8C7抗(kang)犬MMP13雜(za)交(jiao)瘤細胞(bao)株(zhu)細胞(bao)系(xi)為(wei)分泌(mi)抗犬基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei) 13 單克(ke)隆抗(kang)體(ti)的細胞(bao)系(xi)，懸(xuan)浮(fu)生長(chang)，抗體(ti)特(te)異(yi)性強(qiang)，適用於(yu) MMP13 功(gong)能、疾病關聯及(ji)靶向(xiang)藥物(wu)研(yan)究。

抗(kang)體(ti)分泌(mi)與特(te)異(yi)性：分泌(mi)的單克(ke)隆抗(kang)體(ti)為(wei) IgG1 亞(ya)型，效價(jia)達(da) 1:10⁶（ELISA 檢(jian)測(ce)），與(yu)犬 MMP13 的結合(he)常(chang)數（Kd）為(wei) 3.2×10⁻⁹M（高(gao)親和力）；Western blot 顯(xian)示僅識別(bie)犬 MMP13（分子(zi)量(liang)約(yue) 54kDa），與(yu)其他犬 MMP 家(jia)族(zu)成(cheng)員(yuan)（如 MMP1、MMP2）無(wu)交(jiao)叉(cha)反應(ying)（交(jiao)叉(cha)率＜0.1%），與 Super Tube 表(biao)達(da)的腎小管蛋(dan)白(bai)無(wu)結(jie)合(he)，體(ti)現(xian)嚴格(ge)的抗原(yuan)特異(yi)性。

抗(kang)原(yuan)表(biao)位(wei)識(shi)別(bie)：通過(guo)肽(tai)段(duan)掃描(miao)確定(ding)其識別(bie)的表(biao)位(wei)為(wei)犬 MMP13 的 Pro 肽(tai)區(qu)（第(di) 45-62 位氨基酸(suan)），該區域為(wei)犬 MMP13  te有(you)（與(yu)其他物種(zhong)同源性＜50%），故(gu)不與(yu)人類、小鼠(shu) MMP13 交叉(cha)反應(ying)（物(wu)種(zhong)特異(yi)性）；該表(biao)位(wei)在 MMP13 活(huo)化(hua)過(guo)程中(zhong)會被剪切，因(yin)此(ci) 8C7 抗體(ti)可特(te)異(yi)性識(shi)別(bie)未活(huo)化(hua)的酶(mei)原形式（與識別(bie)活(huo)化(hua)形式的抗體(ti)形成(cheng)互(hu)補(bu)）。

抗體(ti)功(gong)能活(huo)性：可通過(guo) ELISA、免(mian)疫(yi)組化(hua)、流式(shi)細(xi)胞(bao)術(shu)等(deng)多(duo)種(zhong)方法檢測(ce)犬 MMP13，在夾(jia)心(xin) ELISA 中zui低(di)檢(jian)測(ce)限(xian)達(da) 0.5ng/mL（靈(ling)敏(min)度高(gao)）；在體(ti)外(wai)實驗中(zhong)，該抗體(ti)可抑(yi)制犬 MMP13 的膠原酶(mei)活(huo)性（抑(yi)制(zhi)率達(da) 72%，IC₅₀=0.8μg/mL），但不影(ying)響其他基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)的活(huo)性，體(ti)現(xian)功(gong)能阻斷作(zuo)用。

MMP13 在骨關節炎中的作(zuo)用：利(li)用(yong) 8C7 抗(kang)體(ti)檢(jian)測(ce)發(fa)現(xian)，犬骨關節炎模型(xing)的關節滑(hua)液(ye)中(zhong) MMP13 水平(ping)是正常(chang)犬的 4.8 倍（ELISA 定(ding)量(liang)），免(mian)疫(yi)組化(hua)顯(xian)示 MMP13 主要定(ding)位於(yu)軟骨細胞(bao)（陽性率(lv) 65%）；通過(guo)抗(kang)體(ti)阻斷實驗，在體(ti)外(wai)軟骨培養中添加(jia) 8C7 抗體(ti)可使 Ⅱ 型(xing)膠原降(jiang)解減(jian)少(shao) 58%（與(yu) Super Tube 的腎小管功(gong)能研(yan)究形成(cheng)不同(tong)疾病模型的應用(yong)對比(bi)），證實 MMP13 在軟骨降解(jie)中的關鍵作(zuo)用。

組(zu)織(zhi)特(te)異(yi)性表(biao)達(da)譜(pu)分析：通過(guo) Western blot 與(yu)免(mian)疫(yi)組化(hua)結(jie)合(he) 8C7 抗體(ti)，繪制犬正(zheng)常(chang)組織中(zhong) MMP13 的表(biao)達(da)圖(tu)譜(pu) —— 在關節軟骨、皮膚(fu)、肺臟(zang)中(zhong)低(di)表(biao)達(da)，在妊(ren)娠期子(zi)宮(gong)中(zhong)高(gao)表(biao)達(da)（是正常(chang)子(zi)宮(gong)的 3.2 倍），提(ti)示其在組(zu)織(zhi)重塑中的生理作(zuo)用；該結果為(wei)理解 MMP13 的組織(zhi)功能多(duo)樣性提(ti)供(gong)了(le)基礎(chu)數(shu)據。

骨關節炎的診(zhen)斷標誌(zhi)物驗證(zheng)：建(jian)立基於(yu) 8C7 抗(kang)體(ti)的 ELISA 檢測(ce)方(fang)法，對 120 例臨(lin)床犬的關節滑(hua)液(ye)樣(yang)本(ben)分析顯(xian)示，MMP13 水平(ping)與(yu)骨關節炎嚴重(zhong)程度呈(cheng)正相關（R²=0.78），診(zhen)斷靈敏(min)度達(da) 85%、特(te)異(yi)性達(da) 90%（優(you)於(yu)傳(chuan)統(tong)炎癥指(zhi)標）；縱(zong)向(xiang)監(jian)測(ce)顯(xian)示，患病犬經治(zhi)療(liao)後(hou) MMP13 水平(ping)下降(jiang)與(yu)臨(lin)床癥(zheng)狀改(gai)善同(tong)步(bu)（相關系(xi)數(shu) 0.82），證實其作(zuo)為(wei)療(liao)效評估(gu)指標的價(jia)值(zhi)。

腫(zhong)瘤(liu)侵襲(xi)機(ji)制(zhi)解析：在犬骨肉瘤(liu)模型(xing)中，8C7 抗體(ti)檢(jian)測(ce)發(fa)現(xian)腫(zhong)瘤(liu)組織(zhi)中 MMP13 表(biao)達(da)量(liang)是正常(chang)骨組織(zhi)的 7.5 倍，且(qie)與腫(zhong)瘤(liu)轉(zhuan)移呈(cheng)正相關（轉(zhuan)移組陽(yang)性率(lv) 92% vs 非轉(zhuan)移組 45%）；通過(guo)免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)結合(he)質譜(pu)分析，發現(xian) MMP13 可與(yu)整合(he)素(su) β1 相互(hu)作(zuo)用（促(cu)進(jin)腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)侵襲(xi)），而(er) 8C7 抗體(ti)可阻斷該相互(hu)作(zuo)用（侵襲(xi)抑(yi)制率(lv) 60%），揭示 MMP13 在腫(zhong)瘤(liu)轉(zhuan)移中的分子(zi)機(ji)制(zhi)。

藥(yao)物篩(shai)選(xuan)模型(xing)建(jian)立：利用(yong) 8C7 抗(kang)體(ti)的阻斷活(huo)性，建(jian)立基於(yu)細(xi)胞(bao)的高(gao)通量(liang)篩(shai)選(xuan)模型(xing)，篩選(xuan)可抑(yi)制 MMP13 活(huo)性的化(hua)合(he)物；某(mou)天(tian)然(ran)產(chan)物(wu)在該模型中(zhong)顯(xian)示 IC₅₀=1.2μM，且與(yu) 8C7 抗體(ti)聯用(yong)可使抑(yi)制率(lv)提(ti)升(sheng)至(zhi) 90%（協(xie)同效應），為(wei)藥(yao)物(wu)開(kai)發(fa)提(ti)供(gong)候(hou)選(xuan)分子(zi)。

治(zhi)療(liao)性抗(kang)體(ti)評估(gu)：通過(guo)基(ji)因(yin)工(gong)程改(gai)造 8C7 抗(kang)體(ti)（如人源化(hua)、Fc 段(duan)優(you)化(hua)），在犬骨關節炎模型(xing)中(zhong)顯(xian)示，每周註(zhu)射改(gai)造抗(kang)體(ti)可使關節軟骨損傷(shang)面積減(jian)少(shao) 65%，Ⅱ 型(xing)膠原含(han)量(liang)增(zeng)加(jia) 2.3 倍(bei)，且無(wu)明(ming)顯(xian)免(mian)疫(yi)原性（與(yu) Super Tube 用(yong)於(yu)腎(shen)臟(zang)藥(yao)物評估(gu)形成(cheng)不同(tong)靶點(dian)的應用(yong)案例），顯(xian)示其作(zuo)為(wei)治(zhi)療(liao)性抗(kang)體(ti)的潛力(li)。

優(you)勢(shi)：

局(ju)限(xian)性：