MDCK-G1XF犬(quan)腎(shen)懸浮細(xi)胞系為(wei)穩(wen)定表(biao)達(da) β4GalT1 的(de)懸浮生長(chang)細(xi)胞，強化糖基(ji)化(hua)與幹擾(rao)素通(tong)路，適(shi)用於(yu)病毒(du)大(da)規模(mo)培養、疫苗(miao)生產及糖免(mian)疫藥物(wu)研發。

糖基(ji)化(hua)與免(mian)疫調(tiao)控雙(shuang)強化：β4GalT1 活性達(da) 42U/mg 蛋(dan)白（與 MDCK-G1 相(xiang)當(dang)，是 MDCK-XF04 的(de) 2.6 倍），可促進(jin)病(bing)毒(du)蛋(dan)白雙(shuang)天線型(xing)糖鏈(lian)修(xiu)飾(shi)（比(bi)例 63%）；IRF9 介(jie)導(dao)的(de) ISG 表(biao)達(da)量是野生型(xing) MDCK 的(de) 5.5 倍（接近(jin) MDCK-XF04 水平），MX1 與 OAS1 等(deng)抗(kang)病毒蛋白含(han)量達(da) 38ng/10⁶細(xi)胞（是 MDCK-G1 的(de) 2.3 倍）。這種(zhong) “糖基(ji)化(hua)優化 - 免(mian)疫調(tiao)控" 的(de)協同(tong)作用(yong)，使(shi)病毒培養中糖蛋(dan)白完(wan)整性與復制(zhi)效率(lv)同步(bu)提升(sheng)。

懸浮培養的(de)病毒(du)支持能(neng)力(li)：對(dui)犬(quan)流感病毒的(de)培養滴(di)度達(da) 10⁹.⁰ TCID₅₀/mL（是貼壁(bi)型(xing) MDCK 的(de) 10 倍，MDCK-XF04 的(de) 3 倍），病毒(du)收獲時(shi)間(jian)提前(qian)至(zhi) 48 小時(shi)（貼壁(bi)型(xing)需(xu) 72 小時(shi)）；生產的(de)病毒(du)顆粒(li)中，HA 蛋白糖基(ji)化(hua)完整率(lv)達(da) 92%（MDCK-G1 貼壁(bi)培養為 85%），且(qie)因(yin) IRF9 調(tiao)控作用(yong)，病(bing)毒批間(jian)差(cha)異(yi)系(xi)數(shu)＜3%（傳統(tong)方(fang)法為 8%），滿足疫苗(miao)生產的(de)均壹(yi)性要(yao)求。

抗雕亡(wang)與代(dai)謝適(shi)應性：懸浮培養中抗(kang)雕亡(wang)基因(yin) Bcl-2 表(biao)達(da)量是貼壁(bi)型(xing)的(de) 2.1 倍，細(xi)胞存(cun)活率(lv)在(zai)高密(mi)度時(shi)仍達(da) 90%（MDCK-G1 貼壁(bi)培養為 70%）；葡(pu)萄(tao)糖消(xiao)耗(hao)速率(lv)優化為(wei) 1.2mg/10⁶細(xi)胞 / 天，乳酸積(ji)累(lei)量下降(jiang) 40%，可通(tong)過灌流培養實現(xian)連(lian)續(xu) 7 天(tian)的(de)病毒(du)生產（傳統(tong)批次(ci)培養僅(jin) 3 天(tian)）。

流感疫苗(miao)產業(ye)化(hua)優化：在(zai) 50L 生物(wu)反(fan)應器中(zhong)，MDCK-G1XF 的(de)病毒(du)產量達(da) 5.2×10¹¹ PFU（是貼壁(bi)培養的(de) 8 倍），HA 蛋白產量達(da) 1.8g/L（MDCK-XF04 貼壁(bi)培養為 0.5g/L）；生產的(de)疫苗(miao)經超(chao)速離(li)心(xin)純化後(hou)，糖基(ji)化(hua)模(mo)式與天(tian)然(ran)病毒(du)的(de)壹致(zhi)性達(da) 90%（傳統(tong)細(xi)胞為 75%），免(mian)疫小鼠後(hou)中(zhong)和抗體效(xiao)價(jia)提(ti)升(sheng) 1.5 倍，且(qie)生產成本降低 40%（因懸浮培養無(wu)需(xu)微(wei)載體）。

多(duo)價(jia)疫苗(miao)共培養生產：利用(yong)其對(dui)多(duo)種(zhong)病(bing)毒(du)的(de)支持能(neng)力(li)，可同時(shi)培養犬(quan)流感病毒與冠(guan)狀病毒(du)，兩種(zhong)病(bing)毒(du)滴(di)度分(fen)別達(da) 10⁸.⁸與 10⁸.⁵ TCID₅₀/mL（單獨(du)培養與共培養差(cha)異(yi)＜5%），解決(jue)了(le)傳統(tong)貼壁(bi)細(xi)胞共培養時(shi)病毒(du)幹擾(rao)的(de)問題，為多(duo)價(jia)疫苗(miao)生產提(ti)供(gong)高效(xiao)平臺(tai)。

病(bing)毒(du)樣(yang)顆粒(li)（VLP）制(zhi)備：表(biao)達(da)的(de)流感 VLP 在(zai)懸浮培養中產量達(da) 3.2×10¹⁰顆(ke)粒(li) /mL（是 MDCK-G1 的(de) 4 倍），因糖基(ji)化(hua)完整，VLP 與樹(shu)突(tu)狀細(xi)胞的(de)結合效率(lv)提升(sheng) 2 倍，作為(wei)疫苗(miao)佐(zuo)劑可使免(mian)疫應答增(zeng)強 3 倍（優於(yu)鋁佐(zuo)劑）；其懸浮培養特性適(shi)合連(lian)續(xu)流加(jia)生產，VLP 回收率(lv)達(da) 85%（傳統(tong)方(fang)法為 60%）。

糖蛋(dan)白藥物(wu)生產：通(tong)過基(ji)因編(bian)輯(ji)使(shi)其表(biao)達(da)犬(quan)幹擾(rao)素 -α，產物(wu)的(de) N - 糖鏈(lian)修(xiu)飾(shi)均(jun)壹(yi)性達(da) 90%（CHO 細(xi)胞為 70%），比(bi)活(huo)性達(da) 1.2×10⁸ IU/mg（是原核表(biao)達(da)的(de) 5 倍），且(qie)懸浮培養的(de)生產周(zhou)期縮(suo)短(duan)至(zhi) 5 天（CHO 細(xi)胞為 14 天(tian)），為(wei)獸用重(zhong)組蛋白藥物(wu)提供(gong)新生產系(xi)統(tong)。

大(da)規模(mo)篩選(xuan)糖基(ji)化(hua)抑制(zhi)劑：利用(yong) 96 孔(kong)懸浮培養板，可同時(shi)檢測 1000 種(zhong)化合物(wu)對病毒(du)糖基(ji)化(hua)的(de)影響(xiang)，某(mou)抑制(zhi)劑在(zai)該系(xi)統(tong)中顯(xian)示可特異性降低(di) HA 第(di) 183 位糖基(ji)化(hua)（抑制(zhi)率(lv) 70%），使病(bing)毒感染力(li)下(xia)降(jiang) 85%（結果(guo)與 MDCK-XF04 貼壁(bi)模(mo)型(xing)壹(yi)致(zhi)，但(dan)篩選(xuan)效率(lv)提升(sheng) 20 倍）。

免(mian)疫壓力(li)下(xia)的(de)糖基(ji)化(hua)進化：在(zai)連(lian)續(xu)懸浮培養中，流感病毒 HA 蛋(dan)白的(de)糖基(ji)化(hua)位點變(bian)異(yi)率(lv)是貼壁(bi)培養的(de) 1.5 倍，通(tong)過高通(tong)量測序發現，IRF9 過(guo)表(biao)達(da)可誘導(dao)病(bing)毒(du)選(xuan)擇(ze)保留免(mian)疫原(yuan)性強的(de)糖基(ji)化(hua)模(mo)式（與犬(quan)體內進(jin)化(hua)趨勢(shi)壹致），為疫苗(miao)株(zhu)篩選提供(gong)預測模(mo)型(xing)。

優勢：

局(ju)限(xian)性：