CiU草魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系
CiU草魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系作(zuo)為(wei)針對(dui)草(cao)魚輸(shu)尿管組織的(de)特異性(xing)細(xi)胞模型，在(zai)淡水(shui)魚類(lei)泌尿系(xi)統研究及病害防(fang)控(kong)領(ling)域具(ju)有(you)重(zhong)要(yao)意(yi)義。它的建立為(wei)深(shen)入(ru)探索草魚輸(shu)尿管的生理(li)功(gong)能(neng)、病理(li)變(bian)化(hua)以及病原體(ti)感染(ran)機(ji)制(zhi)等(deng)提供了(le)穩(wen)定的體(ti)外研究(jiu)平臺(tai)，對(dui)草(cao)魚養(yang)殖產(chan)業的健康(kang)發(fa)展助(zhu)力(li)良(liang)多(duo)。
草(cao)魚是(shi)我國重要的(de)淡水(shui)養(yang)殖魚類(lei)，養殖歷史(shi)悠久(jiu)，產(chan)量(liang)高，在(zai)淡水(shui)漁業中占(zhan)據(ju)重(zhong)要(yao)地位。然而(er)，在(zai)養殖(zhi)過(guo)程(cheng)中(zhong)，草魚的(de)泌尿系(xi)統易受(shou)多(duo)種(zhong)病原體(ti)侵襲，引(yin)發(fa)輸(shu)尿(niao)管(guan)相關(guan)疾病，影響(xiang)草(cao)魚的(de)生長和存(cun)活(huo)，給(gei)養殖(zhi)產(chan)業帶來(lai)損(sun)失(shi)。輸(shu)尿(niao)管作(zuo)為(wei)魚類(lei)泌尿系(xi)統的重要組成部(bu)分，承擔著(zhe)輸送(song)尿(niao)液、維持(chi)體(ti)內(nei)水鹽(yan)平衡(heng)等(deng)重要(yao)功(gong)能(neng)，其組織細(xi)胞的正常(chang)生理(li)狀(zhuang)態對(dui)草(cao)魚的(de)健康(kang)至關(guan)重要。因(yin)此(ci)，建立 CiU 草(cao)魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系，對(dui)於研究(jiu)草(cao)魚泌尿系(xi)統的生理(li)機(ji)制(zhi)和(he)疾(ji)病防(fang)控(kong)具(ju)有(you)重(zhong)要(yao)的(de)理(li)論(lun)和實踐價(jia)值(zhi)。
CiU 草魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系的建立經(jing)過(guo)了(le)嚴謹(jin)的操(cao)作(zuo)流(liu)程(cheng)。選(xuan)取(qu)健康(kang)的草(cao)魚，經(jing)嚴格的無(wu)菌處(chu)理(li)後(hou)，在(zai)超凈工(gong)作(zuo)臺(tai)中(zhong)解(jie)剖分(fen)離出輸尿(niao)管組織。將(jiang)輸尿管組zhi剪碎(sui)成細(xi)小的組織塊(kuai)，用含(han)抗菌(jun)成分的緩沖(chong)液反復沖(chong)洗(xi)，以去除雜質和血細(xi)胞。隨(sui)後(hou)加入(ru)細(xi)胞分(fen)散液處理(li) 25-35 分(fen)鐘，使(shi)細胞(bao)充分分散。收集細胞(bao)懸液，經濾網(wang)過(guo)濾後(hou)離心純化(hua)，用(yong)含(han) 10%-15% 胎牛(niu)血清(qing)的 M199 培養(yang)液重懸細胞(bao)，接種(zhong)到(dao)培養(yang)瓶中，置於 25-28℃恒溫(wen)培養(yang)箱中進(jin)行原代培養(yang)。培養(yang)初期(qi)，每 2-3 天(tian)更(geng)換(huan)壹次(ci)培養(yang)液，待(dai)細(xi)胞(bao)匯(hui)合度(du)達到(dao) 60%-80% 時進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。目(mu)前(qian)，該細胞(bao)系(xi)已穩(wen)定傳代(dai)至 40 代以上，細胞活(huo)力保持(chi)良好。
該(gai)細(xi)胞系(xi)具有(you)典型的上(shang)皮樣(yang)細(xi)胞形(xing)態特(te)征(zheng)，細(xi)胞呈多(duo)邊形(xing)，排列(lie)緊密(mi)，具有(you)明(ming)顯的貼壁生長特性(xing)。生(sheng)長特性(xing)研(yan)究表明(ming)，CiU 細(xi)胞(bao)在(zai) M199 培養(yang)液中生長狀態(tai)優良，最(zui)適培養(yang)溫(wen)度(du)為 26-27℃，與草魚的(de)適宜生存(cun)水(shui)溫(wen)相適應(ying)。當(dang)胎(tai)牛血清(qing)濃度(du)為 12% 時，細胞(bao)增(zeng)殖(zhi)速度(du)較快(kuai)，群體(ti)倍增(zeng)時間約(yue)為(wei) 60 小時。傳代(dai)至 30 代後(hou)，細胞的形(xing)態和(he)增(zeng)殖(zhi)能力依然穩(wen)定，核(he)型分析顯示(shi)其染色(se)體(ti)數(shu)目(mu)正常(chang)，遺傳(chuan)穩(wen)定性較(jiao)好(hao)。
在(zai)功(gong)能(neng)特(te)性(xing)方(fang)面(mian)，CiU 草(cao)魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系展現出與輸尿(niao)管組織細(xi)胞相關(guan)的功(gong)能(neng)。通(tong)過(guo)相關(guan)實驗發(fa)現，該細胞(bao)能(neng)夠(gou)分泌壹些(xie)與水鹽(yan)代謝相關(guan)的物質，參(can)與維持(chi)體(ti)內(nei)的水鹽(yan)平衡(heng)調節(jie)。同時，在(zai)受(shou)到(dao)某(mou)些(xie)病原體(ti)刺(ci)激時，細胞(bao)會出現相應的(de)形(xing)態變(bian)化(hua)和(he)功(gong)能(neng)響(xiang)應(ying)，表明(ming)其在(zai)抵禦(yu)病原體(ti)入(ru)侵方面(mian)可能(neng)發(fa)揮壹(yi)定作(zuo)用(yong)。此(ci)外，該細(xi)胞系(xi)對(dui)草(cao)魚常(chang)見的(de)泌尿系(xi)統病原體(ti)具(ju)有(you)壹(yi)定的敏(min)感性(xing)，感染(ran)後(hou)會呈(cheng)現出特定的細(xi)胞(bao)病變(bian)，為研(yan)究(jiu)這(zhe)些(xie)病原體(ti)與輸尿(niao)管組織細(xi)胞的相互作(zuo)用(yong)機(ji)制(zhi)提供了(le)理(li)想的模(mo)型。
CiU 草魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系在(zai)多(duo)個(ge)研究領域有(you)著(zhe)廣(guang)泛的應(ying)用(yong)。在(zai)泌尿系(xi)統生理(li)機(ji)制(zhi)研(yan)究(jiu)中(zhong)，利(li)用(yong)該(gai)細胞系(xi)探究(jiu)了(le)草魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞在(zai)水鹽(yan)代謝調節(jie)中的(de)作(zuo)用(yong)機(ji)制(zhi)，為(wei)理(li)解(jie)魚類(lei)泌尿系(xi)統的生理(li)功(gong)能(neng)提供了(le)重要(yao)依據；在(zai)病原體(ti)致(zhi)病機(ji)制(zhi)研(yan)究(jiu)方(fang)面，通(tong)過(guo)分(fen)析病原體(ti)對(dui)該(gai)細(xi)胞(bao)的(de)感染(ran)過(guo)程(cheng)，明(ming)確(que)了(le)多(duo)種(zhong)病原體(ti)導致輸尿(niao)管(guan)病變(bian)的關(guan)鍵(jian)環(huan)節(jie)；在(zai)漁藥篩選(xuan)中，建立了(le)基(ji)於細胞(bao)活(huo)性和(he)功(gong)能(neng)變(bian)化(hua)的(de)藥(yao)物(wu)評價(jia)模(mo)型，已篩(shai)選(xuan)出多(duo)種(zhong)對(dui)草(cao)魚輸(shu)尿管疾病有(you)潛(qian)在(zai)治療(liao)效果(guo)的(de)藥(yao)物(wu)。
作(zuo)為(wei)穩(wen)定建立的(de)草(cao)魚輸(shu)尿管組織細(xi)胞系，CiU 不僅填(tian)bu了(le)草魚泌尿系(xi)統細胞模型的空(kong)白，更(geng)為淡水(shui)魚類(lei)泌尿系(xi)統研究提供了(le)重要(yao)工具(ju)，為草魚泌尿系(xi)統疾病的有(you)效(xiao)防(fang)控(kong)和(he)健康(kang)養殖(zhi)提供了(le)堅(jian)實的(de)理(li)論(lun)基(ji)礎和(he)技術(shu)支(zhi)持(chi)。
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