TE671 subline No.2人橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)細胞系(xi)
TE671 subline No.2人橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)細胞系(xi)作為(wei)研究橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)的(de)關鍵(jian)模型(xing),自從人體(ti)腫瘤(liu)組(zu)織(zhi)中分離建(jian)立後,便在腫瘤(liu)研究領域占據重要(yao)地位。在顯(xian)微鏡下(xia),該(gai)細(xi)胞系呈現(xian)出du特(te)的(de)形(xing)態(tai)特(te)征(zheng),多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)呈梭(suo)形(xing),宛如細長(chang)的(de)柳(liu)葉,也有(you)部(bu)分細胞(bao)呈多(duo)邊(bian)形(xing),彼此(ci)相互交織(zhi),以束(shu)狀或(huo)漩渦狀(zhuang)的(de)形(xing)式(shi)生長(chang)。細胞(bao)胞(bao)質豐(feng)富,經染(ran)色後(hou)可(ke)見明顯(xian)的(de)肌(ji)絲樣(yang)結構(gou),暗示(shi)著(zhe)其(qi)肌(ji)肉細胞(bao)起源的(de)特(te)性(xing),細(xi)胞(bao)核大且不規(gui)則(ze),核仁(ren)清(qing)晰(xi),這些(xie)形(xing)態(tai)學(xue)特(te)征(zheng)與人體(ti)橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)組(zu)織(zhi)中的(de)癌(ai)細(xi)胞(bao)高度相(xiang)似,為(wei)科研人員研究細胞(bao)形(xing)態(tai)變(bian)化(hua)和(he)腫瘤(liu)發生發(fa)展過程(cheng)提供(gong)了直(zhi)觀(guan)樣(yang)本。
從生物(wu)學特(te)性(xing)來(lai)看(kan),TE671 subline No.2 細胞具有(you)很強(qiang)的(de)增(zeng)殖(zhi)和侵襲(xi)能力(li)。在增殖(zhi)方(fang)面,細(xi)胞周(zhou)期調控基因(yin)如 Cyclin D1、CDK4 的(de)異(yi)常高表達(da),打(da)破(po)了細(xi)胞正(zheng)常的(de)生(sheng)長(chang)周期調控機制,促(cu)使細胞(bao)周(zhou)期進(jin)程(cheng)加(jia)快,使(shi)得細胞(bao)能夠(gou)快速(su)且持續(xu)地分裂增(zeng)殖(zhi),為(wei)腫瘤(liu)的(de)快速(su)生(sheng)長(chang)提供(gong)了基(ji)礎。在侵襲(xi)轉移(yi)過程(cheng)中,該(gai)細(xi)胞能夠(gou)分泌多(duo)種(zhong)基(ji)質金屬(shu)蛋白(bai)酶(mei),如 MMP-2 和 MMP-9,這些(xie)蛋白(bai)酶(mei)能夠(gou)高效降解細(xi)胞(bao)外基質成分,破(po)壞(huai)細(xi)胞(bao)外(wai)基質構(gou)成的(de)天(tian)然(ran)屏障,幫(bang)助癌(ai)細(xi)胞(bao)突(tu)破(po)基底(di)膜,向周圍(wei)組(zu)織(zhi)浸(jin)潤(run)。同(tong)時(shi),細胞(bao)表面的(de)整(zheng)合素(su)家(jia)族蛋白(bai)表(biao)達上(shang)調,增強(qiang)了細(xi)胞(bao)與細胞(bao)外基(ji)質的(de)黏(nian)附與相互作用(yong),進(jin)壹(yi)步(bu)輔助癌(ai)細(xi)胞(bao)的(de)遷移(yi)。此(ci)外,TE671 subline No.2 細(xi)胞保(bao)留(liu)了(le)壹(yi)定的(de)橫(heng)紋肌(ji)細胞分化(hua)特(te)性(xing),表(biao)達(da)肌(ji)生成素(su)(Myogenin)、結蛋白(bai)(Desmin)等(deng)肌(ji)源性(xing)標(biao)誌物(wu),這些(xie)標(biao)誌物(wu)不僅是(shi)其(qi)細胞(bao)來源的(de)重(zhong)要(yao)證據(ju),也為(wei)研究橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)細胞的(de)分化(hua)調控機制提供(gong)了切(qie)入(ru)點。
在細胞(bao)培養(yang)過程(cheng)中,TE671 subline No.2 細(xi)胞(bao)對(dui)培養(yang)條(tiao)件(jian)有(you)著特(te)定要(yao)求。常用(yong)的(de)培(pei)養基為(wei)含(han) 10% 胎(tai)牛(niu)血清(qing)的(de) DMEM 培(pei)養基,胎(tai)牛(niu)血清(qing)中富(fu)含(han)細胞(bao)生長(chang)所需的(de)各(ge)類營養物(wu)質、生(sheng)長(chang)因子(zi)和(he)激(ji)素,能夠(gou)滿(man)足細胞(bao)的(de)生(sheng)長(chang)和代(dai)謝(xie)需求;同時(shi),在培養(yang)基中添(tian)加(jia) 1% 的(de)青(qing)mei素 - 鏈mei素雙(shuang)抗溶(rong)液,以防(fang)止細(xi)菌(jun)汙染(ran)。培(pei)養環(huan)境(jing)設(she)定為(wei) 37℃、5% 二氧(yang)化(hua)碳(tan)的(de)恒(heng)溫(wen)培(pei)養箱(xiang),在此(ci)條件(jian)下(xia),細(xi)胞(bao)呈貼(tie)壁生(sheng)長(chang)狀態(tai)。當細(xi)胞(bao)匯合度(du)達(da)到(dao) 80% - 90% 時(shi),需使用(yong) 0.25% 的(de)胰(yi)dan白酶(mei) - EDTA 消(xiao)化(hua)液進行傳代(dai)操(cao)作,消(xiao)化(hua)時(shi)要(yao)在顯(xian)微鏡下(xia)密(mi)切(qie)觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態(tai),避(bi)免(mian)過度消(xiao)化(hua)損(sun)傷細胞(bao),傳代(dai)比(bi)例(li)壹(yi)般(ban)為(wei) 1:3 - 1:4 。凍(dong)存(cun)時(shi),凍(dong)存(cun)液由(you) 90% 胎(tai)牛(niu)血清(qing)和 10% 二甲基(ji)亞(ya)碸(feng)組(zu)成,將細胞(bao)按照程(cheng)序(xu)降溫(wen)的(de)方(fang)法,先置(zhi)於 - 80℃冰(bing)箱(xiang)過夜,再(zai)轉移(yi)至(zhi)液氮中長(chang)期保(bao)存(cun),以此(ci)保(bao)證細(xi)胞的(de)活(huo)性(xing)和(he)生(sheng)物(wu)學特(te)性(xing)。
在科研應(ying)用(yong)領(ling)域,TE671 subline No.2 細胞系發揮著(zhe)不可替(ti)代(dai)的(de)作(zuo)用(yong)。在橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)發病機制研(yan)究中,科研人員通(tong)過基因(yin)編(bian)輯(ji)、RNA 幹擾(rao)等(deng)技(ji)術,在該(gai)細(xi)胞系上(shang)深入(ru)探(tan)究關鍵(jian)基因(yin)和(he)信(xin)號通(tong)路在腫瘤(liu)發生發(fa)展中的(de)作(zuo)用(yong),發(fa)現(xian) PI3K/AKT 信號(hao)通(tong)路的(de)異(yi)常激(ji)活(huo)與癌(ai)細(xi)胞(bao)的(de)增(zeng)殖(zhi)、存(cun)活密(mi)切(qie)相(xiang)關,為(wei)揭示(shi)疾(ji)病的(de)發(fa)病機制提供(gong)了重(zhong)要(yao)線索(suo)。在藥(yao)物(wu)研發(fa)方(fang)面,TE671 subline No.2 細(xi)胞系(xi)是(shi)篩選治(zhi)療橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)潛在藥(yao)物(wu)的(de)重(zhong)要(yao)模型(xing),可用(yong)於評估不同藥(yao)物(wu)對(dui)癌(ai)細(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)、雕亡、遷移(yi)和(he)侵襲(xi)的(de)影響,以及(ji)藥(yao)物(wu)的(de)毒(du)性(xing)和(he)副(fu)作用(yong)。例(li)如,新型(xing)的(de)靶(ba)向 MEK 的(de)抑(yi)制劑(ji)在 TE671 subline No.2 細胞(bao)實驗(yan)中,能(neng)夠(gou)顯(xian)著抑(yi)制細(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi),誘(you)導(dao)細胞雕亡,並(bing)降低細胞(bao)的(de)侵(qin)襲(xi)能力(li),為(wei)後續(xu)開(kai)展臨床試(shi)驗(yan)提供(gong)了有(you)力(li)的(de)理(li)論依據(ju)。此(ci)外,利用(yong)該(gai)細(xi)胞系開展的(de)腫瘤(liu)微環(huan)境(jing)相關研究,探(tan)索(suo)腫瘤(liu)細胞與周圍(wei)肌(ji)肉細胞(bao)、免疫細胞之(zhi)間(jian)的(de)相(xiang)互作用(yong),也有(you)助於開發更(geng)有(you)效的(de)治(zhi)療策(ce)略,推(tui)動橫(heng)紋肌(ji)肉瘤(liu)治療領(ling)域的(de)發(fa)展。
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