產品(pin)系(xi)統PRODUCT CENTER
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首(shou)頁(ye)-產品(pin)系(xi)統-細(xi)胞-細胞系(xi)-BY-1296BHK-21 C-13倉(cang)鼠腎(shen)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞系(xi)


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TECHNICAL ARTICLES
詳(xiang)細介(jie)紹
來源(yuan)與(yu)形(xing)態(tai):該(gai)細(xi)胞系(xi)源自(zi) BHK-21 母系(xi)細胞,經單(dan)細胞克隆技術篩選獲(huo)得純(chun)度更高(gao)的(de)亞(ya)系(xi)(“C-13" 代表克隆編號(hao))。體外培(pei)養(yang)時呈典(dian)型(xing)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)形(xing)態(tai),貼壁(bi)生(sheng)長(chang),細胞呈長(chang)梭形(xing)或星形(xing),排列(lie)疏松(song)且邊界清(qing)晰(xi),較(jiao)原始(shi) BHK-21 細(xi)胞形(xing)態(tai)更均(jun)壹(yi)。在(zai) 37℃、5% CO₂的(de)培(pei)養(yang)條件(jian)下(xia),增(zeng)殖(zhi)速(su)度快(kuai),傳(chuan)代周期約 1-2 天(tian),可適應貼(tie)壁(bi)培養(yang)與(yu)懸(xuan)浮(fu)培養(yang),尤其(qi)適合(he)無(wu)血(xue)清(qing)培(pei)養(yang)基(ji)馴(xun)化(hua),能(neng)滿(man)足規模(mo)化(hua)生產需求。
遺(yi)傳(chuan)特征(zheng):保(bao)留 BHK-21 細胞的(de)非(fei)整(zheng)倍體(ti)核(he)型(xing)(染色(se)體(ti)數目約 44-46 條),核型(xing)穩定性(xing)優於(yu)母系(xi)細胞,基(ji)因(yin)組背(bei)景(jing)清(qing)晰(xi)且無(wu)內源(yuan)性(xing)病毒(du)序列(lie)。其(qi)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞特性(xing)顯著(zhu),分泌膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)等細胞外基(ji)質(zhi)成(cheng)分的(de)能(neng)力較(jiao)強,同時對(dui)外源(yuan)基(ji)因(yin)的(de)轉染(ran)效率高,可通(tong)過(guo)抗(kang)性(xing)篩選快(kuai)速獲(huo)得穩定表(biao)達(da)株,長(chang)期傳(chuan)代後仍能(neng)維(wei)持生物(wu)學特性(xing)的(de)壹(yi)致性(xing)。
病毒(du)培(pei)養(yang)與(yu)疫(yi)苗(miao)生(sheng)產
病毒(du)學(xue)基(ji)礎(chu)研究(jiu)
重(zhong)組蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)與(yu)生(sheng)物(wu)制劑開發(fa)
優勢(shi):遺(yi)傳(chuan)均(jun)壹(yi)性(xing)高,實(shi)驗重(zhong)復(fu)性(xing)優於(yu)原始(shi) BHK-21 細(xi)胞;病毒(du)敏感(gan)性(xing)強,對(dui)多(duo)種病毒(du)的(de)增(zeng)殖效率高且穩定;培(pei)養(yang)適應性(xing)好,可在(zai)貼壁與(yu)懸(xuan)浮(fu)體系(xi)中高效增殖,便於(yu)規模(mo)化生產;無內源(yuan)性(xing)病毒(du)汙(wu)染(ran),生(sheng)物(wu)安(an)全性(xing)高,被世(shi)界衛生(sheng)組織(WHO)推(tui)薦為(wei)疫(yi)苗(miao)生(sheng)產的(de)合(he)規(gui)細(xi)胞系(xi)。
局(ju)限(xian)性(xing):對部(bu)分人(ren)類病毒(du)(如肝(gan)炎病毒(du))的(de)敏感(gan)性(xing)較(jiao)低,應用(yong)範圍(wei)存(cun)在(zai)壹(yi)定限制(zhi);懸(xuan)浮(fu)培養(yang)時易(yi)形(xing)成(cheng)細胞聚(ju)集體(ti),需(xu)通(tong)過培養(yang)基(ji)優化(hua)減(jian)少(shao)聚(ju)集;長(chang)期傳(chuan)代可能(neng)導致(zhi)病毒(du)敏感(gan)性(xing)下(xia)降(jiang),需(xu)定(ding)期凍存(cun)原始(shi)克隆株以維持(chi)特性(xing)。
培(pei)養(yang)條件(jian):常規使(shi)用含 10% 胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)的(de) MEM 培(pei)養(yang)基(ji),添加(jia)青mei素(su) - 鏈(lian)mei素(su)抑(yi)制(zhi)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)。若(ruo)用(yong)於(yu)疫苗(miao)生(sheng)產,可改(gai)用無血清(qing)懸(xuan)浮(fu)培養(yang)基(ji),減(jian)少(shao)外源(yuan)蛋(dan)白(bai)幹(gan)擾(rao),提升(sheng)產物純(chun)度。培養(yang)過程中需控制細胞密度(貼壁(bi)培(pei)養(yang)融合(he)度不超(chao)過(guo) 80%),避(bi)免(mian)過(guo)度密集導致(zhi)細胞形(xing)態(tai)改(gai)變或增殖(zhi)停(ting)滯。
汙(wu)染(ran)防(fang)控:貼壁細胞易受(shou)支原體(ti)汙(wu)染(ran),需(xu)定(ding)期(qi)通(tong)過 PCR 或熒光染色檢(jian)測(ce);凍存(cun)時使(shi)用含 10% DMSO 的(de)凍存(cun)液(ye),液(ye)氮保(bao)存可長(chang)期維持(chi)活(huo)性(xing),復(fu)蘇(su)時 37℃水(shui)浴(yu)快(kuai)速解(jie)凍,離(li)心(xin)去除(chu) DMSO 以(yi)降(jiang)低細胞損傷。
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