MDCK-XF02犬(quan)腎細胞系為穩定表(biao)達(da)幹擾素調(tiao)節(jie)因子的上皮(pi)細胞系，貼壁(bi)生(sheng)長，增(zeng)強(qiang)抗(kang)病毒(du)天然免(mian)疫(yi)應(ying)答(da)，適用(yong)於(yu)幹擾素通路(lu)、病毒(du)免(mian)疫(yi)逃逸及免(mian)疫(yi)增(zeng)強(qiang)藥(yao)物研(yan)究(jiu)。

幹擾素通路(lu)高效激(ji)活(huo)：IRF7 在病(bing)毒(du)感染後(hou)磷(lin)酸(suan)化(hua)水平提升 5 倍（野(ye)生(sheng)型 MDCK 為(wei) 2 倍，MDCK-G01 為 1.8 倍），可顯(xian)著促(cu)進(jin) I 型幹擾素（IFN-α/β）分(fen)泌，IFN-β 含量達 650pg/10⁶細胞 / 24h（是野(ye)生(sheng)型的(de) 3.2 倍，MDCK-G01 的 2.8 倍）；下遊抗(kang)病毒(du)基因（如 MX1、OAS1）的表(biao)達(da)量同步上調(tiao) 8-10 倍，形成強(qiang)效抗(kang)病毒(du)狀態，與 MDCK-G01 的糖(tang)基(ji)化(hua)調(tiao)控(kong)機制形成鮮明對(dui)比(bi)。

病(bing)毒(du)復(fu)制抑制能力(li)：對(dui)犬(quan)流感病毒(du)的抑制率(lv)達(da) 85%（野(ye)生(sheng)型為(wei) 30%，MDCK-G01 為 35%），病毒(du)復(fu)制周(zhou)期延長至(zhi) 28 小時(shi)（野(ye)生(sheng)型為(wei) 16 小時(shi)），培養(yang)上清(qing)中病毒(du)滴度降(jiang)至 10⁵.² TCID₅₀/mL（是野(ye)生(sheng)型的(de) 1/100）；對(dui)冠(guan)狀病毒(du)的抑制效果更(geng)顯(xian)著（抑制率(lv) 90%），但(dan)對(dui)已(yi)建立(li)復(fu)制的病毒(du)無清除作用(yong)（需(xu)依賴(lai)適應(ying)性(xing)免(mian)疫(yi)），體(ti)現天然免(mian)疫(yi)的(de)早(zao)期防禦特(te)征。

免(mian)疫(yi)信(xin)號(hao)協同作用(yong)：與(yu) MDCK-G01 的單壹(yi)功能不(bu)同，其 IRF7 可與 TLR3、RIG-I 等(deng)模式(shi)識別(bie)受(shou)體(ti)形成信(xin)號(hao)網(wang)絡(luo)，病毒(du)感染後(hou) NF-κB 通路(lu)激活(huo)效率(lv)提(ti)升(sheng) 40%，促(cu)炎(yan)因子（IL-6、TNF-α）分泌量達野(ye)生(sheng)型的(de) 2.5 倍，模擬了(le)腎臟(zang)上皮(pi)細胞在(zai)病毒(du)感染後(hou)的(de)完(wan)整(zheng)免(mian)疫(yi)應(ying)答(da)。

IRF7 介導的(de)抗(kang)病毒(du)信(xin)號(hao)軸：利用(yong) MDCK-XF02 細胞發(fa)現，IRF7 通過(guo)與 IFN-β 啟(qi)動子(zi)區(qu)域(yu)的(de) ISRE 元(yuan)件結合（結合效率(lv)是野(ye)生(sheng)型的(de) 3 倍），形成 “IRF7-IFN-β-IRF7" 正(zheng)反(fan)饋環(huan)路(lu)，該環(huan)路(lu)在感染後(hou) 6 小時(shi)達峰(feng)值（MDCK-G01 中因缺乏(fa) IRF7 過(guo)表(biao)達(da)無(wu)法(fa)觀(guan)察）；敲(qiao)除 IRF7 後(hou)，幹擾素分(fen)泌量下降(jiang) 80%，證實(shi)其(qi)在通路(lu)中的核(he)心作用(yong)。

病(bing)毒(du)對(dui)免(mian)疫(yi)通路(lu)的拮抗(kang)策略(lve)：通過(guo)對(dui)比(bi)實(shi)驗發現，犬(quan)瘟(wen)熱(re)病毒(du) V 蛋白可與 IRF7 直(zhi)接(jie)結(jie)合（結合常數 3.2×10⁻⁹M），抑制其核(he)轉(zhuan)移(yi)（核(he)內定位率(lv)從(cong) 65% 降(jiang)至 15%），而這種拮(jie)抗(kang)在 MDCK-G01 中因 IRF7 表(biao)達(da)量低(di)不(bu)易檢(jian)測，揭(jie)示(shi)病(bing)毒(du)免(mian)疫(yi)逃逸的關鍵(jian)機制。

幹擾素耐(nai)受株(zhu)篩選(xuan)：在 MDCK-XF02 中連續(xu)傳代(dai)流感病毒(du)，篩選(xuan)出(chu)可耐(nai)受高幹擾素環(huan)境的變(bian)異株，其(qi) NS1 蛋(dan)白發生(sheng) D92G 突變(bian)，可(ke)抑制 IRF7 磷酸(suan)化(hua)（效率(lv)下降(jiang) 50%），該突變(bian)株(zhu)在(zai)犬(quan)體(ti)內的(de)致(zhi)病(bing)性(xing)增強(qiang) 2 倍（與幹擾素逃逸能力(li)正(zheng)相關），為病(bing)毒(du)耐藥(yao)機制研究提供模型。

免(mian)疫(yi)壓力(li)下的(de)病(bing)毒(du)進化(hua)：通過(guo)高通量測序發現(xian)，長期在 MDCK-XF02 中培養(yang)的冠(guan)狀病毒(du)，其 ORF6 蛋白突變(bian)率(lv)是 MDCK-G01 中的 3 倍，這些突變(bian)可(ke)特(te)異性(xing)阻斷 IRF7 入核(he)（與(yu)流感病毒(du)的逃逸策略(lve)不(bu)同），體現不(bu)同病毒(du)對(dui)免(mian)疫(yi)壓力(li)的適應(ying)性(xing)差異。

IRF7 激活(huo)劑的(de)高(gao)通量篩選(xuan)：建立基(ji)於(yu) IFN-β 報告(gao)基(ji)因的篩選(xuan)模型，某天然(ran)產(chan)物可促(cu)進(jin) IRF7 磷酸(suan)化(hua)（提升(sheng) 2.3 倍），在 MDCK-XF02 中使幹擾素分(fen)泌量增加 1.8 倍，對(dui)流感病毒(du)的抑制率(lv)達(da) 90%（MDCK-G01 中因無 IRF7 過表(biao)達(da)，抑制率(lv)僅(jin) 45%）；動物(wu)實(shi)驗顯示(shi)該藥(yao)物可(ke)使(shi)犬(quan)的(de)病(bing)毒(du)清除時間縮短 1.5 天(tian)。

疫(yi)苗與(yu)免(mian)疫(yi)增(zeng)強(qiang)劑聯(lian)合應(ying)用(yong)：將(jiang) MDCK-G01 生(sheng)產的(de)疫苗與(yu) MDCK-XF02 篩選(xuan)的 IRF7 激活(huo)劑聯(lian)合使用(yong)，犬(quan)的(de)中和(he)抗(kang)體效價(jia)提升(sheng) 2.2 倍，且(qie) IFN-β 水(shui)平維(wei)持時間(jian)延(yan)長至(zhi) 14 天(tian)（單獨疫苗組(zu)為(wei) 7 天），解(jie)決(jue)了傳統(tong)疫(yi)苗在(zai)免(mian)疫(yi)低(di)下犬(quan)群中的效果不(bu)足問題(ti)。

優勢(shi)：

局(ju)限性(xing)：