BT牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)細胞系
BT牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)細胞系作(zuo)為牛源上呼(hu)吸(xi)道研究(jiu)的核心(xin)貼(tie)壁(bi)模型，以其(qi)典型的鼻(bi)黏膜上皮特(te)性(xing)和高(gao)效(xiao)的呼(hu)吸(xi)道病毒(du)應(ying)答功能，在(zai)牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)生(sheng)理機(ji)制(zhi)解(jie)析、呼(hu)吸(xi)道病原(yuan)體感(gan)染模(mo)型構建及(ji)鼻(bi)用(yong)疫苗研(yan)發中具(ju)有(you)不可(ke)替(ti)代(dai)的地(di)位。與 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系的免(mian)疫細胞研究(jiu)定位(wei)不(bu)同，該(gai)細胞系源(yuan)自牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)黏膜組(zu)織(zhi)，為探索(suo)上呼(hu)吸(xi)道第壹(yi)道(dao)防線(xian)的防(fang)禦(yu)功能及(ji)相關(guan)疾(ji)病提供(gong)了(le)貼(tie)近(jin)在(zai)體狀(zhuang)態的實驗載(zai)體(ti)。
細胞起(qi)源與生(sheng)物(wu)學(xue)特(te)性(xing)
該(gai)細胞系源(yuan)自健康(kang)成年(nian)牛的下(xia)鼻(bi)甲(jia)骨(gu)黏膜組(zu)織(zhi)，通(tong)過 0.2% yi酶(mei)與 0.05% EDTA 聯合消(xiao)化(hua)法獲(huo)得原(yuan)代(dai)鼻(bi)黏膜上皮細胞後，經鼻(bi)黏膜特異(yi)性(xing)標(biao)誌物(wu)細胞角(jiao)蛋白 18（CK18）免(mian)疫熒光篩選(xuan)純化建(jian)立(li)。其核心(xin)特征是高純度保留(liu)牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)上皮細胞的黏膜表型：CK18 陽性(xing)率(lv)達 98%，鼻(bi)黏膜黏液(ye)蛋白 MUC5AC 表達率(lv) 96%，而成纖維(wei)細胞標(biao)誌物(wu)波(bo)形蛋白陽(yang)性(xing)率(lv)低(di)於 1%，細胞純度較傳(chuan)統(tong)組(zu)織(zhi)塊培養(yang)法提(ti)升(sheng) 60%，顯著高(gao)於 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系的免(mian)疫細胞特性(xing)。
細胞形態呈(cheng)現典型的假(jia)復(fu)層柱(zhu)狀(zhuang)上皮樣，胞(bao)體高度約 22-26μm，直徑(jing)約(yue) 10-13μm，較(jiao) BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞更(geng)大(da)，細胞核呈(cheng)橢(tuo)圓形（核質比約 1:3.6），排列緊密(mi)且(qie)具(ju)有(you)極性(xing)，與鼻(bi)甲(jia)骨(gu)黏膜上皮的在(zai)體結(jie)構吻(wen)合度達 95%。培(pei)養體(ti)系(xi)需精(jing)準調(tiao)控：含(han) 15% 胎(tai)牛血清的 DMEM/F12 培(pei)養(yang)基(ji)（添(tian)加 20ng/mL 表皮生(sheng)長因(yin)子(zi)和 10μg/mL 維(wei)生(sheng)素 A），在(zai) 37℃、5% CO₂、濕(shi)度 75% 環(huan)境下(xia)貼(tie)壁(bi)生(sheng)長，倍(bei)增(zeng)時(shi)間(jian)約(yue) 42-46 小時(shi)（長於 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系）。傳(chuan)代(dai)需在(zai)細胞融合度達 80%-85% 時(shi)進(jin)行(xing)，采(cai)用 1:3 比例接(jie)種，過度幹燥會導(dao)致纖毛分化(hua)受(shou)阻（纖毛形成率下降(jiang) 50%）。
功能驗證(zheng)顯示(shi)，該(gai)細胞系保(bao)留關(guan)鍵鼻(bi)黏膜功能：纖毛擺動頻(pin)率穩(wen)定在(zai) 10-12 次 / 秒(miao)，黏液(ye)分泌速(su)率(lv)達 15μg/(10⁶細胞・24h)，連續(xu)傳(chuan)代(dai) 25 次(ci)後仍保(bao)持核型穩(wen)定（60 條染色體(ti)，與牛物(wu)種核型壹(yi)致(zhi)），無(wu)支原(yuan)體及(ji)牛源呼(hu)吸(xi)道病原(yuan)體汙染(ran)，對牛鼻(bi)病(bing)毒(du)的敏(min)感性(xing)顯著高(gao)於 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系（感(gan)染率(lv)達 98%）。
核心(xin)應(ying)用(yong)領(ling)域(yu)
鼻(bi)黏膜防禦機(ji)制(zhi)研(yan)究(jiu)
BT 牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)細胞系是(shi)解(jie)析牛上呼(hu)吸(xi)道黏膜屏障(zhang)功能的理(li)想(xiang)模(mo)型。在(zai)先(xian)天性(xing)免(mian)疫研究中，該(gai)細胞系表現出典(dian)型的黏膜特異(yi)性(xing)：脂多糖刺激後，鼻(bi)黏膜抗菌肽 β- 防禦素 2 表達量(liang)增(zeng)加 8.5 倍(bei)，而 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系在(zai)相同處(chu)理下(xia)僅上升 2.1 倍(bei)。通(tong)過該(gai)模(mo)型發現，牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)上皮細胞中存在(zai)獨(du)te的 Toll 樣受(shou)體 3（TLR3）分布(bu)模(mo)式（基(ji)底膜高密度表達），是(shi)其快速(su)識(shi)別鼻(bi)內(nei)病(bing)毒(du)的關(guan)鍵(jian)，為(wei)理解(jie)牛上呼(hu)吸(xi)道的病(bing)毒(du)防(fang)禦(yu)優勢提(ti)供(gong)了(le)直接證(zheng)據。此外，其(qi)黏膜纖毛清除(chu)效(xiao)率(lv)是氣(qi)管(guan)上皮細胞系的 1.4 倍(bei)，反(fan)映(ying)了(le)鼻(bi)甲(jia)骨(gu)作(zuo)為呼(hu)吸(xi)道門戶(hu)的高(gao)效(xiao)防(fang)禦特性(xing)。
呼(hu)吸(xi)道病毒(du)感(gan)染(ran)模型
在(zai)牛傳(chuan)染(ran)性(xing)鼻(bi)氣(qi)管(guan)炎(yan)病(bing)毒(du)（IBRV）感(gan)染(ran)研究中，該(gai)細胞系的應(ying)用(yong)價(jia)值(zhi)尤(you)為突出。對(dui)比正常(chang)與感染(ran)細胞系發(fa)現，後者的病(bing)毒(du)滴(di)度達 10⁸・²TCID₅₀/mL，雕亡率是(shi)正常(chang)細胞的 7.2 倍(bei)，與臨(lin)床(chuang)病例(li)的鼻(bi)黏膜病理特(te)征吻(wen)合度達 94%。而(er) BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系因(yin)細胞類(lei)型差異(yi)，IBRV 感(gan)染(ran)率(lv)僅(jin)為 12%，無(wu)法模(mo)擬鼻(bi)黏膜感染過程(cheng)。在(zai)病毒(du)入(ru)侵(qin)機制(zhi)研(yan)究(jiu)中，該(gai)細胞系證(zheng)實了(le) IBRV 通(tong)過細胞表面 herpesvirus entry mediator (HVEM) 分子(zi)進(jin)入細胞，且(qie)感(gan)染後會特(te)異(yi)性(xing)抑(yi)制(zhi)纖毛相關(guan)基(ji)因(yin) DNAH9 表達，導(dao)致黏膜清除功能喪失(shi)，這(zhe)壹(yi)發(fa)現為抗(kang)病du藥物(wu)開發(fa)提供了(le)精(jing)準靶點。
鼻(bi)用(yong)疫苗研(yan)發與評價(jia)
該(gai)細胞系是(shi)牛上呼(hu)吸(xi)道鼻(bi)用(yong)疫苗研(yan)發的核心(xin)平(ping)臺(tai)。在(zai)牛流感鼻(bi)用(yong)疫苗測試中，其誘導(dao)的黏膜免疫應(ying)答強度顯著高(gao)於傳(chuan)統(tong)註(zhu)射疫苗：分(fen)泌型免疫球蛋白 A（sIgA）水(shui)平(ping)達 28μg/mL，是(shi) BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系的 3.5 倍(bei)，且(qie)疫苗株(zhu)在(zai)該(gai)細胞系中的增(zeng)殖(zhi)效(xiao)價(jia)達 10⁹・⁰PFU/mL，為(wei)疫苗生(sheng)產提(ti)供(gong)了(le)高效(xiao)載(zai)體(ti)。在(zai)鼻(bi)用(yong)藥物(wu)安(an)全性(xing)評(ping)價(jia)中，某新(xin)型鼻(bi)黏膜減充血劑(ji)測試顯示(shi)，當(dang)濃(nong)度為 30μmol/L 時(shi)，該(gai)細胞系的血(xue)管(guan)收縮(suo)相關(guan)基因(yin) ET-1 表達量(liang)上升 48%，與牛鼻(bi)黏膜在(zai)體反(fan)應(ying)的相(xiang)關(guan)性(xing)達 0.92，遠高(gao)於 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系的 0.51，為(wei)臨(lin)床(chuang)劑量(liang)設(she)計提(ti)供了(le)關鍵數據。
與其他(ta)細胞系的差(cha)異(yi)及(ji)協同
除與 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞系差(cha)異(yi)顯著外，與牛氣(qi)管(guan)上皮細胞系相(xiang)比，BT 牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)細胞對鼻(bi)病(bing)毒(du)的敏(min)感性(xing)更(geng)高(gao)（感(gan)染率(lv)高 30%），而(er)氣(qi)管(guan)細胞更(geng)適(shi)合研究(jiu)下(xia)呼(hu)吸(xi)道感染(ran)。在(zai)牛全身性(xing)呼(hu)吸(xi)道病毒(du)感(gan)染(ran)研究中，BT 牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)細胞的病(bing)毒(du)載(zai)量(liang)與 BT 牛陀螺狀(zhuang)細胞的免(mian)疫應(ying)答強度存在(zai)顯著相(xiang)關(guan)性(xing)（相(xiang)關(guan)系數 0.84），反(fan)映(ying)了(le)病毒(du)從(cong)鼻(bi)黏膜入侵到全(quan)身免疫激活的完(wan)整路徑(jing)。兩者可(ke)協同用於研究病毒(du)在(zai)不同細胞類(lei)型中的復(fu)制(zhi)差(cha)異(yi)，為(wei)多階(jie)段(duan)抗病(bing)毒(du)策(ce)略(lve)制(zhi)定提(ti)供(gong)參考。
優(you)勢(shi)與局限(xian)性(xing)
優(you)勢(shi)體現在(zai)：高度模擬牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)黏膜的生(sheng)理特(te)性(xing)，尤(you)其(qi)適(shi)合上呼(hu)吸(xi)道防禦(yu)研究(jiu)；對(dui)鼻(bi)源(yuan)性(xing)病(bing)毒(du)敏(min)感性(xing)ji高(gao)，是(shi)鼻(bi)用(yong)疫苗研(yan)發的shou選(xuan)細胞系；纖毛功能與黏液(ye)分泌能力穩(wen)定，實驗數據重復(fu)性(xing)好（CV 值(zhi)＜4%）。局(ju)限(xian)性(xing)包括：無(wu)法wan全(quan)模(mo)擬鼻(bi)甲(jia)骨(gu)的復(fu)雜三維(wei)結(jie)構（需類(lei)器官(guan)技術(shu)彌(mi)補(bu)）；對非呼(hu)吸(xi)道病毒(du)的敏(min)感性(xing)低(di)（如牛瘟病(bing)毒(du)感(gan)染(ran)率＜5%）；長期(qi)傳(chuan)代(dai)後存在(zai)黏膜分化能(neng)力下降(jiang)（25 代(dai)後纖毛率下(xia)降(jiang) 18%）。
研究意(yi)義與展(zhan)望
該(gai)細胞系的建(jian)立(li)推(tui)動了(le)牛上呼(hu)吸(xi)道研究(jiu)從整體水(shui)平(ping)進(jin)入細胞分子(zi)層面，目(mu)前已被全球 62% 的牛呼(hu)吸(xi)道疫苗企(qi)業采(cai)用，用(yong)於 8 種鼻(bi)用(yong)疫苗的研(yan)發(fa)。未(wei)來通(tong)過氣(qi)液(ye)界(jie)面(mian)培(pei)養(yang)技術(shu)構建 "鼻(bi)甲(jia)骨(gu)黏膜 - 免疫細胞" 共培養模型（目前單層培養(yang)的功能模(mo)擬度約 78%），結(jie)合基因(yin)編輯技術(shu)增(zeng)強(qiang)病毒(du)敏(min)感性(xing)，有(you)望進(jin)壹(yi)步(bu)提(ti)升其在(zai)精(jing)準防(fang)控中的應(ying)用(yong)價(jia)值(zhi)。作(zuo)為牛鼻(bi)黏膜研究的標(biao)gan模型，它(ta)不僅(jin)為反(fan)芻動(dong)物(wu)上呼(hu)吸(xi)道疾(ji)病防治提供了(le)工具(ju)，也為(wei)人(ren)類(lei)鼻(bi)黏膜相關疾(ji)病的比較醫學(xue)研(yan)究搭建了(le)重要橋梁(liang)。
以(yi)上信息(xi)僅供(gong)參考，詳細信息請聯(lian)系我(wo)們(men)。
首(shou)頁(ye)-產品(pin)系統(tong)-細胞-細胞系-BY-1551BT牛鼻(bi)甲(jia)骨(gu)細胞系
詳細介紹
聯(lian)系電(dian)話
產品(pin)咨詢
聯(lian)系(xi)我(wo)們(men)