深(shen)入(ru)探究高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭的生長(chang)規(gui)律(lv)、損(sun)傷修復(fu)過程(cheng)以(yi)及(ji)病原(yuan)體感染(ran)機(ji)制等提(ti)供(gong)了穩(wen)定(ding)的體外(wai)研(yan)究平臺(tai)，對(dui)高(gao)背鯽(ji)魚(yu)養(yang)殖(zhi)產(chan)業(ye)的健康(kang)發(fa)展意(yi)義重大。
高(gao)背鯽(ji)魚(yu)是(shi)我(wo)國(guo)重要(yao)的淡水(shui)養(yang)殖(zhi)魚類，肉質鮮(xian)嫩(nen)，適(shi)應性強(qiang)，在(zai)各(ge)地(di)淡(dan)水(shui)水(shui)域廣(guang)泛(fan)養(yang)殖(zhi)。尾鰭作為(wei)魚類重要(yao)的運動(dong)器官和(he)平衡(heng)器官，對(dui)高(gao)背鯽(ji)魚(yu)的遊泳、轉向以(yi)及(ji)保持身體平衡(heng)起(qi)著關鍵作用，其(qi)完整(zheng)與否直(zhi)接(jie)影響(xiang)魚類的生存和生長(chang)。在(zai)養(yang)殖(zhi)過程(cheng)中(zhong)，高(gao)背鯽(ji)魚(yu)的尾鰭易(yi)受機(ji)械(xie)損(sun)傷、病原(yuan)菌感染(ran)、水(shui)質汙(wu)染(ran)等因(yin)素(su)影響(xiang)，出現(xian)鰭條斷裂、腐爛(lan)等問(wen)題(ti)，導致(zhi)魚(yu)類活動(dong)能(neng)力下(xia)降、生長(chang)遲(chi)緩(huan)，給(gei)養(yang)殖(zhi)產(chan)業(ye)帶來(lai)壹(yi)定(ding)損(sun)失。因(yin)此，建立(li) GBJd 高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞系，對(dui)於(yu)揭(jie)示尾鰭的生理(li)機制、研(yan)發(fa)尾鰭損(sun)傷修復(fu)技(ji)術(shu)具(ju)有重要(yao)的理(li)論(lun)和實(shi)踐(jian)意(yi)義。
GBJd 高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞系的建立(li)經(jing)過了嚴(yan)謹規(gui)範的操作流(liu)程(cheng)。選取(qu)健康(kang)的高(gao)背鯽(ji)魚(yu)，經(jing)嚴(yan)格的無菌處(chu)理(li)後(hou)，在超凈(jing)工作臺(tai)中(zhong)小心剪取尾鰭組織，去(qu)除(chu)表(biao)面的鱗片和(he)黏(nian)液(ye)。將尾鰭組zhi剪碎成 1mm³ 左(zuo)右(you)的小塊，用含(han)雙(shuang)抗的磷酸鹽(yan)緩沖(chong)液反復(fu)沖洗(xi)，以(yi)清(qing)除(chu)血(xue)細(xi)胞和雜(za)質。隨後(hou)加入(ru) 0.25% 胰dan白(bai)酶和(he) EDTA 混合(he)溶液，在(zai) 25℃條件下(xia)消化 25-35 分(fen)鐘(zhong)，使細(xi)胞分(fen)散(san)。收集細(xi)胞懸液(ye)，經(jing) 70μm 細(xi)胞濾網過(guo)濾後(hou)，1000r/min 離心 5 分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，用含(han) 15% 胎(tai)牛血(xue)清(qing)的 L-15 培養(yang)液(ye)重懸細(xi)胞，接(jie)種於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu) 25℃恒(heng)溫(wen)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行原代(dai)培養(yang)。培養(yang)初(chu)期(qi)，每(mei) 2-3 天更換壹(yi)半(ban)培養(yang)液(ye)，待(dai)細(xi)胞匯(hui)合(he)度(du)達(da)到(dao) 70%-80% 時(shi)進(jin)行傳(chuan)代(dai)，目(mu)前該(gai)細(xi)胞系已(yi)穩(wen)定(ding)傳(chuan)代(dai)至(zhi) 40 代(dai)以(yi)上(shang)，細(xi)胞活力(li)保(bao)持(chi)在 85% 以(yi)上(shang)。
該(gai)細(xi)胞系呈(cheng)現(xian)典型(xing)的成纖(xian)維樣細(xi)胞形(xing)態，細(xi)胞呈長(chang)梭(suo)形(xing)，排(pai)列較(jiao)為疏松，具(ju)有較強(qiang)的貼(tie)壁生長(chang)能(neng)力。生長(chang)特(te)性(xing)研(yan)究顯(xian)示，GBJd 細(xi)胞在 L-15 培養(yang)液(ye)中(zhong)生長(chang)狀(zhuang)態最(zui)佳(jia)，相較於其(qi)他(ta)培養(yang)基，細(xi)胞增(zeng)殖(zhi)速度(du)提(ti)高(gao)約 20%；最(zui)適(shi)培養(yang)溫(wen)度(du)為(wei) 24-26℃，與(yu)高(gao)背鯽(ji)魚(yu)的自(zi)然(ran)生存水(shui)溫相符；當胎(tai)牛血(xue)清(qing)濃度(du)為(wei) 12% 時(shi)，細(xi)胞群體倍增(zeng)時(shi)間(jian)最(zui)短(duan)，約為(wei) 62 小時(shi)。傳(chuan)代(dai)至(zhi) 30 代(dai)後(hou)，細(xi)胞形(xing)態和增(zeng)殖(zhi)速率無(wu)明(ming)顯(xian)變(bian)化，核(he)型(xing)分(fen)析表(biao)明(ming)其(qi)染(ran)色(se)體數(shu)目(mu)穩(wen)定(ding)，遺(yi)傳(chuan)穩(wen)定(ding)性良(liang)好(hao)。
在(zai)功能(neng)特(te)性(xing)方面(mian)，GBJd 高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞系展(zhan)現(xian)出豐(feng)富(fu)的尾鰭細(xi)胞功能(neng)。免疫(yi)熒光(guang)檢(jian)測(ce)發現(xian)，細(xi)胞表(biao)達成纖(xian)維細(xi)胞特(te)異(yi)性標(biao)誌(zhi)物(wu)如(ru)波形(xing)蛋白(bai)，進(jin)壹步(bu)證實(shi)了其(qi)尾鰭組織來(lai)源(yuan)屬性(xing)。該(gai)細(xi)胞系具(ju)有較強(qiang)的增(zeng)殖(zhi)能(neng)力，在(zai)體外(wai)培養(yang)條(tiao)件下(xia)能(neng)快(kuai)速生長(chang)，模(mo)擬尾鰭的生長(chang)過(guo)程(cheng)，這(zhe)對研(yan)究尾鰭發育機制具(ju)有重要(yao)意(yi)義。同時(shi)，GBJd 細(xi)胞在損(sun)傷刺激下(xia)能(neng)表(biao)現出壹(yi)定的遷移(yi)和增(zeng)殖(zhi)活性，模(mo)擬尾鰭的再(zai)生過程(cheng)，為研(yan)究尾鰭損(sun)傷修復(fu)機制提(ti)供(gong)了理(li)想模型(xing)。此(ci)外(wai)，該(gai)細(xi)胞系對(dui)高(gao)背鯽(ji)魚(yu)常(chang)見(jian)的病原(yuan)菌如(ru)嗜(shi)水(shui)氣單(dan)胞菌等表(biao)現出敏感性，感染(ran)後(hou)會出現(xian)細(xi)胞變(bian)形(xing)、脫落等病變(bian)特(te)征(zheng)，為研(yan)究病原(yuan)菌對(dui)尾鰭的侵(qin)染(ran)機(ji)制提(ti)供(gong)了良(liang)好(hao)材(cai)料。
GBJd 高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞系在(zai)多個研(yan)究領域應用廣(guang)泛(fan)。在(zai)尾鰭再(zai)生機制研(yan)究中(zhong)，通(tong)過(guo)檢測(ce)細(xi)胞在不同再(zai)生階(jie)段(duan)的基因(yin)表(biao)達變(bian)化，揭示了高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭的再(zai)生調控途(tu)徑(jing)；在(zai)環(huan)境(jing)毒理(li)學(xue)研(yan)究中(zhong)，利用該細(xi)胞系評(ping)估(gu)了水(shui)體中(zhong)重金屬(shu)、農藥(yao)等汙(wu)染(ran)物(wu)對(dui)尾鰭細(xi)胞的毒性影響(xiang)，為水(shui)產(chan)養(yang)殖(zhi)環境(jing)風險(xian)評估(gu)提(ti)供(gong)了依據；在(zai)藥(yao)物(wu)篩選方(fang)面，建立(li)了基於(yu)細(xi)胞活性(xing)和(he)再(zai)生能(neng)力的篩選模(mo)型(xing)，已(yi)篩選出多種具(ju)有促進(jin)尾鰭修復(fu)作用的化合物(wu)。
作為(wei)穩(wen)定(ding)可靠(kao)的高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞模型(xing)，GBJd 不僅填(tian)bu了高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭細(xi)胞研(yan)究的空白(bai)，更為(wei)淡水(shui)魚類尾鰭生物學(xue)研(yan)究提(ti)供(gong)了重(zhong)要工具(ju)，推(tui)動(dong)了高(gao)背鯽(ji)魚(yu)尾鰭疾病防(fang)控(kong)和損(sun)傷修復(fu)技(ji)術(shu)的研(yan)發(fa)，對保障高(gao)背鯽(ji)魚(yu)養(yang)殖(zhi)產(chan)業(ye)的可持(chi)續(xu)發(fa)展(zhan)具(ju)有重要(yao)意(yi)義。
以(yi)上(shang)信息(xi)僅供(gong)參考(kao)，詳細(xi)信息(xi)請(qing)聯系(xi)我(wo)們(men)。
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