SF9昆(kun)蟲(chong)卵巢細(xi)胞系為貼壁或(huo)懸浮(fu)生(sheng)長的(de)上皮(pi)樣(yang)細(xi)胞系，源(yuan)自(zi)草(cao)地(di)貪(tan)夜(ye)蛾，可(ke)高效(xiao)表(biao)達重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，適用(yong)於(yu)桿(gan)狀病毒載(zai)體(ti)構建(jian)、蛋白(bai)功能(neng)及(ji)疫苗(miao)研(yan)發(fa)研究。

桿(gan)狀病毒感(gan)染(ran)特(te)性(xing)：對(dui)苜蓿銀紋(wen)夜(ye)蛾核(he)型多角體(ti)病毒（AcMNPV）等(deng)桿(gan)狀病毒的(de)易感(gan)率達 100%，病毒復(fu)制周(zhou)期(qi)約(yue) 72 小(xiao)時（比(bi)哺乳(ru)動物細胞病毒復(fu)制快(kuai) 30%）；感染(ran)後(hou) 48 小(xiao)時進(jin)入裂(lie)解(jie)期，釋放病毒粒(li)子達 10⁸ PFU/mL，同時啟動重組(zu)蛋白(bai)的(de)高效(xiao)表(biao)達（表(biao)達量(liang)隨病毒復(fu)制同步升(sheng)高）。與 DogL1 細胞的(de)天(tian)然病毒感(gan)染(ran)不同，其(qi)病毒受(shou)體(ti)為 gp64 蛋白(bai)（表達量(liang)是其他昆蟲(chong)細胞的(de) 2.3 倍），確(que)保病毒高效(xiao)入侵。

蛋白(bai)表達與修飾：具(ju)備(bei)完(wan)整的(de)真(zhen)核(he)蛋白(bai)修飾系統，可(ke)實(shi)現糖基(ji)化、磷(lin)酸化等翻(fan)譯(yi)後(hou)修飾（糖基(ji)化效率(lv)達哺(bu)乳(ru)動(dong)物細胞的(de) 70%），但(dan)糖鏈(lian)結(jie)構更(geng)簡單（以高甘露(lu)糖型為(wei)主(zhu)）；表(biao)達的(de)重組(zu)蛋白(bai)可(ke)溶性(xing)率達 85%（高於(yu)大腸桿(gan)菌(jun)的(de) 30%），且正(zheng)確(que)折(zhe)疊率(lv)達 90%（通(tong)過圓(yuan)二(er)色譜驗證(zheng)），尤其(qi)適合(he)膜(mo)蛋白(bai)與復(fu)雜(za)結構(gou)蛋白(bai)的(de)表達（如 G 蛋白(bai)偶聯(lian)受體）。

代(dai)謝適應(ying)性：在(zai)無(wu)血(xue)清培養基中(zhong)可(ke)正常(chang)生長（細胞密度達 8×10⁶細(xi)胞 /mL），代謝葡(pu)萄糖的(de)速(su)率(lv)達 5.2mmol/10⁹細(xi)胞 / 天(tian)，乳酸積累量(liang)僅(jin)為(wei)哺乳動(dong)物細胞的(de) 1/5，適合(he)高密(mi)度發(fa)酵（最(zui)高密(mi)度可(ke)達 3×10⁷細(xi)胞 /mL）；對(dui)氧氣(qi)濃(nong)度變化敏感(gan)，溶氧維(wei)持在(zai) 30-50% 時蛋白(bai)表達量(liang)最(zui)高（低於(yu) 20% 時下降(jiang) 40%）。

膜(mo)蛋白(bai)表達優勢(shi)：利(li)用 SF9 細(xi)胞成功表(biao)達多種難(nan)表(biao)達膜(mo)蛋白(bai)，如昆(kun)蟲(chong)氣味(wei)受(shou)體（表(biao)達量(liang)達 250μg/mL，是(shi) HEK293 細(xi)胞的(de) 8 倍），通(tong)過冷凍(dong)電(dian)鏡(jing)解(jie)析其(qi)與配體(ti)結合(he)的(de)三(san)維(wei)結構(gou)（分辨(bian)率(lv) 3.2Å）；該受(shou)體在(zai) SF9 細(xi)胞中(zhong)形成功能(neng)性(xing)二聚體（通過 FRET 實(shi)驗驗證(zheng)），而(er)在(zai)大腸桿(gan)菌(jun)中(zhong)僅(jin)以包涵(han)體形式(shi)存在(zai)，體(ti)現其在(zai)復(fu)雜(za)蛋白(bai)表達中(zhong)的(de)優勢(shi)（DogL1 細胞因表達量(liang)低，不適合(he)此類(lei)研究）。

蛋白(bai)相互(hu)作(zuo)用(yong)分析(xi)：通(tong)過共表(biao)達技(ji)術(shu)在(zai) SF9 細(xi)胞中(zhong)構建(jian)病毒蛋白(bai) - 宿主(zhu)因子互(hu)作(zuo)模(mo)型，發(fa)現桿狀病毒 IE1 蛋白(bai)與宿主(zhu)細(xi)胞 Cyclin E 的(de)結合(he)（解(jie)離(li)常(chang)數(shu) 1.8×10⁻⁹M）可(ke)促(cu)進(jin)病毒 DNA 復(fu)制（復(fu)制效(xiao)率提(ti)升(sheng) 3.2 倍(bei)）；免(mian)疫共沈澱(dian)結(jie)合(he)質(zhi)譜鑒(jian)定(ding)出(chu) 23 種互(hu)作(zuo)蛋白(bai)，為病毒復(fu)制機制提(ti)供(gong)新見解(jie)。

桿狀病毒載(zai)體(ti)改造(zao)：以 SF9 細胞為宿主(zhu)，構(gou)建攜帶(dai)綠色熒光蛋白(bai)（GFP）的(de)重組(zu)桿(gan)狀病毒，通(tong)過熒(ying)光(guang)強(qiang)度監測優化病毒載(zai)體(ti)（插(cha)入 CMV 啟動子後(hou)表(biao)達量(liang)提(ti)升(sheng) 4.5 倍(bei)）；該(gai)改造(zao)載(zai)體可(ke)高效(xiao)轉導哺(bu)乳(ru)動物細(xi)胞（轉導效(xiao)率(lv)達 70%），成為(wei)基(ji)因遞(di)送(song)的(de)安(an)全工具(ju)（無(wu)致(zhi)病性）。

亞(ya)單(dan)位(wei)疫苗(miao)生(sheng)產：在(zai) SF9 細(xi)胞中(zhong)表達禽liu感(gan)病毒 HA 蛋白(bai)（表達量(liang)達 180μg/mL），經(jing)純(chun)化後免(mian)疫小(xiao)鼠，中(zhong)和(he)抗體效(xiao)價(jia)達 1:1280（保護率(lv) 90%）；與 DogL1 細胞的(de)病毒培養疫苗(miao)相(xiang)比(bi)，亞單(dan)位(wei)疫苗(miao)安(an)全性(xing)更(geng)高（無(wu)病毒復(fu)制風(feng)險），且生產周(zhou)期(qi)縮(suo)短(duan)至(zhi) 14 天(tian)（傳(chuan)統方(fang)法(fa)需(xu) 28 天(tian)）。

治療(liao)性(xing)蛋白(bai)生產：利(li)用 SF9 細(xi)胞懸浮發(fa)酵生(sheng)產人(ren)幹擾(rao)素 -α，產(chan)量(liang)達 2.5g/L（是(shi) CHO 細(xi)胞的(de) 3 倍），且(qie)比(bi)活性(xing)達 1.8×10⁸ IU/mg（與天(tian)然蛋白(bai)壹(yi)致(zhi)）；該生(sheng)產工藝(yi)通(tong)過 GMP 認(ren)證(zheng)，生產(chan)成本(ben)降(jiang)低 40%，已用於(yu) veterinary 抗病du藥(yao)物研發(fa)。

生物(wu)農(nong)藥(yao)開(kai)發(fa)：構建(jian)表達 Bt 毒蛋白(bai)的(de)重組(zu)桿(gan)狀病毒，在(zai) SF9 細(xi)胞中(zhong)大量(liang)生產病毒制(zhi)劑(ji)（病毒滴(di)度達 10¹⁰ PFU/mL），田(tian)間試(shi)驗顯示(shi)對(dui)小(xiao)菜蛾防(fang)治效(xiao)果(guo)達 95%（持(chi)效(xiao)期(qi) 14 天(tian)），比(bi)化學農(nong)藥(yao)減少環(huan)境(jing)汙染(ran)。

優勢(shi)：

局限性(xing)：