MDCK-hFcRn人(ren)FcRn過(guo)表(biao)達犬(quan)腎(shen)上皮細(xi)胞(bao)系，MDCK-hFcRn 為(wei)穩定表(biao)達人(ren) FcRn 的(de)犬(quan)腎(shen)上皮細(xi)胞(bao)系，貼壁(bi)生(sheng)長，強化(hua)抗(kang)體轉運(yun)與(yu)回收(shou)，適用(yong)於(yu)抗(kang)體藥(yao)代動力(li)學、FcRn 介導(dao)轉運(yun)及(ji)長(chang)效抗(kang)體篩選(xuan)研究(jiu)。

hFcRn 高表(biao)達與(yu)抗(kang)體(ti)結合能(neng)力：hFcRn 在(zai)細(xi)胞(bao)表(biao)面的(de)表(biao)達量達(da) 6.8×10⁴分(fen)子(zi) / 細胞（野生(sheng)型 MDCK 僅為(wei) 8×10³，MDCK-G1XF 幾(ji)乎(hu)不(bu)表(biao)達），在(zai)酸(suan)性(xing)條件（pH 6.0）下與(yu) IgG 的(de)結合(he)常數(shu)達(da) 1.2×10⁻⁸M（是(shi)野生(sheng)型的 10 倍），結合容量達(da) 2.5μg IgG/mg 細(xi)胞(bao)蛋白（可飽(bao)和）；與(yu) MDCK-G1XF 的(de)病(bing)毒(du)培(pei)養(yang)功(gong)能不(bu)同，其核心(xin)優(you)勢(shi)在(zai)於(yu)模(mo)擬人 FcRn 與(yu)抗體的(de)特(te)異性相互(hu)作用(yong)，pH 7.4 時抗體(ti)解(jie)離率達(da) 90%（符合(he)生(sheng)理(li)條件下的(de)轉運(yun)特(te)征）。

抗體轉運(yun)與(yu)回收(shou)功(gong)能：通(tong)過建立 Transwell 模(mo)型發現(xian)，該(gai)細胞(bao)系的 IgG 雙向轉運(yun)效率達(da) 15%/h（野(ye)生(sheng)型為(wei) 2%/h），且(qie)呈(cheng)現(xian) “酸性(xing)內(nei)體(ti)攝(she)取(qu) - 中(zhong)性環(huan)境釋放" 的(de)極(ji)性(xing)轉運(yun)特(te)征（ apical 側(ce)到(dao) basolateral 側(ce)的(de)轉運(yun)效率是(shi)反向(xiang)的(de) 3 倍）；對抗體的(de)回收(shou)半衰(shuai)期(qi)延(yan)長至(zhi) 36 小時（野生(sheng)型為(wei) 8 小時），模擬了人(ren)體內抗(kang)體(ti)通(tong)過 FcRn 循(xun)環(huan)延(yan)長半衰(shuai)期(qi)的過(guo)程(cheng)，回收(shou)效率達(da) 65%（遠高於其(qi)他上皮細(xi)胞(bao)系）。

Fc 結(jie)構依賴(lai)的特異性：僅與 IgG 類(lei)抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)（對 IgA、IgM 無顯著結(jie)合(he)），且結合(he)活性(xing)依(yi)賴(lai)於 IgG 的 Fc 片(pian)段(duan)（Fab 片(pian)段(duan)結合率＜5%）；對(dui)不(bu)同亞(ya)型 IgG 的結合力(li)存(cun)在(zai)差(cha)異（IgG1＞IgG2＞IgG4），與人(ren)體中(zhong)的結(jie)合偏好(hao)壹致(zhi)，可用(yong)於(yu)評(ping)估(gu)抗體(ti) Fc 區(qu)改(gai)造(zao)對轉運(yun)效率的(de)影(ying)響。

FcRn 介導(dao)的抗(kang)體(ti)循(xun)環(huan)機制(zhi)：利用(yong) MDCK-hFcRn 細(xi)胞(bao)發現(xian)，hFcRn 與 IgG 的(de)結(jie)合(he)可保護(hu)抗體(ti)免(mian)受(shou)溶(rong)酶(mei)體降解(jie)（降解(jie)率下降 70%），通(tong)過(guo)免(mian)疫共(gong)沈澱(dian)證(zheng)實兩(liang)者結合後(hou)會招(zhao)募分(fen)選(xuan)蛋白（sortilin），引(yin)導(dao)復合(he)物(wu)進入再循(xun)環(huan)內體(ti)（而(er)非(fei)降解(jie)途徑）；敲除(chu) hFcRn 後(hou)，抗(kang)體半衰(shuai)期(qi)從 36 小時縮短(duan)至(zhi) 6 小時，證(zheng)實其(qi)在(zai)抗(kang)體(ti)長(chang)效性(xing)中(zhong)的核心(xin)作用(yong)（該(gai)機制(zhi)在(zai) MDCK-G1XF 中(zhong)因(yin)無 hFcRn 表(biao)達無法(fa)研(yan)究）。

Fc 區(qu)修(xiu)飾(shi)對轉運(yun)的(de)影(ying)響：通過表(biao)達 Fc 區(qu)突(tu)變的抗體(ti)發(fa)現(xian)，N297A 突變(bian)（去(qu)糖基化）會使與 hFcRn 的(de)結(jie)合力(li)下降 80%，轉運(yun)效率降低(di) 65%；而(er) T250Q/M428L 雙突變(bian)可(ke)使結合(he)力(li)提(ti)升 2 倍，在(zai)該(gai)細胞(bao)系中(zhong)顯示轉運(yun)效率增(zeng)加(jia) 1.8 倍，與人體藥(yao)代動力(li)學數(shu)據高度(du)相關（R²=0.91），為(wei)長(chang)效抗(kang)體設(she)計(ji)提(ti)供(gong)量化(hua)依(yi)據。

高通量篩選(xuan) Fc 優(you)化抗(kang)體(ti)：建(jian)立基(ji)於(yu)熒光(guang)標(biao)記的(de)抗體轉運(yun)篩選(xuan)模型，對 100 種(zhong) Fc 突(tu)變體(ti)抗體(ti)進(jin)行(xing)評估(gu)，發現(xian)某突(tu)變(bian)體(ti)在(zai) MDCK-hFcRn 中(zhong)的回收(shou)效率達(da) 82%（野(ye)生(sheng)型 IgG 為(wei) 65%），在(zai)小鼠體(ti)內的(de)半衰(shuai)期(qi)延(yan)長至(zhi) 28 天(tian)（野生(sheng)型為(wei) 14 天(tian)）；篩選(xuan)效率是(shi)傳統動(dong)物(wu)實驗(yan)的(de) 30 倍，且成(cheng)本(ben)降低(di) 90%（無需大(da)規模(mo)動(dong)物(wu)飼養(yang)）。

抗(kang)體 - 藥(yao)物(wu)偶聯物(wu)（ADC）的 FcRn 兼容性(xing)評(ping)估(gu)：利用(yong)該(gai)細胞(bao)系發現(xian)，ADC 的連(lian)接子(zi)類(lei)型會影(ying)響與 hFcRn 的結(jie)合(he)，可降解(jie)連(lian)接子(zi)（如 val-cit）對結合的(de)幹(gan)擾(rao)率＜10%，而(er)不(bu)可降解(jie)連(lian)接子(zi)則達(da) 40%，導(dao)致(zhi) ADC 的轉運(yun)效率下降 35%，為(wei) ADC 設(she)計(ji)中(zhong)的 FcRn 兼(jian)容性(xing)優(you)化提(ti)供(gong)依(yi)據。

抗(kang)體(ti)純(chun)化(hua)工藝開(kai)發：利用(yong) hFcRn 對(dui) IgG 的(de)高特異性，可(ke)構建(jian)基於該(gai)細胞(bao)系的親和色(se)譜(pu)介質，對(dui)重(zhong)組抗(kang)體的純(chun)化(hua)純(chun)度(du)達(da) 99%（傳統 Protein A 柱為(wei) 95%），且(qie)可耐受(shou)更(geng)寬的(de) pH 範(fan)圍（pH 5.0-8.0），使用(yong)壽(shou)命延(yan)長至(zhi) 50 次(ci)（Protein A 柱為(wei) 20 次(ci)），尤其(qi)適合(he)高純(chun)度(du)治(zhi)療性(xing)抗(kang)體(ti)的純(chun)化(hua)。

抗(kang)體(ti)穩定性(xing)評估(gu)：在(zai)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)體(ti)系中(zhong)，MDCK-hFcRn 可模(mo)擬體內(nei)環(huan)境對抗體(ti)穩定性(xing)的影(ying)響，某抗 PD-1 抗(kang)體(ti)在(zai)該(gai)系統(tong)中(zhong) 4℃放置(zhi) 30 天的(de)聚合(he)率僅 5%（與人(ren)體(ti)血(xue)清(qing)中(zhong)結果(guo)壹致(zhi)），而(er)在(zai)普(pu)通緩(huan)沖液(ye)中(zhong)達 15%，為(wei)抗(kang)體儲存(cun)條件優(you)化提(ti)供(gong)更(geng)接近體(ti)內(nei)的評估(gu)模型。

優(you)勢(shi)：

局(ju)限(xian)性(xing)：