CAM-M白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系
CAM-M白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系作為(wei)針(zhen)對白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)組織的特異性細(xi)胞(bao)模型，在珍xi禽(qin)類(lei)肌(ji)肉(rou)發(fa)育(yu)機(ji)制、肌(ji)纖維功(gong)能(neng)調(tiao)控(kong)及(ji)相(xiang)關(guan)疾病研究領域具(ju)有(you)重要價(jia)值。它(ta)的建(jian)立(li)為深(shen)入探究白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞的分化規律、肌(ji)肉(rou)收縮機制以(yi)及(ji)肌(ji)肉(rou)相(xiang)關(guan)疾病的發生(sheng)路(lu)徑等提供了(le)穩定(ding)的體(ti)外研究平臺，對這(zhe)壹(yi)珍xi禽(qin)類(lei)的保護(hu)和肌(ji)肉(rou)生(sheng)物(wu)學研究意義(yi)重大。
白(bai)腹錦雞(ji)作為(wei)國(guo)家二級(ji)保(bao)護動物(wu)，其(qi)du特的外形和(he)生態(tai)價(jia)值備(bei)受(shou)關(guan)註，而(er)肌(ji)肉(rou)系統是(shi)其(qi)運動、生(sheng)存(cun)的重要支撐(cheng)。肌(ji)肉(rou)的正常(chang)發育(yu)涉(she)及(ji)肌(ji)細胞(bao)的增(zeng)殖、分化、肌(ji)纖維形(xing)成以及(ji)肌(ji)肉(rou)組織的構建(jian)，任(ren)何環(huan)節出現(xian)異常都(dou)可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)其(qi)運動能(neng)力(li)和生(sheng)存狀(zhuang)態。由(you)於(yu)白(bai)腹錦雞(ji)野生(sheng)種群(qun)數量(liang)有(you)限，且(qie)受(shou)保(bao)護(hu)法規(gui)限制，對(dui)其(qi)肌(ji)肉(rou)的深入(ru)研究存在諸(zhu)多不便(bian)，傳統的研究方法難以(yi)滿足(zu)需(xu)求(qiu)。因(yin)此，建(jian)立(li) CAM-M 白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系，成為解析其(qi)肌(ji)肉(rou)發(fa)育(yu)奧(ao)秘、開(kai)展(zhan)物(wu)種保護研究的重要突破(po)口(kou)。
CAM-M 白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系的建(jian)立(li)經過了(le)嚴(yan)謹(jin)規(gui)範(fan)的操作流(liu)程(cheng)。選(xuan)取人(ren)工繁育(yu)的健(jian)康白(bai)腹錦雞(ji)雛鳥(niao)的腿(tui)部(bu)肌(ji)肉(rou)組織（非(fei)損(sun)傷性取樣(yang)），在超凈(jing)工作臺(tai)中(zhong)去除肌(ji)肉(rou)表面(mian)的筋(jin)膜和(he)結締(di)組織。將(jiang)肌(ji)肉(rou)組zhi剪(jian)切成 1mm³ 左右的小塊，用含雙(shuang)抗(kang)的磷酸(suan)鹽(yan)緩沖(chong)液(ye)反復(fu)沖(chong)洗(xi)，以清(qing)除血(xue)液(ye)和雜質(zhi)。加入細(xi)胞分散液(ye)，在 37℃條件下(xia)處(chu)理(li) 20-25 分鐘，期間(jian)每(mei)隔(ge) 5 分鐘輕(qing)輕(qing)吹打(da)壹(yi)次(ci)使(shi)細胞(bao)分散。收集(ji)細(xi)胞懸液(ye)，經 70μm 細(xi)胞(bao)濾網(wang)過濾後，1000r/min 離心(xin) 5 分鐘，棄上清(qing)，用含 15% 胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)的 DMEM 高糖(tang)培(pei)養(yang)液(ye)重懸(xuan)細(xi)胞，接(jie)種於(yu)膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)包被(bei)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu) 37℃、5% CO₂恒(heng)溫培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)原代培(pei)養(yang)。培(pei)養(yang)初期，每(mei) 24 小時更換(huan)壹(yi)次培(pei)養(yang)液(ye)，待細(xi)胞(bao)匯(hui)合度達 80% 時進行(xing)傳代，目前(qian)該(gai)細(xi)胞(bao)系已穩定(ding)傳代至(zhi) 40 代以(yi)上，細(xi)胞活(huo)力(li)保持(chi)在 85% 以上。
該細(xi)胞(bao)系呈現(xian)典(dian)型的肌(ji)纖維樣(yang)形(xing)態(tai)，細(xi)胞(bao)呈長(chang)梭(suo)形(xing)，排列(lie)具有(you)壹定(ding)的方向(xiang)性，部(bu)分細胞可(ke)相(xiang)互(hu)融合形(xing)成多核肌(ji)管，胞(bao)質(zhi)豐富(fu)，細(xi)胞(bao)核呈橢圓(yuan)形(xing)，具(ju)有(you)較強(qiang)的貼(tie)壁(bi)生長(chang)能(neng)力(li)。生長(chang)特性(xing)研究顯示，CAM-M 細(xi)胞在 DMEM 高糖培(pei)養(yang)液(ye)中生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態最佳(jia)，相(xiang)較(jiao)於(yu)其(qi)他培(pei)養(yang)液(ye)，細胞(bao)增(zeng)殖速(su)度提高約(yue) 20%；最(zui)適培(pei)養(yang)溫度為 37℃，與白(bai)腹錦雞(ji)的體(ti)溫相(xiang)符；當(dang)胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)濃(nong)度為 15% 時，細胞(bao)群(qun)體(ti)倍(bei)增(zeng)時間(jian)最(zui)短，約(yue)為(wei) 56 小時。傳代至(zhi) 30 代後，細胞(bao)形(xing)態和增(zeng)殖速(su)率無明顯變化(hua)，核型分析表明其(qi)染色(se)體(ti)數目穩定(ding)，遺傳背景(jing)可(ke)靠，仍(reng)保留(liu)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞的特性(xing)。
在功能(neng)特(te)性(xing)方(fang)面(mian)，CAM-M 白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系展現(xian)出豐富(fu)的肌(ji)肉(rou)細(xi)胞功能(neng)。免(mian)疫熒(ying)光(guang)檢(jian)測發(fa)現(xian)，細胞(bao)高表達肌(ji)肉(rou)細(xi)胞特異性標(biao)誌(zhi)物(wu)如肌(ji)動蛋白(bai)（Actin）、肌(ji)球(qiu)蛋白(bai)（Myosin），證實(shi)其(qi)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞屬(shu)性(xing)。該細胞系具有(you)壹定(ding)的收縮能(neng)力(li)，在體(ti)外培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)下(xia)，經適當(dang)誘(you)導(dao)後可(ke)觀(guan)察(cha)到(dao)細胞的收縮現(xian)象，這(zhe)對(dui)研究肌(ji)肉(rou)的收縮機制具(ju)有(you)重要意義(yi)。同時(shi)，CAM-M 細胞(bao)在受(shou)到(dao)機(ji)械(xie)刺激或(huo)營養變(bian)化(hua)等因(yin)素影(ying)響(xiang)時(shi)，會表現(xian)出肌(ji)肉(rou)細(xi)胞te有(you)的應(ying)激反應(ying)，如(ru)能(neng)量(liang)代謝(xie)水平(ping)改變、相(xiang)關(guan)酶活(huo)性(xing)變化等，為研究肌(ji)肉(rou)的適應(ying)機(ji)制提(ti)供了(le)理(li)想模型。此外，該細(xi)胞系對壹些可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)肌(ji)肉(rou)功(gong)能(neng)的病原體(ti)表現(xian)出壹(yi)定(ding)的敏(min)感(gan)性(xing)，感(gan)染(ran)後會影(ying)響(xiang)細(xi)胞的正常(chang)生長(chang)和功(gong)能(neng)，為(wei)研究病原體(ti)與(yu)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞的相(xiang)互(hu)作用提供了(le)良(liang)好材(cai)料(liao)。
CAM-M 白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系在多個研究領域應(ying)用廣泛(fan)。在肌(ji)肉(rou)發(fa)育(yu)研究中，通過對(dui)該細胞系進行(xing)相(xiang)關(guan)實驗，揭示了(le) MyoD 家族基因(yin)在肌(ji)肉(rou)細(xi)胞分化中的關(guan)鍵調控作用；在物(wu)種保護方面(mian)，利(li)用該細(xi)胞系開(kai)展(zhan)了(le)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞的低(di)溫保存(cun)研究，為白(bai)腹錦雞(ji)的種質(zhi)資(zi)源保(bao)護提(ti)供了(le)新(xin)的思(si)路(lu)；在比(bi)較(jiao)生(sheng)物(wu)學研究中，通過與(yu)其(qi)他禽(qin)類肌(ji)肉(rou)細(xi)胞系的對比(bi)分析，探討了(le)白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)系統的獨te性。
作為(wei)穩定(ding)可(ke)靠的白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞模型，CAM-M 不僅填bu了(le)白(bai)腹錦雞(ji)肌(ji)肉(rou)細(xi)胞體(ti)外研究的空(kong)白(bai)，更為(wei)珍xi禽(qin)類(lei)肌(ji)肉(rou)生(sheng)物(wu)學及(ji)物(wu)種保護研究提供了(le)重(zhong)要工具(ju)，推(tui)動(dong)了(le)白(bai)腹錦雞(ji)保護(hu)技術(shu)的發展(zhan)，對維(wei)護(hu)生(sheng)物(wu)多樣(yang)性(xing)具(ju)有(you)重要意義(yi)。
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