CiBA草魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi)
CiBA草魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi)作(zuo)為(wei)針(zhen)對草(cao)魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織的特(te)異性(xing)細(xi)胞模(mo)型(xing),在(zai)淡(dan)水(shui)魚類(lei)心血(xue)管系(xi)統研(yan)究及相關疾(ji)病防控領域具(ju)有不可(ke)替代的價值。它的建(jian)立為(wei)深(shen)入探究草(cao)魚動脈(mai)球(qiu)的生(sheng)理功(gong)能(neng)、病理(li)變(bian)化(hua)以(yi)及心血(xue)管相關疾(ji)病的發(fa)病機(ji)制等(deng)提(ti)供(gong)了(le)穩定的體(ti)外研(yan)究平(ping)臺(tai),對草(cao)魚養(yang)殖(zhi)產業的健(jian)康發(fa)展(zhan)意義(yi)深遠。
草(cao)魚作(zuo)為(wei)我國淡(dan)水(shui)養(yang)殖(zhi)的重要品種,其生(sheng)長(chang)狀況(kuang)與心血(xue)管系(xi)統的正(zheng)常(chang)運作(zuo)密切相關。動脈(mai)球(qiu)是硬(ying)骨魚類(lei)心臟(zang)發出(chu)的大(da)動脈(mai)起(qi)始(shi)處(chu)的膨大部(bu)分,具(ju)有緩沖血(xue)壓、調(tiao)節(jie)血(xue)流(liu)的重要功(gong)能(neng),對維持魚類(lei)血(xue)液循環(huan)的穩定起(qi)著(zhe)關(guan)鍵(jian)作(zuo)用(yong)。然而(er),在(zai)養(yang)殖(zhi)過(guo)程(cheng)中,草(cao)魚常(chang)因(yin)環(huan)境變(bian)化(hua)、病原(yuan)體(ti)感(gan)染(ran)等(deng)因素(su)導致(zhi)心血(xue)管系(xi)統出現(xian)異常(chang),影(ying)響(xiang)其生(sheng)長(chang)甚至(zhi)存活(huo)。因(yin)此(ci),建(jian)立 CiBA 草(cao)魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi),對於(yu)研(yan)究草(cao)魚心血(xue)管系(xi)統的生(sheng)理機(ji)制和相關疾(ji)病的防控具(ju)有重要的理(li)論和實踐意義(yi)。
CiBA 草魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi)的建(jian)立經過(guo)了(le)嚴(yan)謹(jin)細(xi)致(zhi)的操(cao)作(zuo)流(liu)程(cheng)。選(xuan)取(qu)健(jian)康(kang)的成(cheng)年草魚,經嚴(yan)格的無(wu)菌處(chu)理(li)後(hou),在(zai)超凈工作(zuo)臺(tai)中(zhong)解(jie)剖分離出動脈(mai)球(qiu)組(zu)織。將(jiang)動脈(mai)球(qiu)組(zu)zhi剪(jian)碎成(cheng)細(xi)小的組(zu)織塊(kuai),用(yong)含抗菌成分的緩沖液反(fan)復(fu)沖洗(xi),以(yi)去(qu)除(chu)雜(za)質和血(xue)細(xi)胞。隨後加入細(xi)胞分散(san)液處(chu)理(li) 30-40 分鐘(zhong),使細(xi)胞充(chong)分分散(san)。收集(ji)細(xi)胞懸(xuan)液,經濾(lv)網(wang)過(guo)濾(lv)後(hou)離心純化(hua),用(yong)含 10%-15% 胎(tai)牛(niu)血(xue)清的 M199 培(pei)養(yang)液重懸(xuan)細(xi)胞,接種到(dao)培養(yang)瓶(ping)中,置(zhi)於 25-28℃恒(heng)溫培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)原(yuan)代培(pei)養(yang)。培(pei)養(yang)初(chu)期,每(mei) 2-3 天(tian)更(geng)換壹次培(pei)養(yang)液,待細(xi)胞匯(hui)合度(du)達到(dao) 60%-80% 時(shi)進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。目(mu)前,該細(xi)胞系(xi)已(yi)穩定傳代至(zhi) 40 代以(yi)上,細(xi)胞活(huo)力(li)保(bao)持良好。
該細(xi)胞系(xi)具(ju)有典型(xing)的上(shang)皮樣(yang)細(xi)胞形(xing)態特(te)征,細(xi)胞呈(cheng)多邊形,排(pai)列緊密,具(ju)有明顯(xian)的貼(tie)壁生(sheng)長特(te)性。生(sheng)長(chang)特(te)性研(yan)究表明,CiBA 細(xi)胞在(zai) M199 培(pei)養(yang)液中(zhong)生長(chang)狀態(tai)優良,最適(shi)培養(yang)溫(wen)度(du)為(wei) 26-27℃,與草(cao)魚的適(shi)宜(yi)生存水(shui)溫(wen)相適(shi)應(ying)。當(dang)胎(tai)牛血(xue)清濃度(du)為(wei) 12% 時(shi),細(xi)胞增(zeng)殖(zhi)速度(du)較快,群(qun)體(ti)倍(bei)增(zeng)時(shi)間約(yue)為(wei) 65 小時(shi)。傳代至(zhi) 30 代後(hou),細(xi)胞的形(xing)態和增(zeng)殖(zhi)能(neng)力(li)依(yi)然穩定,核(he)型(xing)分析(xi)顯(xian)示其染(ran)色(se)體數(shu)目(mu)正(zheng)常(chang),遺傳穩定性較好。
在(zai)功(gong)能(neng)特(te)性方(fang)面(mian),CiBA 草(cao)魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi)展現出(chu)與動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞相關的功(gong)能(neng)。通過(guo)相關實驗發現(xian),該細(xi)胞能(neng)夠(gou)分泌(mi)壹些(xie)與血(xue)管舒(shu)張(zhang)、收縮(suo)相關的活(huo)性(xing)物(wu)質,參與血(xue)壓的調(tiao)節過(guo)程(cheng)。同(tong)時(shi),在(zai)受(shou)到(dao)某(mou)些(xie)心血(xue)管疾(ji)病相關病原(yuan)體(ti)刺激時(shi),細(xi)胞會(hui)出現(xian)相應(ying)的形(xing)態變(bian)化(hua)和功(gong)能(neng)異常(chang),為(wei)研(yan)究這些(xie)病原(yuan)體(ti)對動脈(mai)球(qiu)組(zu)織的損傷機(ji)制提(ti)供(gong)了(le)理(li)想的模(mo)型(xing)。此(ci)外,該細(xi)胞系(xi)對影(ying)響(xiang)心血(xue)管功(gong)能(neng)的環(huan)境因(yin)素(su)較為(wei)敏(min)感(gan),在(zai)溫(wen)度(du)驟變(bian)、水(shui)質惡化(hua)等(deng)條(tiao)件(jian)下,細(xi)胞的活(huo)性(xing)和功(gong)能(neng)會發(fa)生(sheng)顯(xian)著(zhu)變(bian)化(hua),為(wei)研(yan)究環(huan)境因(yin)素(su)對草(cao)魚心血(xue)管系(xi)統的影(ying)響(xiang)機(ji)制提(ti)供(gong)了(le)重要的實驗材料(liao)。
CiBA 草魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi)在(zai)多個研(yan)究領(ling)域有著(zhe)廣泛(fan)的應(ying)用(yong)。在(zai)心血(xue)管生(sheng)理(li)機(ji)制研(yan)究中(zhong),利(li)用(yong)該細(xi)胞系(xi)探究了(le)草(cao)魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞在(zai)血(xue)壓調(tiao)節(jie)、血(xue)流(liu)維持中的作(zuo)用(yong)機(ji)制,為(wei)理(li)解(jie)魚類(lei)心血(xue)管系(xi)統的生(sheng)理功(gong)能(neng)提(ti)供(gong)了(le)重要依(yi)據;在(zai)心血(xue)管疾(ji)病致(zhi)病機(ji)制研(yan)究方(fang)面(mian),通過(guo)分析(xi)病原(yuan)體(ti)對該細(xi)胞的感(gan)染(ran)過(guo)程(cheng),明確(que)了(le)多種病原(yuan)體(ti)導致(zhi)動脈(mai)球(qiu)病變(bian)的關(guan)鍵(jian)環(huan)節(jie);在(zai)漁(yu)藥篩選(xuan)中,建(jian)立了(le)基(ji)於細(xi)胞活(huo)性(xing)和功(gong)能(neng)變(bian)化(hua)的藥(yao)物評價模型(xing),已(yi)篩(shai)選(xuan)出多種對草(cao)魚心血(xue)管疾(ji)病有潛(qian)在(zai)治療效(xiao)果(guo)的藥(yao)物。
作(zuo)為(wei)穩定建(jian)立的草(cao)魚動脈(mai)球(qiu)組(zu)織細(xi)胞系(xi),CiBA 不僅填bu了草魚心血(xue)管研(yan)究細(xi)胞模(mo)型(xing)的空(kong)白(bai),更(geng)為(wei)淡(dan)水(shui)魚類(lei)心血(xue)管生(sheng)物(wu)學研(yan)究提(ti)供(gong)了(le)重要工具(ju),為(wei)草(cao)魚心血(xue)管疾(ji)病的有效(xiao)防控和健康(kang)養(yang)殖(zhi)提(ti)供(gong)了(le)堅(jian)實的理(li)論基(ji)礎和技術(shu)支持。
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