MDCK-G1犬(quan)腎細胞系為穩定表(biao)達特(te)定糖(tang)蛋白的(de)上(shang)皮(pi)細胞(bao)系，貼壁生(sheng)長(chang)，增(zeng)強病(bing)毒糖基(ji)化(hua)相(xiang)關互作(zuo)，適(shi)用於(yu)病(bing)毒糖基(ji)化(hua)機制(zhi)、疫苗(miao)免(mian)疫(yi)原(yuan)性(xing)及糖(tang)靶向藥(yao)物篩選研究。

糖基(ji)化(hua)修(xiu)飾增(zeng)強：β4GalT1 活性(xing)達 45U/mg 蛋(dan)白（野(ye)生(sheng)型(xing) MDCK 為 14U/mg，MDCK-C65 為 16U/mg），可(ke)催(cui)化生(sheng)成(cheng)更多含 β-1,4 - 半(ban)乳糖(tang)的(de)糖鏈(lian)結(jie)構(gou)，細胞(bao)表面(mian) N - 糖(tang)鏈(lian)中(zhong)雙(shuang)天線型(xing)結(jie)構(gou)比例(li)達 65%（野(ye)生(sheng)型(xing)為 35%）；與 MDCK-C65 的(de)多受(shou)體特(te)征不(bu)同(tong)，其(qi)核心優勢(shi)在(zai)於(yu)優化(hua)病(bing)毒蛋白的(de)糖基(ji)化(hua)模式，如(ru)流感病(bing)毒 HA 蛋白的(de)糖基(ji)化(hua)位點利(li)用率從野(ye)生(sheng)型(xing)的(de) 70% 提升(sheng)至 95%。

病(bing)毒糖蛋(dan)白成(cheng)熟促(cu)進：支(zhi)持流感病(bing)毒復制(zhi)時，HA 蛋(dan)白的(de)糖基(ji)化(hua)修(xiu)飾更wan全(quan)，三聚(ju)體形(xing)成(cheng)效(xiao)率(lv)提(ti)升(sheng) 40%（與 MDCK-C65 相(xiang)比(bi)，病(bing)毒滴度(du)相(xiang)近(jin)但 HA 蛋(dan)白穩定性(xing)更高(gao)）；純(chun)化的(de) HA 蛋白在 MDCK-G1 中半(ban)衰(shuai)期達 36 小(xiao)時（野(ye)生(sheng)型(xing)為 20 小(xiao)時，MDCK-C65 為 22 小(xiao)時），體現(xian)糖(tang)基(ji)化(hua)對病(bing)毒蛋白穩定性(xing)的(de)提升(sheng)作(zuo)用。

免疫(yi)原(yuan)性(xing)調節(jie)作(zuo)用：經該(gai)細胞(bao)系生(sheng)產(chan)的(de)病(bing)毒樣顆(ke)粒（VLP），其糖(tang)蛋白與樹突(tu)狀細胞(bao)的(de)結(jie)合(he)效(xiao)率(lv)是(shi) MDCK-C65 的(de) 2 倍，可(ke)誘(you)導(dao)更高(gao)水(shui)平(ping)的(de)中和(he)抗(kang)體（效(xiao)價提(ti)升 1.8 倍），因(yin)糖基(ji)化(hua)修(xiu)飾更接(jie)近天然病(bing)毒，模擬了(le)宿主對病(bing)毒的(de)免疫(yi)識(shi)別(bie)特(te)征。

糖(tang)基(ji)化(hua)對病(bing)毒入侵(qin)的(de)影(ying)響：利(li)用 MDCK-G1 細胞發現(xian)，流感病(bing)毒 HA 蛋白的(de)第(di) 165 位(wei)糖(tang)基(ji)化(hua)可(ke)遮蔽其(qi)與 SAα2,6 受(shou)體的(de)結(jie)合(he)位點(dian)（結(jie)合(he)力下降 60%），而 MDCK-C65 中因(yin)受(shou)體高(gao)表達可(ke)部(bu)分抵消(xiao)該(gai)影(ying)響（感染(ran)率(lv)僅(jin)下降 20%）；該(gai)糖基(ji)化(hua)位點缺失(shi)會(hui)導(dao)致病(bing)毒在 CBE1 呼(hu)吸道細胞(bao)中的(de)復制(zhi)能(neng)力(li)提升(sheng) 3 倍，揭示(shi)糖(tang)基(ji)化(hua)通過(guo)調節(jie)受(shou)體結(jie)合(he)影(ying)響病(bing)毒組織(zhi)嗜(shi)性(xing)。

糖基(ji)化(hua)與病(bing)毒免疫(yi)逃(tao)逸(yi)：在 MDCK-G1 中(zhong)連續傳(chuan)代的(de) H3N2 流感病(bing)毒，HA 蛋白新(xin)增(zeng) 2 個糖(tang)基(ji)化(hua)位點，可(ke)使(shi)中和抗(kang)體的(de)識別(bie)效(xiao)率(lv)下降 70%（該(gai)現(xian)象在 MDCK-C65 中(zhong)因(yin)受(shou)體幹擾不易觀(guan)察(cha)），通過(guo)糖基(ji)化(hua)位點預(yu)測發現(xian)，這(zhe)些(xie)位點恰(qia)位(wei)於(yu)抗(kang)體識(shi)別(bie)的(de)抗(kang)原(yuan)表(biao)位(wei)附(fu)近(jin)，證(zheng)實(shi)糖基(ji)化(hua)是(shi)病(bing)毒免疫(yi)逃(tao)逸(yi)的(de)重(zhong)要策略(lve)。

疫(yi)苗株(zhu)糖(tang)基(ji)化(hua)優化(hua)：生(sheng)產(chan)流感疫苗時(shi)，MDCK-G1 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)的(de)病(bing)毒疫苗(miao)中(zhong) HA 蛋(dan)白的(de)糖基(ji)化(hua)模式與人體分(fen)離(li)株(zhu)的(de)壹致性(xing)達 88%（MDCK-C65 為 65%），免疫(yi)小(xiao)鼠後(hou)產(chan)生(sheng)的(de)交叉(cha)中和(he)效(xiao)價對(dui)變異(yi)株(zhu)提(ti)升 2.3 倍；與 MDCK-C65 相(xiang)比(bi)，其優勢(shi)不(bu)在於(yu)產(chan)量(liang)而在於(yu)疫(yi)苗質(zhi)量(liang)，尤(you)其適(shi)合(he)需要保留(liu)關鍵糖基(ji)化(hua)位點的(de)疫苗(miao)研(yan)發。

病(bing)毒樣顆(ke)粒（VLP）制(zhi)備：構(gou)建的(de)流感 VLP 在 MDCK-G1 中糖(tang)基(ji)化(hua)更完善(shan)，免疫(yi)原(yuan)性(xing)顯(xian)著(zhu)提升(sheng)，小(xiao)鼠攻毒保護率(lv)達 90%（MDCK-C65 制(zhi)備的(de) VLP 保護率(lv)為 75%），且因(yin)不含病(bing)毒核酸更(geng)安(an)全(quan)，jie決(jue)了(le)傳統(tong)疫苗(miao)的(de)毒力殘(can)留(liu)問題。

糖(tang)基(ji)轉(zhuan)移酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑篩(shai)選：建立(li)基(ji)於(yu) β4GalT1 活(huo)性(xing)的(de)篩選模型，某(mou)天然產(chan)物(wu)可(ke)特(te)異(yi)性(xing)抑(yi)制(zhi)該(gai)酶(mei)（IC₅₀=2.3μM），在(zai) MDCK-G1 中使流感病(bing)毒 HA 糖基(ji)化(hua)下降 50%，病(bing)毒復制(zhi)抑(yi)制(zhi)率達(da) 85%，而對 MDCK-C65 的(de)影(ying)響主要體現(xian)為受(shou)體結(jie)合(he)受(shou)阻（機(ji)制(zhi)不同(tong)），動物實(shi)驗(yan)顯(xian)示其(qi)可(ke)降(jiang)低小(xiao)鼠肺(fei)部(bu)病(bing)毒載量(liang) 10⁴倍。

糖鏈(lian)識(shi)別(bie)抗(kang)體開發：利(li)用該(gai)細胞(bao)系表達(da)的(de)糖基(ji)化(hua) HA 蛋白，篩選出可(ke)識(shi)別(bie)特(te)定糖(tang)表位(wei)的(de)抗(kang)體，該(gai)抗(kang)體在(zai) MDCK-G1 中(zhong)對不(bu)同(tong)亞(ya)型流感病(bing)毒的(de)中和(he)率(lv)均＞80%（MDCK-C65 中因(yin)受(shou)體差(cha)異(yi)中和(he)譜(pu)較(jiao)窄(zhai)），為廣譜抗(kang)病(bing)毒抗(kang)體設(she)計提(ti)供新(xin)方(fang)向(xiang)。

優勢(shi)：

局限(xian)性(xing)：